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突变敏感性分子开关快速筛查肥厚性心肌病MYH7基因Ala26Val突变

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成果类型:
期刊论文
作者:
郭紫芬;兰芬;周翠兰;李凯;廖端芳
作者机构:
[郭紫芬; 兰芬; 周翠兰; 李凯; 廖端芳] 南华大学药物药理研究所
语种:
中文
关键词:
单碱基多态性;三末端标记引物;高保真DNA聚合酶;错配纠正
期刊:
中国动脉硬化杂志
ISSN:
1007-3949
年:
2011
卷:
19
期:
3
页码:
196-196
基金类别:
国家高技术研究发展863计划(2008AA02Z436);
机构署名:
本校为其他机构
院系归属:
药学院
摘要:
目的利用高保真聚合酶介导的突变敏感性分子开关联合琼脂糖凝胶电泳,建立对肥厚性心肌病MYH7基因Ala26Val突变进行快速筛查的技术平台。方法应用PCR反应扩增包含MYH7基因Ala26Val突变区域的基因序列,通过基因克隆技术与反向PCR体外定点突变技术,分别得到MYH7基因Ala26Val突变的野生模板与突变模板,并通过基因测序分析进行确证。设计与Ala26Val突变位点配对及三末端不配对的3’硫化修饰正向引物,在其下游设计一条反向引物,分别构成野生引物对与突变引物对,进行高保真DNA聚合酶介导的双向引物延伸反应,利用凝胶成像系统对其PCR结果进行分析。结果 当突变引物对与突变模板配对时,引物被延...

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