期刊论文

Establishment and evaluation of an AAPH-induced oxidative stress model in mouse Leydig cells in vitro

中文

中华男科学杂志

1009-3591

2021

27

01

3-10

10.13263/j.cnki.nja.2021.01.001

国家自然科学基金（81673984,82074444）； 湖南省教育厅重点项目（20A368）； 长沙市科技计划项目经费资助-长沙市杰出创新青年人才项目（kq1802015）； 湖南省***卫生人才225工程医学学科骨干人才培养对象（湘卫函[2019]196号）； 湖南创新型省份建设专项经费资助-“湖湘青年英才”支持计划（2019RS2041）； 中华中医药学会“青年人才托举工程”（2019-QNRC2-C07）~~；

本校为第一机构

目的:利用偶氮二异丁脒盐酸盐（AAPH）作为刺激源,建立体外小鼠睾丸间质细胞（LCs）氧化应激损伤模型,并进行生理功能评价。方法:实验一将小鼠睾丸间质细胞（TM3）随机分为6组,分别加入0、1、5、10、50和100mmol/L AAPH,分别作用4、8、24 h。测定TM3细胞活性（MTS法）、衰老情况（β-半乳糖苷染色法）、线粒体膜电位（JC-1荧光法）、线粒体DNA拷贝数（QPCR法）。实验二在实验一筛选得出AAPH作用浓度区间（≤10 mmol/L）基础上,将TM3细胞随机分为9组,分别加入0、0.1、0.5、1、2、4、6、8和10 mmol/L AAPH,分别作用24、48、72 h。测定TM3细胞活性、ROS水平、衰老情况。筛选出AAPH诱导TM3细胞氧化应...

Objective:To establish a model of oxidative stress(OS)injury in mouse Leydig cells using α-α'-azodiisobutyramidine hydrochloride(AAPH)and evaluate the physiological function. Methods:In Experiment 1,we treated mouse TM3 Leydig cells with AAPH at 0,1,5,10,50 and 100 mmol/L for 4,8 and 24 h respectively and measured the activity of the cells using MTS,their aging by β-galactoside staining,mitochondrial membrane potential by JC-1 fluorescence and mitochondrial DNA copy number by qPCR.In Experiment 2,we treated the TM3 cells selected in Experime...