作者： 刘洋;陈颂;龚盛强;葛金文（葛金文）;朱惠斌

期刊： 中国免疫学杂志,2018年34(4):496-501 ISSN：1000-484X

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 421001;广州中医药大学热带医学研究所, 广州, 510405;湖南中医药大学, 长沙, 421001;[葛金文] 湖南中医药大学, 长沙, 421001;[刘洋; 龚盛强; 朱惠斌] 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 421001

关键词： 聚肌胞苷酸;地塞米松;胸腺萎缩

摘要： 目的:比较聚肌胞苷酸Poly(I:C) 、地塞米松(DEX)对小鼠胸腺的影响和RLR通路的改变,为研究病毒感染导致胸腺受损的机制,选择合适的动物模型提供实验依据。方法:将24只8周龄C57BL/6小鼠随机分组,分别给予Poly(I ∶ C) 、DEX及生理盐水。观察胸腺指数、胸腺组织学变化、外周血中T细胞受体重排删除环(TRECs)的含量以及初始型CD4~+ T细胞的比例,并检测胸腺组织RLR/MAVS /IFN-α/β通路的表达情况。结果:Poly(I ∶C)和DEX都可以导致胸腺萎缩和组织结构破坏,DEX组更严重且皮质区细胞减少更为明显。两组的TRECs均下降。Poly(I ∶C)组的初始型CD4~+ T细胞有增加趋势;而DEX组的CD4~+T细胞初始/记忆亚群比例改变不明显。DEX组RIG-Ⅰ、MDA5、LGP2和IFN-α/β表达上调明显;而Poly(I ∶ C)组虽略有上调、但无统计学意义。结论:两种造模方法均可诱导胸腺功能受损。DEX诱导的胸腺损伤更严重且伴有RLR———Ⅰ型IFN通路的大幅上调;而在Poly(I ∶C)组该通路仅轻微上调。

语种： 中文

作者： 易亚乔（易亚乔）;方锐;葛金文（葛金文）;成绍武;王国佐（王国佐）;...

期刊： 中国中药杂志,2018年43(16):3376-3381 ISSN：1001-5302

通讯作者： Ge, J.-W.

作者机构： [葛金文; 王国佐; 易亚乔; 成绍武] Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China;[方锐] School of Medicine, Hangzhou Normal University, Hangzhou 310018, China;[刘林] First Affiliated Hospital of Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410007, China

通讯机构： Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, China

关键词： 痴呆;用药规律;数据挖掘;关联分析

摘要： 基于历代医家治疗痴呆相关病症医案方药,探讨古代痴呆用药与组方规律。计算机加手工检索《中华医典》《中华传世医书》等中医文献集及数字图书馆记载的历代痴呆相关病症临证医案(囊括汉代至清代方书),建立历代医家治疗痴呆方药规范化数据库,运用频数统计与关联规则(Apriori算法、改进的互信息法与复杂系统熵聚类)分析方法挖掘历代医家治疗痴呆方剂的用药特点与组方规律。对最终筛选出的156首方剂、共123味中药进行分析,药物总频次11 747次,挖掘出8个核心方药。确定方剂中药物的使用频次和药物之间的规则与算法,发现历代医家治疗痴呆方剂的高频药物为茯苓、远志、人参、石菖蒲、甘草、当归、麦冬、白术、熟地黄与干姜等;药物配伍以气血双补、阴阳平调与开窍宁心为主;药物性味以温性、甘(淡)味药为主,归经以心经、肾经、肝经与脾经为主;核心方药为人参、茯苓、远志、石菖蒲、白术等的组合加减。高频药物和核心组方体现了历代医家治疗痴呆医案的组方法则以益气健脾开窍为主,辨证予以滋阴、补血、化痰与温阳等。关联规则挖掘历代医家治疗痴呆用药特点、组方规律有助于指导中医药防治痴呆的临床实践。

语种： 中文

作者： 贺旭;葛金文（葛金文）;邓凤君;宋祯彦（宋祯彦）;潘爱华;...

期刊： 解剖学杂志,2018年41(2):160-162 ISSN：1001-1633

作者机构： [贺旭] 益阳医学高等专科学校解剖学教研室;[葛金文; 宋祯彦; 贺旭] 湖南中医药大学中西医结合学院;[贺旭; 潘爱华; 严小新] 中南大学基础医学院人体解剖学与神经生物学系;[邓凤君] 益阳医学高等专科学校药学系

关键词： 转录因子;侧脑室;室管膜区;神经元;大鼠

摘要： 目的:探讨健康大鼠侧脑室室管膜区(SVZ区)Sp8与微管相关蛋白Doublecortin (DCX)的表达.方法:1、6、12月龄SD大鼠被处死.脑冠状位切片,免疫荧光单标染色观察1、6、12月龄组SVZ区Sp8细胞与DCX细胞的表达,免疫荧光双标染色观察1月龄组Sp8/GFAP、Sp8/Ki67的共表达情况。结果月龄组SVZ区Sp8细胞、DCX细胞密度均显著高于6月龄组及12月龄组;除此之外,1月龄组SVZ区有Sp8/GFAP、Sp8/Ki67的共表达细胞.结论:Sp8与DCX在大鼠的SVZ区有广泛的表达;Sp8调控SVZ区神经发生和星形胶质干细胞的分化.

