HBV慢性感染不同状态下肝郁脾虚与肝胆湿热证患者外周血树突状细胞及其功能研究
作者:
何芳;孙克伟;彭建平
作者机构:
[何芳; 孙克伟; 彭建平] 湖南省长沙市中心医院重大课题专项办;[何芳; 孙克伟; 彭建平] 湖南中医药大学第一附属医院
会议名称:
世界中联第四届肝病国际学术大会暨海峡两岸中医肝病研讨会
会议时间:
2011-06-01
会议地点:
厦门
会议论文集名称:
世界中联第四届肝病国际学术大会暨海峡两岸中医肝病研讨会论文集
关键词:
HBV慢性感染;肝郁脾虚证;肝胆湿热证;树突状细胞
摘要:
<正>目的观察HBV慢性感染不同状态肝郁脾虚证和肝胆湿热证患者外周血树突状细胞的功能变化,了解慢性HBV感染两证型的免疫表达特点,为中医辨证提供客观化依据。方法本研究分别从HBV慢性感染不同状态经辩证属于肝郁脾虚或肝胆湿热证的患者外周血来源的PBMCs进行体外培养,以倒置显微镜和电镜观察DCs外部形态和超微结构,应用流式细胞技术检测DCs的表面分子HLA-DR、CD80、CD86、CD1a的表达,并用ELISA试剂盒检测DCs上清液中IL-12分泌水平,采用MTT法检
语种:
中文
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HBV慢性感染过程不同阶段扶正与祛邪法干预的细胞免疫学机理研究
项目作者:
孙克伟
项目作者单位:
湖南中医药大学
项目批准号:
81072779
资助经费:
33万
立项时间:
2011-01-01到2013-12-31
项目类别:
面上项目
项目来源:
国家自科基金项目
项目关键词:
乙型肝炎;树突状细胞;T淋巴细胞;细胞免疫
项目摘要:
HBV感染后免疫紊乱/缺陷是慢性乙型肝炎难以治愈的关键原因,清除HBV并达到免疫学应答是治疗的最终目标。通过免疫学恢复治疗慢性乙型肝炎是中医疗法的主要机制。本研究以树突状细胞与T细胞共培养为免疫紊乱/缺陷的细胞模型,应用血浆药理学方法,研究HBV慢性感染过程不同阶段(慢性HBV携带、慢性乙型肝炎及HBV相关性肝癌)应用扶正(健脾与补肾)、祛邪(清热利湿解毒)及扶正祛邪法对促进树突状细胞成熟、恢复树突状细胞功能和对树突状细胞介导的乙型肝炎病毒特异性CD4+T淋巴细胞和特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)免疫应答功能的影响,并与西药核苷类药物及干扰素对照,研究不同治法治疗HBV感染后免疫紊乱/缺陷的机理差异及作用特点,为慢性HBV感染不同阶段合理应用扶正与祛邪法治疗提供思路和研究基础。
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健脾、补肾与健脾补肾三法对慢性乙型肝炎患者外周血T细胞功能的影响
作者:
陈斌;彭建平;张涛;孙克伟;彭杰;...
期刊:
湖南中医药大学学报,2011年31(11):48-51 ISSN:1674-070X
作者机构:
[陈斌; 彭建平; 张涛; 孙克伟; 彭杰] 湖南中医药大学第一附属医院;湖南中医药大学;[祁双林] 湖南中医药大学(湖南省中医药研究院)
关键词:
慢性乙型肝炎;补肾法;健脾法;补肾健脾法;T细胞
摘要:
目的 比较健脾法、补肾法和健脾补肾法对慢性乙型肝炎患者外周血T细胞功能的影响.方法 收集24例慢性乙型肝炎患者和10例健康人的抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),进一步分离提取培养T细胞,采用大鼠健脾、补肾和健脾补肾药物血浆进行干预.检测T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+及CD28+分子的表达.结果 3组药物血浆干预后CD4+分子表达率升高(P<0.05],CD8+分子表达率降低(P<0.05).补肾组药物血浆干预后CD3+表达率升高(P<0.05),补肾组和健脾补肾组药物血浆干预后CD28+分子表达率升高(P<0.05).结论 健脾法、补肾法和健脾补肾法均能调节慢性乙型肝炎患者T细胞免疫功能,补肾法对慢乙肝患者T细胞功能的影响更为显著.
