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SV40LT基因重组腺病毒载体的包装、鉴定及用于转染日本血吸虫童虫细胞的研究

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成果类型:
期刊论文
作者:
刘碧源(刘碧源);曾庆仁;余平;杨胜辉(杨胜辉);蔡力汀;...
作者机构:
[刘碧源; 曾庆仁; 余平; 蔡力汀; 张顺科] 中南大学湘雅医学院细胞与分子生物学实验中心
南华大学公共卫生学院卫生检验系
[杨胜辉] 湖南中医药大学病原生物学与免疫学教研室
[周军] 中南大学湘雅三医院实验中心
语种:
中文
关键词:
SV40LT基因;腺病毒载体;日本血吸虫;童虫细胞
关键词(英文):
adenoviral vector;Schistosoma japonicum;schistosomulum cells
期刊:
中国人兽共患病学报
ISSN:
1002-2694
年:
2011
卷:
27
期:
11
页码:
1016-1020
基金类别:
国家自然科学基金(30570952)资助项目;
机构署名:
本校为其他机构
院系归属:
医学院
摘要:
目的 构建携带SV40LT基因的重组腺病毒表达载体,制备具有感染力的重组腺病毒,观察其转染日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)童虫细胞后的表达情况。方法 采用体外连接法构建好的携带SV40LT基因的重组腺病毒质粒(AdHu5-SV40LT)转化Stb12感受态菌,获得重组腺病毒质粒后,经Pac I酶切线性化后转染293A细胞,获得出重组腺病毒(AdHu5-SV40LT)。将重组腺病毒感染Sj童虫细胞,采用RT-PCR和免疫组织化学检测SV40LT基因的表达情况。结果 重组腺病毒载体质粒可转染293A细胞并可在293A细胞内进行有效的复制;提取病毒DNA进行PCR检测证实含有 SV40LT目的基因。以重组腺病毒能感染Sj童虫细胞,经...
摘要(英文):
In order to pack the recombinant adenovirus vector carrying SV40LT gene and to study the effect of the recombinant adenovirus on transfecting schistosomulum cells,The constructed recombinant adenovirus plasmid was re-transformed into competent cells Stbl2,and identified by restriction enzyme digestion.The right recombinant adenovirus plasmid was transfected into 293A cells using Lipofectine 2000.The recombinant adenovirus was amplified,and then identified by polymerase chain reaction(PCR).The effect of the recombinant adenovirus transfecting ...

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