期刊论文

Cloning and Expression Patterns of LmC3H1 Gene in Lonicera macranthoides and Its Correlation with Chlorogenic Acid Content

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中国实验方剂学杂志

1005-9903

2020

26

9

167-175

10.13422/j.cnki.syfjx.20200913

国家自然科学基金面上项目(81673546) 国家自然科学基金青年科学基金项目(81203007) 湖南省自然科学基金项目(2017JJ3237) 湖南省科技厅重点研发项目(2017SK2124) 湖南省教育厅科学研究项目(16B193) 湖南省高等学校2011协同创新中心项目(湘教通[2015]351) 湖南中医药大学“十三五”科技发展与一流学科建设项目(校行科字[2018]3号) 湖南中医药大学大学生研究性学习和创新性实验计划立项项目(校行教字[2017]7号-19)。

本校为第一机构

目的:以灰毡毛忍冬为材料,克隆对-香豆酸3-羟化酶(LmC3H1)基因,进行生物信息学和表达模式分析,结合绿原酸含量,研究推测灰毡毛忍冬LmC3H1基因的功能。方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和RACE技术克隆LmC3H1基因的全长cDNA序列,对该序列进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和HPLC分别测定灰毡毛忍冬茎、叶及不同花期花中LmC3H1的相对表达量及绿原酸含量。结果:克隆得LmC3H1(GenBank:MN177695)基因,开放阅读框(ORF)长度为1 533 bp,编码510个氨基酸,推测其分子式为C_(2618)H_(4134)N_(718)O_(727)S_(22),相对分子质量为58 005.32,等电点8.92,为亲水性蛋白,定位于叶绿体...

Objective:To clone p-coumaroyl quinate/shikimate 3' -hydroxylase gene from Lonicera macranthoides,and analyze its bioinformatics and expression patterns with chlorogenic acid content,in order to speculate the functions of LmC3H1 gene from L.macranthoides.Method:The full-length cDNA sequence of LmC3H1 gene was cloned by reverse trascription polymerase chain reaction(RT-PCR) and RACE techniques.The bioinformatics analysis of the gene sequence was carried out by using relevant software.Real-time fluorescence quantification PCR(Real-time PCR) and HPLC were used to determine relative expression of ...