语种:
中文
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补肾、健脾法对慢性HBV感染免疫耐受期患者外周血DCs功能的影响
作者:
彭建平;陈晨;孙克伟;伍玉南
作者机构:
[彭建平; 陈晨; 孙克伟; 伍玉南] 湖南中医药大学附属一院
会议名称:
全国第3届中西医结合传染病学术会议暨中国中西医结合学会传染病专业委员会第2届委员会议
会议时间:
2010-06-11
会议地点:
中国广西桂林
摘要:
<正>目的:比较补肾和健脾法对慢性HBV感染患者免疫耐受状态外周血DCs成熟与功能的影响。方法:采集20例慢性HBV感染免疫耐受期患者和10例健康人的抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),体外培养使DCs增殖、成熟,大鼠补肾和健脾药物血浆干预。检测DCs表面HLA-DR、CD-1α、CD80及CD86的表达,DCs培养上清液IL-12的水平及DCs刺激同种异体T细胞增殖能力。比较干预
语种:
中文
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中医药治疗肝硬化腹水研究概述
作者:
欧松;孙克伟
期刊:
实用中医内科杂志,2010年24(11):30-32 ISSN:1671-7813
作者机构:
[欧松] 湖南中医药大学;湖南中医药大学第一附属医院;[孙克伟] 中医药大学第一附属医院
关键词:
肝硬化腹水;中医药治疗;进展
摘要:
综述中医药治疗肝硬化腹水的研究进展,在近几年中医治疗肝硬化腹水研究文献分析和总结的基础上,综合介绍了目前对肝硬化腹水及其病因病机和治则治法的认识,以及辨证施治和其他疗法的研究进展情况,可了解中医药在治疗肝硬化腹水方面取得的新成果.
语种:
中文
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构建启动大鼠肝组织中TGF-β/Smad信号传导通路的急性肝损伤动物模型
作者:
张涛;黄顺玲;孙克伟;谭德明;孟琼;...
期刊:
中国比较医学杂志,2010年20(7):5-9,后插1-后插2 ISSN:1671-7856
作者机构:
湖南中医药大学第一附属医院感染病科,长沙,410007;湖南省卫生厅,长沙,410005;中南大学湘雅医院感染病科,长沙,410005;湖南中医药大学实验动物中心,长沙,410007
关键词:
肝总动脉夹闭;TGF-β/Smad信号传导通路;模型,动物
摘要:
目的 在传统CCl4急性肝损伤模型的基础上,构建启动大鼠肝组织中的TGF-β/Smad信号传导通路的急性肝损伤动物模塑.方法 将30只大鼠随机分为3组,每组各10只,分别为模型组,对照组和空白组,模型组大鼠予小动脉夹夹闭肝总动脉15 min手术处理,随后分别在第6天和第10天,予25%CCl4花生油溶液6 mL/kg体重腹腔注射;对照组则单用两次CCl4,空白组不做任何处理;第二次CCl4 48 h后处死所有动物.结果 模型组与对照组及空白组比较:血清指标ALT、AST、HA显著上升(P<0.01);肝组织HE染色病理观测,肝组织出现明显炎症、变性、坏死,纤维组织增生等现象;PT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β1、Smad3 mRNA表达显著增强(P<0.01);免疫组化检测Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β1、Smad3蛋白的表达增强(P<0.01).结论 成功启动急性肝损伤大鼠肝组织中的TGF-β/Smad信号传导路,该急性肝损伤动物模型兼备肝纤维化活跃,和TGF-β/Smad信号传导通路信号增强特征,在评价早期抗肝纤维化药物及方法时具有耗时少、有效和经济的特点,值得进一步研究.
