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过表达TRAF2降解外源性绿色荧光蛋白

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成果类型:
期刊论文
作者:
张波;周芳亮;卢芳国;严杰;王成;...
作者机构:
[张波; 王成; 周建林; 张健] 湖南师范大学生命科学院
[周芳亮; 卢芳国; 严杰] 湖南中医药大学
语种:
中文
关键词:
肿瘤坏死因子受体相关因子2;绿色荧光蛋白;降解
关键词(英文):
green fluorescence protein;degradation
期刊:
中国生物化学与分子生物学报
ISSN:
1007-7626
年:
2012
卷:
28
期:
8
页码:
722-727
基金类别:
国家自然科学基金(No.31071150)资助项目~~;
机构署名:
本校为其他机构
摘要:
TRAF2是机体免疫与炎症反应中具有重要作用的蛋白,有E3连接酶活性;GFP是一种受到激发光照射后可产生绿色荧光的蛋白,常用于蛋白质的细胞共定位研究,并显示与GFP融合表达靶蛋白在细胞中的位置.我们实验发现共转染表达质粒pCMV-myc-TRAF2与pEGFP-C3,可引起转染细胞绿色荧光减弱.Western印迹实验证明TRAF2可以降解GFP,并且这种降解是通过蛋白酶体途径进行的.为进一步确定这种降解的特异性,在HEK293细胞中共转pCMV-myc-TRAF2与pEGFP-C3-LNX后,发现随着TRAF2表达量增加,融合蛋白GFP-LNX减少;而共转质粒pCMV-myc-TRAF2与pCMV-myc-LNX后,未发现LNX蛋白表达减少,表明TRAF2对GFP的降解具有相对特异性.GFP...
摘要(英文):
TRAF2 with E3 ligase activity is an important protein in immunity and inflammation.GFP was often expressed in fusion protein for co-localizing the distribution of target proteins.We found reduced green fluorescence in pCMV-myc-TRAF2 co-transfected cells.The increased degradation of GFP by TRAF2 was detected by Western blotting,and further experiment showed that the degradation was through the proteasome pathway.By co-transfecting with pCMV-myc-TRAF2 plus pEGFP-C3-LNX,we showed a TRAF2-related reduction of GFP-LNX expression,but not LNX.These results suggested that the degradation of GFP promot...

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