语种： 中文

作者： 兰斌;龚盛强;成绍武;贺超;廖君;...

期刊： 基础医学与临床,2018年38(9):1337-1341 ISSN：1001-6325

作者机构： 湖南中医药大学, 中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室, 湖南, 长沙, 410208;湖南中医药大学医学院, 湖南, 长沙, 410208;[葛金文; 王国佐; 兰斌; 龚盛强; 成绍武; 贺超] 湖南中医药大学, 中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室, 湖南, 长沙, 410208;[廖君] 湖南中医药大学医学院, 湖南, 长沙, 410208

关键词： 铁死亡;铁代谢;脂质过氧化;活性氧

摘要： 铁死亡是近年发现的一种铁依赖性脂质过氧化和活性氧（ROS）诱导的调节性细胞死亡,在细胞形态特征和生化指标等方面与细胞凋亡、自噬和程序性坏死等死亡方式存在较大差别,并显著涉及肿瘤、神经系统和缺血再灌注损伤等多种临床疾病。深入认识铁死亡可为相关疾病的防治提供新的思路。

语种： 中文

作者： 苏丽清;刘杰;张燕辉;胡华;易亚乔;...

期刊： 中华中医药杂志,2017年32(11):5162-5166 ISSN：1673-1727

作者机构： 湖南中医药大学, 长沙, 410208;湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007;[葛金文; 苏丽清; 刘杰; 张燕辉; 易亚乔] 湖南中医药大学, 长沙, 410208;[胡华] 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007

关键词： 依达拉奉;丹红注射液;联合用药;急性脑梗死;疗效

摘要： 目的:评价依达拉奉联合丹红注射液对急性脑梗死(ACI)大鼠的疗效和安全性。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、丹红注射液组、依达拉奉联合丹红注射液组(联合用药组),采用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉脑缺血(MCAO)模型,除假手术组外,每组按不同时间点(1、3、5、7d)分为4个亚组,观察比较各组大鼠各时相的疗效评价指标(神经功能缺损评分、脑组织梗死体积、脑组织含水量、脑组织形态学改变)及安全性评价指标。结果:与模型组比较,假手术组各项疗效评价指标数值均存在显著差异(P<0.05,P<0.01);与其他用药组比较,模型组各项疗效评价指标及部分安全性评价指标数值均存在显著差异(P<0.05,P<0.01);依达拉奉组与丹红组比较,各项疗效评价指标及安全性指标数值无显著差异;各单药组与联合用药组比较,各项疗效指标数值存在显著性差异(P<0.05),尤以联合用药组第5、7天差异最为显著(P<0.01)。结论:依达拉奉联合丹红注射液治疗ACI疗效优于单用依达拉奉或丹红注射液,且治疗效果可靠安全,并且随治疗时间延长,对脑梗死的改善作用越明显。

语种： 中文

作者： 胡华;杨元元;刘晶;张燕辉;刘杰;...

期刊： 中华中医药杂志,2017年32(10):4683-4689 ISSN：1673-1727

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007;湖南中医药大学, 长沙, 410208;[葛金文; 杨元元; 刘晶; 张燕辉; 刘杰] 湖南中医药大学, 长沙, 410208;[胡华] 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007

关键词： 丹红注射液;依达拉奉;急性脑梗死;系统评价

摘要： 目的:系统评价丹红注射液联合依达拉奉治疗急性脑梗死的疗效和安全性。方法:通过检索中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、维普期刊数据库、万方期刊数据库、美国国立医学图书馆数据库从2011年1月至2016年12月的中英文文献,选择符合纳入及排除标准的随机对照试验,对纳入文献进行质量评价,采用RevMan 5.3版软件进行Meta分析。结果:共纳入24个研究,2 266例患者。丹红注射液联合依达拉奉在疗效方面对比单用丹红注射液、依达拉奉及常规治疗有优势,疗效合并效应量(RR=122, 95%CI[1.18, 1.27], P<0.00001);在神经功能缺损改善方面优于丹红对照组,合并效应量(MD=-3.58,95%CI[-4.23, -2.93], P<0.00001);在日常生活能力改善方面比丹红注射液对照组及依达拉奉对照组有效,合并效应量(MD=15.62, 95%CI[13.43, 17.81], P<0.00001);而在安全性方面与对照组无差异,合并效应量(RR=1.46, 95%CI[0.61, 3.47], P=0.91)。结论:丹红注射液联合依达拉奉治疗急性脑梗死疗效较单用一种注射剂及常规治疗显著,能减轻近期致残率,且较安全,但仍需后续大样本、高质量文献支持研究。