语种:
中文
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基于特异性细胞免疫学机制阐述慢性重型肝炎中医黄疸论治
作者:
张涛;孙克伟;黄顺玲;王雅;陈斌;...
期刊:
中西医结合肝病杂志,2010年20(5):281-282 ISSN:1005-0264
作者机构:
湖南中医药大学第一附属医院传染科,湖南,长沙,410007;中南大学湘雅医学院
关键词:
慢性重型肝炎;阴黄证;阳黄证;细胞免疫学
摘要:
目的:依据特异性细胞免疫学机制阐述慢性重型肝炎中医黄疸论治。方法:慢性重型肝炎属中医黄疸范畴,且分为阳黄证、阴黄证,分别以"清热利湿"法、"温阳健脾"法论治。特异性细胞免疫学发病机制为免疫系统介导的肝损伤,依据免疫"增强"与"抑制"的不同状态,对阳黄证及阴黄证进行研究。结果:阳黄证患者存在细胞功能免疫亢进和炎症因子过度释放;阴黄证患者存在细胞功能免疫抑制和抗炎症细胞因子表达增强。结论:"清热利湿"法与抑制免疫亢进及炎症反应有关;"温阳健脾"法与纠正免疫低下及降低抗炎症细胞因子表达有关。
语种:
中文
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鳖龙软肝片抗肝纤维化临床观察
作者:
王雅;熊焰;张涛;孙克伟
期刊:
湖南中医药大学学报,2010年30(9):181-183 ISSN:1674-070X
作者机构:
国家中医药管理局中医肝胆学重点学科,湖南中医药大学第一附属医院传染科,湖南,长沙,410007;[王雅; 熊焰; 张涛; 孙克伟] 湖南中医药大学附属第一医院
关键词:
乙型肝炎;肝纤维化;鳖龙软肝片;临床观察;鳖甲;黄芪;山棱
摘要:
目的 观察鳖龙软肝片治疗慢性乙型肝炎肝纤维化患者的临床疗效.方法 观察慢性乙型肝炎肝纤维化患者46例,随机分为治疗组(鳖龙软肝片组)23例,对照组(扶正化瘀胶囊组)23例.在常规保肝治疗基础上,两组分别加服鳖龙软肝片和扶正化瘀胶囊.疗程24周.对患者治疗前后Fibrondex积分和疗效进行比较.结果 两组Fibrolbdex积分值经重复测量的方差分析,组间比较F=0.00,P>0.05;治疗前后时间效应F=29.59,P<0.01.两组疗效差异无统计学意义(P>0.05).结论 鳖龙软肝片有抗肝纤维化的功效.在判断慢性乙型肝炎肝纤维化病程及动态监测过程中,结合Fibrolndex指数模型能更好地评估鳖龙软肝片治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的疗效.
语种:
中文
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参仙乙肝灵联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎临床观察
作者:
欧松;孙克伟
期刊:
湖南中医药大学学报,2010年30(9):193-195 ISSN:1674-070X
作者机构:
湖南中医药大学;[孙克伟] 湖南中医药大学第一附属医院;[欧松] 湖南中医药大学(湖南省中医药研究院)
关键词:
慢性乙型肝炎;参仙乙肝灵;阿德福韦酯;临床观察;黄芪;党参;仙灵脾
摘要:
目的 观察参仙乙肝灵联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎的临床疗效.方法 将64例慢性乙型肝炎患者随机分成两组,治疗组32例,给予中药参仙乙肝灵片剂口服,同时口服阿德福韦酯胶囊;对照组32例,给予阿德福韦酯胶囊口服;观察比较两组用药后临床疗效.结果 治疗组在HBV-DNA阴转率、HBeAg阴转方面优于对照组(P<0.05);治疗6个月时,治疗组总有效率为90.6%;对照组总有效率为71.9%;两组近期综合疗效总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 参仙乙肝灵联合阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎优于单用阿德福韦酯,在一定程度上能提高治疗慢性乙型肝炎的疗效.
