益气解毒方通过MAPK/ERK信号通路抑制鼻咽癌细胞增殖
作者:
胡晶;戴娜;徐冰雁;周芳亮
(周芳亮);蔺婷
(蔺婷);...
期刊:
中国中药杂志,2018年43(6):1221-1227 ISSN:1001-5302
通讯作者:
He, Y.-C.
作者机构:
湖南中医药大学研究生院,湖南长沙410208;湖南中医药大学医学院,湖南长沙410208;湖南中医药大学研究生院,湖南长沙,410208;中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室,湖南长沙410208;中医五官湖南省重点学科,湖南长沙410208
通讯机构:
College of Medicine, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, China
关键词:
益气解毒方;鼻咽癌;细胞增殖;MAPK/ERK信号通路
摘要:
该文研究益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制,为益气解毒方的临床应用提供新的理论依据。用不同质量浓度(0.125,0.25,0.5,1.0 g·L~(-1))的益气解毒方水提物、阳性对照药(顺铂,4.0 mg·L~(-1))、抑制剂PD98059(50 μmol·L~(-1))、激活剂isoproterenol hydrochloride(ISO,20 μmol·L~(-1))、激活剂ISO+益气解毒方水提物0.5 g·L~(-1)处理CNE2细胞,使用实时无标记细胞功能分析仪(RTCA)和CCK-8法检测细胞增殖活性,并计算出半数抑制浓度(IC_(50)),用荧光双染流式细胞仪PI染色检测药物作用后细胞周期分布情况;Western blot法检测周期相关蛋白和MAPK/ERK信号通路相关蛋白的表达水平。RTCA和CCK-8法检测结果显示,与正常培养组比较,益气解毒方水提物能够有效抑制CNE2细胞增殖(P<0.01),呈剂量和时间依赖性,48 h IC_(50)为0.5 g·L~(-1);细胞周期结果显示,水提物处理48 h后,G_0/G_1期比例降低,G_2/M期比例增加,阻滞细胞周期于G_2/M期(P<0.01);Western blot实验结果显示,经过不同浓度水提物处理48 h后,细胞周期相关蛋白cyclinD1,cyclinD3,CDK2表达下调,MAPK/ERK信号通路相关蛋白p-c-Raf,p-MEK,p-ERK1/2表达明显下调,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);在此基础上,加入MAPK/ERK信号通路的激活剂和抑制剂,结果显示,加入激活剂ISO,细胞增殖明显高于正常培养组,周期相关蛋白cyclinD1,cyclinD3,CDK2表达量均提高,同时,该信号通路关键蛋白p-c-Raf,p-MEK,p-ERK1/2的表达量也相对上升;而加入抑制剂PD98059后,细胞增殖明显低于正常培养组,相应蛋白的表达量亦降低,与对照组相比差异明显(P<0.05)。益气解毒方水提物主要通过下调MAPK/ERK信号通路关键蛋白p-c-Raf,p-MEK,p-ERK1/2的表达,阻滞细胞周期,抑制CNE2细胞增殖。
语种:
中文
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肿瘤干细胞的靶向策略研究
作者:
罗晶婧
(罗晶婧);廖雪;廖端芳;何丹;何迎春
(何迎春)
期刊:
肿瘤基础与临床,2015年(3):265-272 ISSN:1673-5412
作者机构:
湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208;湖南中医药大学中西结合学院,湖南 长沙,410208;湖南中医药大学医学院,湖南 长沙,410208
关键词:
肿瘤微环境;多药耐药性;肿瘤干细胞;白血病;靶向治疗;诱导凋亡
摘要:
当前针对恶性肿瘤的治疗策略具有一定的局限性,治疗无效的情况经常出现。多数恶性肿瘤治疗失败的原因是对化疗和放疗的抵抗以及肿瘤复发或转移。这些问题的出现与肿瘤干细胞( cancer stem cell, CSC)密切相关,而很多治疗方法对大部分时间处于静止状态的CSC无效,并且也不是有选择性地针对肿瘤细胞,对健康组织也产生一定的伤害,故肿瘤患者通常会面临复发和转移的风险。因此,如何消除CSC成为治疗恶性肿瘤的关键。
语种:
中文
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益气解毒方水提物对RAW264.7细胞免疫功能的影响
作者:
廖雪;蔺婷
(蔺婷);罗晶婧
(罗晶婧);田道法;廖端芳;...
期刊:
肿瘤基础与临床,2015年(6):473-476 ISSN:1673-5412
作者机构:
湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208;湖南中医药大学中西结合学院,湖南 长沙,410208;湖南中医药大学医学院,湖南 长沙,410208;[罗晶婧; 何迎春; 蔺婷; 廖雪; 林丽美; 曾嵘; 廖端芳; 田道法] 湖南中医药大学
关键词:
益气解毒方;RAW264.7细胞;免疫功能;鼻咽癌
摘要:
目的:研究益气解毒方水提物对小鼠巨噬细胞系 RAW264.7细胞免疫功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度益气解毒方水提物处理 RAW264.7细胞,MTT 法检测细胞增殖活性,ELISA法检测细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)、一氧化氮(NO)的分泌水平,Western blot 法检测细胞核转录因子 NF-κBp65蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,益气解毒方水提物在10~320 mg·L -1范围内明显促进 RAW264.7细胞增殖,且10 mg·L -1浓度效果最佳(P ﹤0.05);与空白对照组比较,益气解毒方水提物能促进 TNF-α、IL-12及 NO 的分泌(P ﹤0.05),显著诱导细胞内 NF-κBp65蛋白的表达(P ﹤0.05)。结论益气解毒方水提物对 RAW264.7细胞的免疫功能具有调节作用,其作用可能与激活NF-κBp65蛋白通路相关。
语种:
中文
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