语种： 中文

作者： 贺旭;刘英飞;罗明英;成绍武（成绍武）;葛金文（葛金文）

期刊： 中国康复理论与实践,2017年23(12):1384-1389 ISSN：1006-9771

作者机构： 益阳医学高等专科学校解剖教研室, 中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室, 湖南, 益阳, 413000;益阳医学高等专科学校附属医院内一科, 湖南, 益阳, 413000;昆明医科大学人体解剖教研室, 云南, 昆明, 650500;湖南中医药大学中西医结合学院, 中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室, 湖南, 长沙, 410208;[葛金文; 成绍武] 湖南中医药大学中西医结合学院, 中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室, 湖南, 长沙, 410208

关键词： 血管性痴呆;丰富环境;室管膜下区;神经再生;大鼠

摘要： 目的探讨丰富环境(EE)对血管性痴呆大鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)神经再生的影响。方法29只大鼠分成假手术组(n=5)、血管性痴呆组(VD组,n=12)和丰富环境组(EE组,n=12)。采用两血管阻断法(2-VO)制作血管性痴呆模型。VD组和假手术组常规饲养条件下饲养,EE组给予丰富环境干预。30 d后免疫组织化学染色观察SVZ微管相关蛋白Doublecortin(DCX)与外源性细胞增殖标记物BrdU的表达,免疫荧光双标观察SVZ DCX/Ki67、DCX/p-cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的共表达情况。结果与假手术组相比,VD组BrdU~+细胞数目(t=2.989, P=0.026)、DCX~+细胞平均光密度值(t=3.069, P=0.005)增加;与VD组比较,EE组 BrdU~+细胞数目(t=3.067, P=0.027)、DCX~+细胞平均光密度值(t=2.907, P=0.011)进一步增加。EE组DCX/Ki67(t=2.994, P=0.040)、 DCX/p-CREB(t=4.707, P=0.009)共表达细胞高于VD组。结论丰富环境可通过CREB信号通路上调血管性痴呆大鼠SVZ神经再生水平。

语种： 中文

作者： 贺旭;刘英飞;王伟;赵宏;严小新;...

期刊： 中草药,2017年48(22):4695-4700 ISSN：0253-2670

通讯作者： Ge, J.-W.

作者机构： [贺旭] 益阳医学高等专科学校 解剖教研室,湖南益阳413000;[贺旭] 中南大学基础医学院 人体解剖与神经生物学系,湖南长沙410013;[贺旭] 湖南中医药大学中西医结合学院,湖南长沙410208;[刘英飞] 益阳医专附属医院 内一科,湖南益阳,413000;[王伟; 赵宏] 益阳医学高等专科学校 解剖教研室,湖南益阳,413000

通讯机构： [Ge, J.-W.] D;Department of Integrated Traditional and Western Medicine, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, China

关键词： 三七总皂苷;全脑缺血;海马;胶质纤维酸性蛋白;神经再生

摘要： 目的探讨三七总皂苷(TSPN)对全脑缺血后成年大鼠海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达及脑水肿的影响。方法采用四血管阻断法制作全脑缺血模型,大鼠被随机分成假手术组、模型组和TSPN组。TSPN组大鼠全脑缺血后30 min ip 75 mg/kg TSPN,每天1次,假手术组和模型组ip给予等体积的生理盐水,连续14 d。分别于再灌注1、3、7、14 d后处死。采用干湿法计算各组大鼠脑组织含水量,免疫组织化学染色观察海马齿状回(SGZ)区GFAP的表达,免疫荧光双标观察SGZ区GFAP/DCX的共表达情况,免疫印迹技术检测海马CA1区GFAP蛋白表达水平。结果TSPN组大鼠脑组织含水量显著低于模型组(P<0.05);TSPN组、模型组SGZ区GFAP~+细胞密度值在3、7、14 d有统计学差异(P<0.05);两组 SGZ区GFAP/DCX共表达细胞与DCX阳性表达细胞数目的比值在第7、14天差异显著(P<0.05);免疫印迹结果显示TSPN组海马CA1区GFAP蛋白表达水平在第3、7、14天显著高于模型组(P<0.05)。结论 TSPN可通过促进全脑缺血后大鼠 SGZ区星形胶质细胞活化、促进神经再生、减轻脑水肿而发挥神经保护作用。

语种： 中文

作者： 宁兴旺;陈颂;陈滢宇;刘洋;朱惠斌;...