语种:
中文
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全身多发性结核1例
作者:
伍玉南;孙克伟;黄裕红;陈斌
期刊:
湖南中医药大学学报,2010年30(9):210-211 ISSN:1674-070X
作者机构:
湖南中医药大学第一附属医院传染科,湖南,长沙,410007;[伍玉南; 孙克伟; 黄裕红; 陈斌] 湖南中医药大学附属第一医院
关键词:
结核;诊断性治疗;病例报告
摘要:
<正>1病例资料患者,男,22岁,电脑城职员,因腹痛2月余,加重2 d,于2009年12月12日入院。患者自2009年10月上旬出现腹部间歇性隐痛,伴乏力,头晕,消瘦,无咳嗽、咯痰,体温未测,无便秘、腹泻、关节疼痛等不适。入院前2 d腹痛加重、难以忍受,以脐周疼痛为甚,呈持续性发作。
语种:
中文
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2923例慢性乙型重型肝炎预后影响因素的临床分析
作者:
李丰衣;王宪波;史恒军;曹武奎;周小舟;...
作者机构:
[李丰衣; 李筠; 杨宏志; 过建春; 李芹; 李秀惠; 杨大国; 张琴; 田德英; 王宪波; 史恒军; 曹武奎; 周小舟; 孙克伟; 张明香; 扈小宇; 李瀚民; 毛德文; 卓蕴慧; 王立福; 张晓峰] 中国人民解放军第三○二医院中西医结合肝病科;[李丰衣; 李筠; 杨宏志; 过建春; 李芹; 李秀惠; 杨大国; 张琴; 田德英; 王宪波; 史恒军; 曹武奎; 周小舟; 孙克伟; 张明香; 扈小宇; 李瀚民; 毛德文; 卓蕴慧; 王立福; 张晓峰] 中山大学附属第三医院;[李丰衣; 李筠; 杨宏志; 过建春; 李芹; 李秀惠; 杨大国; 张琴; 田德英; 王宪波; 史恒军; 曹武奎; 周小舟; 孙克伟; 张明香; 扈小宇; 李瀚民; 毛德文; 卓蕴慧; 王立福; 张晓峰] 杭州市第六人民医院;[李丰衣; 李筠; 杨宏志; 过建春; 李芹; 李秀惠; 杨大国; 张琴; 田德英; 王宪波; 史恒军; 曹武奎; 周小舟; 孙克伟; 张明香; 扈小宇; 李瀚民; 毛德文; 卓蕴慧; 王立福; 张晓峰] 福州市传染病医院;[李丰衣; 李筠; 杨宏志; 过建春; 李芹; 李秀惠; 杨大国; 张琴; 田德英; 王宪波; 史恒军; 曹武奎; 周小舟; 孙克伟; 张明香; 扈小宇; 李瀚民; 毛德文; 卓蕴慧; 王立福; 张晓峰] 首都医科大学附属北京佑安医院
会议名称:
中华中医药学会全国第十四次肝胆病学术会议
会议时间:
2010-04-01
会议地点:
上海
会议论文集名称:
中华中医药学会全国第十四次肝胆病学术会议论文集
关键词:
慢性乙型重型肝炎;预后;影响因素;临床分析
摘要:
目的探讨慢性乙型重型肝炎预后的影响因素。方法对全国18家医院2007-2008年度住院的31 25例慢性乙型重型肝炎临床资料进行回顾性随访,分别从年龄、性别、肝衰竭分期、并发症(肝性脑病、上消化道出血、电解质紊乱、腹水、酸碱平衡失调、肝肾综合征、脑水肿、胸水、原发性腹膜炎、肝肺综合征)以及治疗措施等方面进行了对比研究。结果2923例中死亡1644例,病死率56.24%,研究结果表明:性别、年龄及临床分期与慢性乙型重型肝炎病死率显著相关(P<0.01);并发症(肝性脑病、上消化道出血、电解质紊乱、腹水、酸碱平衡失调、肝肾综合征、脑水肿、胸水、原发性腹膜炎)是影响重型肝炎预后的重要因素,并发症越多,病死率越高;治疗措施(中西医结合治疗、单纯西医治疗、抗病毒治疗)与慢性乙型重型肝炎病死率显著相关(P<0.01),中西医结合治疗病死率(51.91%)与单纯西医治疗病死率(64.72%)有显著性差异(P<0.01)。结论性别、年龄、临床分期、并发症、治疗措施均能影响重型肝炎的转归。
语种:
中文
