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α-烯醇化酶重组质粒的构建及其表达形式的研究

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成果类型:
期刊论文、会议论文
作者:
宁兴旺;谢小兵;朱惠斌;王述湘;葛金文(葛金文
作者机构:
[葛金文; 宁兴旺; 谢小兵; 朱惠斌; 王述湘] 湖南中医药大学第一附属医院医学检验中心
[葛金文; 宁兴旺; 谢小兵; 朱惠斌; 王述湘] 湖南中医药大学中西医结合学院
语种:
中文
关键词:
α-烯醇化酶;原核表达;重组质粒;表达形式
期刊:
医学信息
ISSN:
1006-1959
年:
2014
期:
20
页码:
233
会议名称:
第一次全国中西医结合检验医学学术会议
会议论文集名称:
第一次全国中西医结合检验医学学术会议论文集
会议时间:
2014-06-12
会议地点:
北京
会议赞助商:
中国中西医结合学会
基金类别:
湖南省科技厅国际合作课题;项目编号2012WK3059
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
第一中医临床学院
中西医结合学院
摘要:
目的:构建α-烯醇化酶(alpha enolase,EN01)重组表达质粒,并研究其表达形式。方法:以人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)总RNA为模板合成cDNA;根据EN01基因序列,设计上下游引物,以cDNA为模板,经多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增得到目的基因片段EN01
摘要(英文):
Objective To construct an alpha enolase (ENO1) recombinant expression plasmid, and study its expression form. Methods The cDNA was synthesized using total RNA of Human Umbilical Vein Endothelial Cel (HUVEC) as the template. ENO1 gene was amplified from cDNA using specific forward and reverse primers by polymerase chain reaction (PCR). The recombinant expression vector was obtained by ligating ENO1 gene and pET28 (a) using T4 ligase. ENO1 protein was produced by transfecting expression vector pET28 (a)-ENO1 into BL21 (DE3) E.Coli. and subsequent IPTG induction. The supernatant and bacteria prec...

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