期刊： 中华中医药杂志,2017年32(12):5543-5547 ISSN：1673-1727

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院医学检验中心, 长沙, 410007;广州中医药大学热带医学研究所, 广州, 510403;湖南中医药大学中西医结合学院, 长沙, 410208;[葛金文; 刘洋] 湖南中医药大学中西医结合学院, 长沙, 410208;[宁兴旺; 朱惠斌] 湖南中医药大学第一附属医院医学检验中心, 长沙, 410007

关键词： 猴免疫缺陷病毒;中间型单核细胞;人CC趋化因子受体7;中药提取物;湘A-1

摘要： 目的:探讨中药复方提取物湘A-1(HNA-1)对猴免疫缺陷病毒(SIV)慢性感染恒河猴单核细胞亚群的影响,以进一步了解HNA-1促进胸腺输出、提升初始型CD4的机制。方法:采用SIVmac239病毒液对8只中国恒河猴慢性感染16-21个月,随机分为对照组和治疗组,每组4只。治疗组给予HNA-1灌胃治疗,每日1次;对照组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。两组给药2个月。在治疗第0、28、56天采集血液检测血常规,并采用流式细胞法检测外周血单核细胞CD14~(++)CD16~-(经典型)、CD14~(++)CD16~+(中间型)和CD14dimCD16~+(非经典型)亚群的比例、各亚群表达HLA-DR、趋化因子CCR5和CCR7的情况,以及外周血单个核细胞(PBMC)表达白细胞介素(IL)-17、IL-10及转化生长因子(TGF-β)的比例。并采用酶消化法从胸腺分离所有细胞,检测胸腺内CD_3~+、 CD_(68)~+细胞的比例。结果:治疗组外周血单核细胞比例及数量无明显改变;但CD14~(++)CD16~+亚群的比例明显增高(P<0.05)。该亚群高表达HLA-DR、CCR5和CCR7。同时,治疗组胸腺内巨噬细胞标记CD_(68)~+细胞的比例显著高于对照组(P<0.05)。治疗后PBMC表达IL-10显著降低(P<0.05)。结论:治疗后CD14~(++)CD16~+单核细胞增加、归巢进入胸腺并分化为巨噬细胞,可能是HNA-1提高外周初始型CD4、促进胸腺输出的疗效基础;其临床价值尚有待进一步研究评估。

语种： 中文

作者： 胡华;张燕辉;刘杰;苏丽清;易亚乔;...

期刊： 中华中医药杂志,2017年32(9):4243-4248 ISSN：1673-1727

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007;湖南中医药大学, 长沙, 410208;[葛金文; 张燕辉; 刘杰; 苏丽清; 易亚乔] 湖南中医药大学, 长沙, 410208;[胡华] 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007

关键词： 急性脑梗死;MCAO模型;依达拉奉;疏血通注射液;联合用药

摘要： 目的:评价依达拉奉联合疏血通注射液治疗急性脑梗死大鼠的疗效和安全性。方法:将SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、依达拉奉组、疏血通组、依达拉奉联合疏血通组,采用线栓法复制大鼠左侧大脑中动脉脑缺血(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,除假手术组外,每组按不同时间点(1、3、5、7d)分为4个亚组,术后各组腹腔注射相应药物,1次/d,连续给药1、3、5、7d,模型组、假手术组分别予以等体积0.9%氯化钠溶液,观察比较各组大鼠神经功能缺损评分、脑组织梗死体积、脑组织含水量、脑组织形态学改变及白细胞计数(WBC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、活化部分凝血活酶时间(APTT)等变化。结果:与假手术组比较,其余各组神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑梗死体积均显著增高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各用药组的神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑梗死体积和安全性评价指标(WBC、AST、APTT)均有不同程度降低(P<0.05,P<0.01);与依达拉奉组、疏血通组比较,联合用药组的神经功能缺损评分、脑组织含水量、脑梗死体积减少更明显(P<0.05,P<0.01),安全性指标差异无统计学意义。结论:依达拉奉联合疏血通在改善大鼠神经功能缺损症状、减少脑梗死体积、减轻脑水肿3个方面均优于依达拉奉组、疏血通组,且不良反应发生率低,安全性较好。

语种： 中文

作者： 胡华;张燕辉;刘杰;杨元元;刘晶;...

期刊： 中华中医药杂志,2017年32(12):5453-5458 ISSN：1673-1727

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007;湖南中医药大学, 长沙, 410208;[葛金文; 张燕辉; 刘杰; 杨元元; 刘晶] 湖南中医药大学, 长沙, 410208;[胡华] 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007

关键词： 急性脑梗死;神经保护剂;中成药;联合应用;研究思路

摘要： 脑血管病以其高发病率、高复发率和高致残率的特点,在国内致死疾病因中高居榜首,严重危害着人类的健康和生活。急性脑梗死是最常见的卒中类型。预防继发性脑损伤和减少残疾的神经保护剂是治疗脑梗死主要手段之一。中药多层次、多靶点、多途径的特点对治疗脑梗死具有独特优势。文章总结近年来神经保护剂及中成药防治脑梗死的作用机制及应用,提出神经保护剂联合中成药治疗急性脑梗死的实验及临床研究思路,为神经保护剂联合中成药治疗脑梗死研究提供参考。

语种： 中文

作者： 贺旭;葛金文（葛金文）;黄俊;潘爱华;李志远

期刊： 中草药,2016年47(9):1535-1540 ISSN：0253-2670

通讯作者： Huang, J.