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补肾法与健脾法对乙肝病毒感染免疫耐受期患者外周血树突状细胞功能的影响
作者:
彭建平;陈晨;何芳;孙克伟;伍玉南
期刊:
中西医结合肝病杂志,2010年20(4):221-224 ISSN:1005-0264
作者机构:
湖南中医药大学第一附属医院传染科,湖南,长沙,410007
关键词:
补肾法;健脾法;肝炎病毒;乙型;免疫耐受;树突状细胞
摘要:
目的:比较补肾法和健脾法对慢性乙肝病毒(HBV)感染患者免疫耐受状态外周血树突状细胞(DCs)的影响.方法:收集20例慢性HBV感染免疫耐受期患者和10例健康人的抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),体外培养使DCs增殖、成熟,采用大鼠补肾和健脾药物血浆进行干预.检测DCs表面HLA-DR、CD-1α、CD80及CD86的表达,观察DCs培养上清液IL-12的水平及DCs刺激同种异体T细胞增殖能力.结果:健脾药物血浆及补肾药物血浆干预后CD80表达率升高,且补肾组的CD80表达率的提高优于健脾组(P<0.05),而HLA-DR、CD-1α、CD86的表达水平在干预前后无显著性差异(P>0.05).两组含药血浆干预后DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力提高,但两组药物血浆之间差异无显著性意义(P>0.05).两组含药血浆干预前后DCs分泌IL-12水平无明显变化(P>0.05).结论:补肾法和健脾法都能促进慢性HBV感染免疫耐受期患者DCs功能的恢复,补肾法对慢性HBV感染免疫耐受期患者DCs功能的影响更为显著.
语种:
中文
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探讨肝炎肝硬化患者杵状指与血瘀证候的关系
作者:
贺希;周意;孙克伟(指导)
期刊:
中医药导报,2010年16(6):31-33 ISSN:1672-951X
作者机构:
湖南中医药大学第一附属医院,湖南,长沙,410007
关键词:
肝炎肝硬化;杵状指;中医血瘀证候积分
摘要:
目的:研究肝炎肝硬化患者杵状指与中医血瘀证候的相关性。方法:观察104例肝炎肝硬化患者的杵状指分度以及中医血瘀证候积分,运用等级相关性分析,探讨肝炎肝硬化患者杵状指与血瘀证候的关系。结果:(1)存在杵状指的肝炎肝硬化患者血瘀证候积分明显高于无杵状指患者(P〈0.03)。(2)出现重度杵状指的肝炎肝硬化患者血瘀证候积分明显高于轻度杵状指患者(P〈0.019)。(3)肝炎肝硬化患者杵状指的严重程度与血瘀证候积分呈正相关。结论:杵状指可成为肝炎肝硬化患者血瘀证的辨证要点。
语种:
中文
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慢性乙型重型肝炎中医证候与临床分期相关性研究
作者:
周意;贺希;孙克伟
期刊:
中医药导报,2010年16(5):39-40 ISSN:1672-951X
作者机构:
湖南中医药大学第一附属医院,湖南,长沙,410007
关键词:
慢性乙型重型肝炎;中医证候;多元相关
摘要:
目的:观察慢重肝患者中医证候与病情分期的相关性.方法:以黄疸为病名,湿热脾虚血瘀为基本证型,以湿热证、脾虚证、血瘀证各自中医证候及症状量化表为标准,观察31例患者湿热证候积分、脾虚证候积分、血瘀证候积分及三者总证候积分的差异与慢重肝病情分期的相关性.结果:经多元相关分析,慢重肝中医湿热证候积分与疾病分期之间负相关有统计学意义(P<0.05);血瘀证候积分与疾病分期之间正相关有统计学意义(P<0.05).结论:慢重肝早期患者以湿热证候为主,中晚期患者以血瘀、脾虚证候为重.
