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蛇莓RAPD与ISSR-PCR反应体系优化

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成果类型:
期刊论文
作者:
张聪子;童巧珍;郭婷;高昱;蔡嘉洛
作者机构:
[蔡嘉洛; 郭婷; 童巧珍; 张聪子; 高昱] 湖南中医药大学
语种:
中文
关键词:
蛇莓;单因素;正交设计;体系优化
关键词(英文):
RAPD-PCR;ISSR-PCR
期刊:
江苏农业科学
ISSN:
1002-1302
年:
2014
期:
7
页码:
50-53
基金类别:
湖南省教育厅项目(编号:10C1029);
机构署名:
本校为第一机构
摘要:
采用单因素试验结合正交试验,对PCR反应体系中的5种主要反应因子Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA浓度进行优化筛选,确立了适合蛇莓基因组DNA的RAPD和ISSR反应体系,RAPD反应体系(20μL):Mg2+1.5 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq酶1 U、引物0.2μmol/L、DNA模板60 ng;ISSR反应体系(20μL):Mg2+2.0 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq酶0.5 U、引物1μmol/L、DNA模板60 ng。利用确立的体系对24份蛇莓种质进行扩增,结果条带清晰明亮,多态性好。

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