作者机构： [李志远; 潘爱华] Department of Anatomy and Neurobiology, School of Basic Medical Science, Central South University, Changsha, 410013, China;Department of Anatomy, Yiyang Medical College, Yiyang, 413000, China;[葛金文] Department of Integrated Traditional and Western Medicine, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410208, China;Department of Anatomy, Shaoyang Medical College, Shaoyang, 422000, China;[黄俊] Department of Anatomy and Neurobiology, School of Basic Medical Science, Central South University, Changsha, 410013, China, Department of Anatomy, Shaoyang Medical College, Shaoyang, 422000, China

通讯机构： [Huang, J.] D;Department of Anatomy and Neurobiology, School of Basic Medical Science, Central South University, Changsha, China

关键词： 三七总皂苷;侧脑室室管膜区;神经再生;迁移;全脑缺血

摘要： 目的探讨三七总皂苷(TSPN)对全脑缺血后成年大鼠侧脑室室管膜区(SVZ)神经再生的影响。方法采用四血管阻断法制作全脑缺血模型。大鼠分成假手术组、模型组和TSPN组。TSPN组大鼠全脑缺血后30 min ip给予剂量为75 mg/kg的TSPN,每天1次,模型组给予等体积的生理盐水,连续14 d。分别于再灌注1、3、7、14 d处死大鼠,免疫组织化学染色观察SVZ区BrdU和微管相关蛋白Doublecortin(DCX)的表达,免疫荧光双标观察SVZ区BrdU/DCX、DCX/Ki67、 GFAP/DCX的共表达情况。结果TSPN组SVZ区7、14 d的BrdU+细胞数目均显著高于模型组对应的时间点(P<0.01、 0.001);TSPN组和模型组SVZ区DCX+细胞的平均光密度值在7、14 d有统计学差异(P<0.01、0.001);TSPN组SVZ区14 d的BrdU/DCX细胞,均显著多于模型组(P<0.01);TSPN组SVZ区Ki67/DCX细胞在7、14 d的表达多于模型组,差异显著(P<0.01、0.001);两组SVZ区GFAP/DCX细胞与DCX的比值在3、7、14 d差异显著(P<0.05、0.001)。结论TSPN促进全脑缺血后大鼠SVZ区神经再生,加速全脑缺血后大鼠SVZ区神经祖细胞增殖和分化,促进全脑缺血后大鼠SVZ区星形胶质细胞转化新生未成熟神经元。

语种： 中文

作者： 贺旭;葛金文（葛金文）;邓长青;郭太平;潘爱华;...

期刊： 中草药,2016年47(8):1337-1344 ISSN：0253-2670

通讯作者： Li, Z.-Y.

作者机构： [李志远; 潘爱华] Department of Anatomy and Neurobiology, School of Basic Medical Science, Central South University, Changsha, 410013, China;Department of Anatomy, Yiyang Medical College, Yiyang, 413000, China;[葛金文; 邓长青] Department of Integrated Traditional and Western Medicine, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410208, China;[郭太平] Acupuncture-moxibustion-Tuina and Rehabilitation School, Yunnan University of Traditional Chinese Medicine, Kunming, 650500, China;[贺旭] Department of Anatomy and Neurobiology, School of Basic Medical Science, Central South University, Changsha, 410013, China, Department of Anatomy, Yiyang Medical College, Yiyang, 413000, China

通讯机构： [Li, Z.-Y.] D;Department of Anatomy and Neurobiology, School of Basic Medical Science, Central South University, Changsha, China

关键词： 三七总皂苷;凋亡;海马CA1区;全脑缺血

摘要： 目的探讨三七总皂苷(TSPN)抑制大鼠全脑缺血后海马CA1区神经元的凋亡作用及其相关机制。方法采用四血管阻断法制备大鼠全脑缺血模型,缺血后30 min再灌注;大鼠分成假手术组、模型组和TSPN组。TSPN组ip不同剂量(25、50、75、100 mg/kg)TSPN。再灌注第14天,通过海马CA1区尼氏染色和大鼠的生存率确定TSPN发挥神经保护作用的最佳剂量。对模型组和最佳剂量TSPN组大鼠在不同再灌注时间点(1、3、7、14 d)进行神经功能评分,采用免疫组化法观察CA1区Caspase-3、Bcl-2、Bax的阳性细胞密度,并采用免疫印迹技术检测Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白在海马的表达水平。结果75 mg/kg TSPN组大鼠生存率为100%,CA1区神经元密度显著高于模型组和其他剂量TSPN组(P<0.05); TSPN(75 mg/kg)组神经功能评分显著少于模型组(P<0.01);TSPN(75 mg/kg)组CA1区Caspase-3阳性细胞密度在全脑缺血第7、14天显著低于模型组(P<0.001);20 000的Caspase-3第3、7、14天的蛋白水平及17 000的Caspase-3在第7、14天蛋白水平均显著低于模型组(P<0.001);TSPN(75 mg/kg)组CA1区Bcl-2阳性细胞密度及蛋白水平在第7、14天高于模型组(P<0.001),而Bax阳性细胞密度第7、14天低于模型组(P<0.001),TSPN组第3、7、14天海马Bax蛋白水平显著低于模型组(P<0.001);TSPN组Bcl-2和Bax阳性细胞及蛋白水平的比值在第7、14天显著高于模型组(P< 0.001)。结论TSPN可通过上调Bcl-2和Bax阳性细胞和蛋白水平的比值,减少Caspase-3的活化而抑制全脑缺血后大鼠海马CA1区神经元的凋亡。