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中文
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以急性重度肝损伤、腹绞痛为主要表现的铅中毒1例分析
作者:
张涛;黄裕红;孙克伟
期刊:
中国误诊学杂志,2010年10(30):7382-7382 ISSN:1009-6647
作者机构:
湖南中医药大学第一附属医院感染科,湖南,长沙,410007
关键词:
铅中毒/并发症;腹痛/并发症;绞痛/并发症;肝/损伤;肝疾病/并发症
摘要:
铅中毒造成肝损害的临床报道并不少见,但以急性重度肝损伤、腹绞痛为主要表现的铅中毒病例鲜见,现将笔者所遇1例报道如下。
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慢性乙型重型肝炎不同黄疸证的临床特点研究
作者:
孙克伟;陈斌;黄裕红;伍玉南;周小青
期刊:
中西医结合肝病杂志,2010年20(1):8-11 ISSN:1005-0264
作者机构:
[孙克伟; 陈斌; 黄裕红; 伍玉南; 周小青] 湖南中医药大学第一附属医院传染病科;湖南省中医药管理局重型肝炎证治研究室
会议名称:
第十八次全国中西医结合肝病学术会议
会议时间:
2009-08-20
会议地点:
中国广东深圳
关键词:
重型肝炎;乙型;慢性;黄疸;中医证型;回顾性队列研究
摘要:
目的:研究慢性乙型重型肝炎患者阳黄、阴黄的分布规律、临床鉴别要点和阴黄证转化规律。方法:采用队列研究方法,分析151例慢性乙型重型肝炎患者阳黄和阴黄证的分布情况、阳黄和阴黄证主要证型、主要鉴别依据及黄疸持续时间、体质学特点和服用苦寒药等因素对阴黄转化的影响。结果:(1)阳黄患者占56.9%(86/152),阴黄患者占11.3%(17/152),界于阴黄和阳黄之间者占31.8%(48/152)。(2
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基于特异性细胞免疫学机理阐述慢性重型肝炎中医黄疸论治
作者:
张涛;孙克伟;黄顺玲;陈斌;黄裕红
作者机构:
[张涛; 孙克伟; 黄顺玲; 陈斌; 黄裕红] 湖南中医药大学第一附属医院传染科;[张涛; 孙克伟; 黄顺玲; 陈斌; 黄裕红] 中南大学湘雅医学院
会议名称:
第二届国际中西医结合肝病学术会议
会议时间:
2010-11-01
会议地点:
中国上海
关键词:
慢性重型肝炎;阴、阳黄证;细胞免疫学
摘要:
慢性重型肝炎属中医黄疸范畴,分阳、阴黄证,证从阳黄到阴黄演变,分以"清热利湿"、"温阳健脾"论治。其特异性细胞免疫学发病机制为免疫系统介导的肝损伤,依据免疫"增强"与"抑制"的不同状态分为早期、中晚期两阶段。中医黄疸阳黄证存在细胞功能免疫亢进和炎症因子过度释放,阴黄证存在细胞功能免疫抑制和抗炎症细胞因子表达增强;"清热利湿"法与抑制免疫亢进及炎症反应有关;"温阳健脾"法与纠正免疫低下及降低抗炎症细
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健康人外周血树突状细胞的体外培养及其鉴定
作者:
何芳;孙克伟
作者机构:
[何芳; 孙克伟] 湖南中医药大学;[何芳; 孙克伟] 湖南中医药大学第一附属医院
会议名称:
第十八次全国中西医结合肝病学术会议
会议时间:
2009-08-20
会议地点:
中国广东深圳
会议论文集名称:
第十八次全国中西医结合肝病学术会议论文汇编
关键词:
外周血;树突状细胞;体外培养;鉴定
摘要:
目的:建立树突状细胞(dendritic cells,DCs)体外培养的方法。方法:取健康人新鲜外周血,经密度梯度离心法分离,获得单个核细胞,取贴壁细胞在含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)1000U/ml、重组人白细胞介素4(rhlL-4)500U/ml完全培养基中诱导培养DCs,用倒置显微镜观察其体外培养过程中的形态特征,透射电镜分析DCs细胞内部结构,流式细胞仪检测其表型分
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联合应用TGF-β、TGF-βR siRNA对小鼠急性肝损伤TGF-β/Smad信号传导通路相关基因表达的抑制
作者:
黄顺玲;谭德明;张涛;彭忠田;孙克伟;...
