目的:研究补阳还五汤及其有效部位(生物碱、苷)对凝血酶刺激的VEC表达血管活性物质和粘附分子的影响,探讨分子表达的信号转导途径,从内皮细胞环节揭示该方抗血栓形成的物质基础及作用机制。
方法:体外培养ECV-304细胞,加入凝血酶(Thr)刺激,分组给予不同浓度补阳还五汤原方、生物碱、苷;MTT法测定OD值,观察细胞活力:比色法测定曲H活性,观察细胞损伤程度;重氮化反应法测定NO含量,分光光度法检测TNOS、iNOS(NOS)、eNOS(NOS)的活性;放免法测定ET-1、RT-P6R法检测ECE mRNA;放免法测定6-酮-PGF,RT-PCR法检测PGI合成酶mRNA;免疫细胞化学法检测细胞粘附分子PECAM-1(CD31)、ICAM-1(CD5...