语种： 中文

作者： 邓桂明;向彪;肖小芹（肖小芹）;葛金文（葛金文）;陈镇;...

期刊： 中药材,2016年39(10):2229-2236 ISSN：1001-4454

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007;湖南中医药大学中西医结合学院, 湖南, 长沙, 410208;湖南省肿瘤医院, 湖南, 长沙, 410013;[葛金文; 肖小芹] 湖南中医药大学中西医结合学院, 湖南, 长沙, 410208;[邓桂明; 向彪; 陈镇; 魏凤] 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007

关键词： 乌药;化学成分;挥发油

摘要： 目的:研究湖南产乌药化学成分。方法:分别采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用法和液相色谱-质谱(UPLC-ESI-MS/MS)对乌药中挥发油和甲醇提取物的化学成分进行分析。在GC-MS中,以HP-5MS毛细管柱(30 m ×0.25 mm,0.25 μm)为色谱柱,采用程序升温法,EI离子源,扫描质量范围为m/z 35~400 amu;在UPLC-ESI-MS/ MS中,以Acquity UPLC BH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)为色谱柱,采用0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,ESI源,扫描质量范围为m/z 100~1 200。结果:利用GC-MS法共鉴定了乌药中68个挥发性成分,主要为单萜类物质。利用UPLC-ESI-MS/MS法在甲醇提取物中共鉴定出42个化合物,其中24个呋喃倍半萜及其内酯、10个生物碱、6个黄烷醇多酚及其缩合物、1个有机酸和1个甾醇类化合物。结论:系统研究了湖南产乌药中的化学成分,为湖南产乌药的药效物质基础及质量控制研究提供一定的理论依据。

语种： 中文

作者： 罗银河;葛金文（葛金文）;刘林;王国佐（王国佐）;易亚乔;...

期刊： 中华中医药杂志,2016年31(8):3241-3246 ISSN：1673-1727

作者机构： 湖南中医药大学, 长沙, 410208;湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007;[葛金文; 王国佐; 罗银河; 易亚乔; 廖君; 石咏梅] 湖南中医药大学, 长沙, 410208;[刘林] 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007

关键词： 补阳还五汤;缺氧;脑微血管内皮细胞;血清药理学;血浆药理学;体内实验

摘要： 目的:比较补阳还五汤含药血清和含药血浆对缺氧培养的大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)纤溶系统和黏附分子的表达与体内实验真实值的接近程度,为半体内实验选择含药血浆还是含药血清提供参考依据。方法:用颈内动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,缺氧培养箱孵育BMECs,采用ELISA法测定PAI-1、tPA的表达,RT-PCR法检测ICAM-1、VCAM-1 mRNA的含量,Western Blot法测定ICAM-1、VCAM-1蛋白的含量。结果:补阳还五汤含药血浆较含药血清更显著降低缺氧损伤大鼠BMECs PAI-1、增强tPA水平,含药血浆和含药血清均能明显降低ICAM-1、VCAM-1、ICAM-1 mRNA及VCAM-1 mRNA含量,与空白血浆、空白血清比较,差异显著(P<0.05); 半体内实验的含药血浆与体内实验真实值各指标相关系数均高于含药血清。结论:含药血浆比含药血清更接近体内真实情况,在进行半体内实验研究中药复方对纤溶系统和黏附分子蛋白及mRNA表达的影响时,特别是研究纤溶系统PAI-1和tPA指标的表达时,建议优先选择血浆药理学方法。

语种： 中文

作者： 田维毅;葛金文（葛金文）;陈育;于红红;冷泠;...