期刊:
世界华人消化杂志,2009年17(24):2444-2450 ISSN:1009-3079
通讯作者:
Tan, D.-M.
作者机构:
中南大学湘雅医院感染病科,湖南省长沙市,410008;湖南中医药大学附一医院感染病科,湖南省长沙市,410011;南华大学第一附属医院感染病科,湖南省衡阳市,421001;瑞安市人民医院,浙江省瑞安市,325200;深圳市龙岗区中心医院,广东省深圳市,518116
通讯机构:
Department of Infectious Diseases, Xiangya Hospital, Central South University, China
关键词:
小干扰RNA;肝纤维化;转化生长因子-β1;转化生长因子-βⅠ;转化生长因子-βⅡ
摘要:
目的: 探讨TGF-β1、TGF-β1R siRNA联合应用对小鼠急性肝损伤TGF-β/Smad信号传导通路的干预作用.方法: 清洁级健康大鼠36只分为2组: 正常对照组(n=6, 注射生理盐水)与实验组(n =30).实验组动物在实验第1天和第5天腹腔注射CCl4花生油溶液6 mL/kg, 造成急性肝损伤并启动TGF-β/Sma d信号传导通路.实验分为TGF-β1 shRNA干预组(T);TGF-β1siRNA+TβRⅠshRNA干预组(T+R1);TGF-β1shRNA+TβRⅡ siRNA干预组(T+R2);TGF-β1siRNA+TβRⅠshRNA+TβRⅡ shRNA干预组(T+R1+R2)和模型对照组(M).观察各实验组血清ALT、AST、HA;肝组织学RT-PCR和免疫组织化学检测肝组织中α-SMA、COL-1、COL-3、TGF-β1、Smad3、PCNA和TGF-αmRNA及蛋白的表达.结果: 经shRNA质粒DNA干预的4个治疗组与模型组比较, 均能显著降低血清ALT, AST及HA的水平(ALT: 592.80±98.4 IU/L, 440.80±91.9 IU/L, 461.61±120.0 IU/L, 284.00±49.0IU/L vs 949.5±196.1 IU/L;AST: 686.80±112.3IU/L, 591.00±99.87 IU/L, 607.50±84.8 IU/L,398.30±61.9 IU/L vs 985.67±274.8 IU/L;HA:5682.80±824.14 μg/L, 2871.26±394.68 μg/L,3004.29±354.25 μg/L, 1982.12±402.71 μg/Lvs 8444.65±812.15 μg/L, P<0.05)的测定值;4个治疗组两两比较, T+R1+R2组疗效明显高于其他3组(P<0.01).与模型组比较.shRNA质粒DNA干预能明显抑制TGF-β1, Smad3, α-SMA,COL-1及COL-3的mRNA与蛋白的表达(均P<0.05).其抑制效果以T+R1+R2组最明显.对蛋白水平表达的作用也有相似趋势.结论: 针对TGF-βRⅠ及其Ⅰ型受体(TβRⅠ)、Ⅱ型受体(TβRⅡ)的siRNA联合治疗对小鼠肝损伤中TGF-β/Smad信号传导通路相关的基因表达的抑制具有协同作用.
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