期刊： 时珍国医国药,2015年26(2):328-329 ISSN：1008-0805

作者机构： [葛金文; 田维毅] 湖南中医药大学中西医结合学院;[于红红; 冷泠] 贵阳中医学院;[陈育] 贵阳中医学院第一附属医院;[张勇民] 法国国家中心实验室

关键词： 中药多糖;免疫调节;集落刺激因子;动物实验

摘要： 目的探索黄芪等中药调节机体免疫功能的物质基础及其部分机制。方法提取黄芪、枸杞、香菇、地黄、防风、当归、柴胡、板蓝根、蒲公英等9味中药多糖组分,分大、中、小剂量灌胃干预实验小鼠,连续给药7d 后,采用ELISA 法检测实验动物血清中粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子(GM - CSF)、粒细胞集落刺激因子(G - CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M- CSF)等细胞因子水平,并与空白对照组比较。结果 ① 黄芪、枸杞、地黄等3味中药多糖组分一定浓度组小鼠血清 GM- CSF、G - CSF、M - CSF 中一个或多个集落刺激因子较空白对照组显著升高(P<0.05或 P<0.01),且具有浓度差异性(P<0.05或P<0.01);②当归多糖组分各浓度组小鼠血清M - CSF 水平较空白对照组显著减低(P<0.01),且具有浓度差异性(P<0.01)。结论黄芪、枸杞、地黄、当归等4味中药的多糖组分对机体集落刺激因子的干预效应的可能是这些中药免疫调节作用的部分途径。

语种： 中文

作者： He, Xu;Deng, Feng-jun;Ge, Jin-wen（葛金文）;Yan, Xiao-xin;Pan, Ai-hua*;...

期刊： 中国神经再生研究：英文版,2015年10(9):1450-1456 ISSN：1673-5374

通讯作者： Pan, Ai-hua

作者机构： [He, Xu; Yan, Xiao-xin; Pan, Ai-hua; Li, Zhi-yuan] Cent S Univ, Dept Anat & Neurobiol, Sch Basic Med Sci, Changsha, Hunan, Peoples R China.;[He, Xu] Yiyang Med Coll, Dept Anat, Yiyang, Hunan, Peoples R China.;[Deng, Feng-jun] Yiyang Med Coll, Dept Pharm, Yiyang, Hunan, Peoples R China.;[Ge, Jin-wen] Hunan Univ Tradit Chinese Med, Dept Integrated Tradit & Western Med, Changsha, Hunan, Peoples R China.

通讯机构： [Pan, Ai-hua] C;Cent S Univ, Dept Anat & Neurobiol, Sch Basic Med Sci, Changsha, Hunan, Peoples R China.

关键词： nerve regeneration;total saponins of Panax notoginseng;cerebral ischemia/reperfusion;immature neurons;neurogenesis;doublecortin;olfactory bulb;neural regeneration

摘要： The main active components extracted from Panax notoginseng are total saponins. They have been shown to inhibit platelet aggregation, increase cerebral blood flow, improve neurological behavior, decrease infarct volume and promote proliferation and differentiation of neural stem cells in the hippocampus and lateral ventricles. However, there is a lack of studies on whether total saponins of Panax notoginseng have potential benefits on immature neuroblasts in the olfactory bulb following ischemia and reperfusion. This study established a rat model of global cerebral ischemia and reperfusion using four-vessel occlusion. Rats were administered total saponins of Panax notoginseng at 75 mg/kg intraperitoneally 30 minutes after ischemia then once a day, for either 7 or 14 days. Total saponins of Panax notoginseng enhanced the number of doublecortin (DCX)~+ neural progenitor cells and increased co-localization of DCX with neuronal nuclei and phosphorylated cAMP response element-binding/DCX~+ neural progenitor cells in the olfactory bulb at 7 and 14 days post ischemia. These findings indicate that following global brain ischemia/reperfusion, total saponins of Panax notoginseng promote differentiation of DCX~+ cells expressing immature neuroblasts in the olfactory bulb and the underlying mechanism is related to the activation of the signaling pathway of cyclic adenosine monophosphate response element binding protein.

语种： 英文

作者： 廖君;陈懿;夏兴;罗琳;石咏梅;...

期刊： 中国动脉硬化杂志,2014年22(11):1091-1096 ISSN：1007-3949

作者机构： [葛金文; 夏兴; 廖君; 罗琳; 陈懿; 余清平; 石咏梅] 湖南中医药大学

关键词： 猫白血病C亚类病毒受体;胸腺癌抵抗蛋白;脑泰方提取物;脑缺血

摘要： 目的研究脑缺血后血红素铁转运蛋白人类猫白血病C亚类病毒受体(feline leukemia virus subgroup C receptor,FLVCR)及胸腺癌抵抗蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)随时间表达及益气活血法脑泰方(黄芪、川芎、地龙、僵蚕)提取物干预对FLVCR及BCRP表达的影响。方法实验分两步进行,第一部分实验:随机将SD 大鼠分为2 h、6 h、12 h、24 h、72 h组,采用大脑中动脉栓塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)行大鼠局灶性脑缺血模型制备,分别在术后2 h、6 h、12 h、24 h、72 h各时间点取材,通过免疫组织化学及RT-PCR检测FLVCR和BCRP及FLVCR mRNA和BCRP mRNA随时间表达的变化。第二部分实验,随机将SD大鼠分为假手术组、模型组、脑泰方低、中、高剂量组(3、9、27 g/kg)。各组大鼠预处理藻胃给药连续3天,MCAO模型制备术后连续藻胃给药3天,每日1次。术后3天取材,电镜检测海马神经元内铁样颗粒分布,免疫组织化学及RT-PCR检测FLVCR和BCRP及FLVCR mRNA和BCRP mRNA表达。结果72 h组FLVCR表达明显降低(P<0. 05),BCRP的表达2 h、6 h较高,12 h、24 h、72 h表达明显降低(P<0.05);电镜下脑泰方各剂量组神经元内铁样颗粒聚集较模型组减少。脑泰方高剂量组FLVCR及FLVCR mRNA表达明显增加(P<0.05),BCRP表达无明显改变。结论大鼠脑缺血后第72 h FLVCR表达下降,益气活血中药脑泰方提取物干预可增加脑缺血后FLVCR的表达,促进血红素铁的外排,可能是治疗脑缺血损伤的新机制。

语种： 中文

作者： 田维毅;张智伟;蔡琨;于红红;冷泠;...

期刊： 中华中医药杂志,2014年29(5):1604-1607 ISSN：1673-1727

作者机构： [葛金文; 田维毅; 张智伟; 蔡琨; 于红红; 冷泠; 岳文鹏; 卢芳国] 湖南中医药大学中西医结合学院;[葛金文; 田维毅; 张智伟; 蔡琨; 于红红; 冷泠; 岳文鹏; 卢芳国] 贵阳中医学院基础医学院

会议名称： 第五届全国中医药博士生学术论坛

会议时间： 2014-04-19

会议地点： 长沙

会议论文集名称： 第五届全国中医药博士生学术论坛论文集

关键词： 蒲公英;血清药理方法;巨噬细胞

摘要： 目的:观察蒲公英含药血清对巨噬细胞(macrophage, M)功能的干预作用,探索该药抗炎免疫作用的部分机制。方法:采用蒲公英水煎剂灌胃干预清洁级SD大鼠常规制备含药血清,于96孔板中分5%、10% 和20% 3个浓度与小鼠腹腔M ф共同培养,24h后以中性红法检测Mф吞噬功能、Griess比色法检测培养上清液中NO含量、免疫组化法检测iNOS表达量、ELISA法检测培养上清中IL-6含量。结果:①与本组同浓度不加LPS 的Mф孔比较:在一定浓度的正常血清组中,经LPS活化的Mф孔吞噬功能增强、NO和IL-6分泌增加、iNOS表达增强(P<0.05, P<0.01); 一定浓度的蒲公英含药血清组中,经LPS活化的M小吞噬功能降低、NO和IL-6分泌量减少(P<0.05, P<0.01),但iNOS表达量在5%与20%浓度组减少(P<0.05,P<0.01)、在10%浓度组增强(P<0.05);②与相同浓度的正常血清组比较:一定浓度的蒲公英含药血清组未经LPS活化的M ф吞噬功能增强、NO和IL-6分泌增加、iNOS表达增强(P<0.05,P<0.01),经LPS活化的Mф吞噬功能降低、NO和IL-6分泌量减少(P<0.05,P<0.01)。结论:蒲公英含药血清对LPS刺激前后的M ф吞噬功能和炎症因子分泌功能具有不同的干预效应,这可能是其炎症免疫调节作用的重要机制之一。

语种： 中文

作者： 易亚乔（易亚乔）;伍参荣;葛金文（葛金文）;张炳填;田雪飞;...

期刊： 中华中医药杂志,2013年28(7):2135-2137 ISSN：1673-1727

作者机构： [易亚乔; 张炳填] 湖南中医药大学仲景学说教研室;[葛金文; 伍参荣; 田雪飞; 陈懿] 湖南中医药大学中西医结合基础重点学科

关键词： 桔梗总皂苷;肺腺癌A549细胞;抑制率;细胞周期阻滞;细胞凋亡

摘要： 目的:探讨桔梗总皂苷对人肺腺癌A549细胞周期及增殖抑制作用的影响。方法:体外培养肺腺癌细胞系A549细胞,MTT法检测桔梗总皂苷对人肺腺癌A549细胞增殖的影响;Giemsa染色法观察细胞形态学变化;流式细胞术检测桔梗总皂苷对A549细胞周期的影响。结果:MTT法检测显示,桔梗总皂苷能明显抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,其抑制作用随药物浓度的增加而增强,呈剂量依赖关系(P<0.05)。流式细胞仪分析检测提示不同浓度的桔梗总皂苷均能促细胞凋亡,细胞周期被阻滞于G_0/G_1期,其凋亡率随药物浓度增高而增加(P<0.05)。结论:桔梗总皂苷能抑制人肺腺癌A549细胞增殖。

语种： 中文