作者： 宋厚盼;曾梅艳;彭俊;陈小娟;陈新怡;...

期刊： 中草药,2019年50(8):1863-1872 ISSN：0253-2670

通讯作者： Peng, Q.-H.

作者机构： 湖南中医药大学中医诊断研究所,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙,410208;湖南中医药大学第一附属医院眼科,湖南长沙410007

通讯机构： [Peng, Q.-H.] I;Institute of Traditional Chinese Medicine Diagnostics, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, China

关键词： 视网膜色素变性;Müller细胞;丹参;网络药理学;生物信息学;分子机制

摘要： 目的基于网络药理学和生物信息学方法探讨丹参(SM)通过干预Muller 细胞(MC)特征性基因和关键蛋白表达治疗视网膜色素变性(RP)的分子机制。方法运用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)检索、筛选SM 的入血活性成分和作用靶点;通过GEO 数据库获取正常和RP 小鼠MC 差异表达基因;通过疾病数据库检索RP 相关的基因靶点;采用Cytoscape 构建MC 差异表达基因和疾病靶点、成分靶点的蛋白质-蛋白质交互作用网络并提取交集;运用DAVID数据库对特征性基因进行基因本体和KEGG 通路分析;采用cytoHubba 分析筛选关键蛋白靶点。结果检索得到与 SM 相关的化学成分202个,依据ADME 参数筛得活性成分65个,其中入血活性成分13个,进一步检索配对得到这些成分可能作用的靶点117个;从芯片数据中分析得到正常和RP 小鼠MC 中差异表达基因242个;从疾病数据库获得与RP 密切相关的靶点206个;提取交集得到85个SM 影响RP 病理过程MC 的特征性基因;这些基因主要涉及转录调控、凋亡信号通路调控、DNA 核内复制调节等生物学过程,分子功能主要包括转录辅激活子活性、蛋白激酶活性、核心启动子结合等,富集于细胞核、核质、转录因子复合物、Rb-E2F 复合体等区域,主要与剪接体信号通路、肌动蛋白细胞骨架调控信号途径、细胞周期调控通路等有关;分析筛选出SM 干预RP 病理过程MC 中的8个关键蛋白靶点。结论 SM药效作用的物质基础为隐丹参酮、木犀草素、丹参酮IIA 等13个化学成分;其所干预的RP 病理过程MC 特征性基因与剪接体信号通路、肌动蛋白细胞骨架调控信号途径、细胞周期调控通路等机制相关,关键靶点包括RB1、E2F1、TFDP1等8个蛋白。

语种： 中文

作者： 张婷;林也;李鑫;戴宗顺;陈小娟;...

作者机构： [张婷; 林也; 李鑫; 戴宗顺; 陈小娟; 唐琳; 陆晓珊; 宋厚盼; 蔡雄; 王莘智] 湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室;[张婷; 林也; 李鑫; 戴宗顺; 陈小娟; 唐琳; 陆晓珊; 宋厚盼; 蔡雄; 王莘智] 湖南中医药大学科技创新中心;[张婷; 林也; 李鑫; 戴宗顺; 陈小娟; 唐琳; 陆晓珊; 宋厚盼; 蔡雄; 王莘智] 广东药科大学中药学院;[张婷; 林也; 李鑫; 戴宗顺; 陈小娟; 唐琳; 陆晓珊; 宋厚盼; 蔡雄; 王莘智] 湖南中医药大学附属第一医院

会议名称： 中国中西医结合学会诊断专业委员会第十三次全国学术研讨会

会议时间： 2019-08-17

会议地点： 中国宁夏银川

关键词： 类风湿关节炎;痹证;"风寒湿"外邪;JAK/STAT信号通路

摘要： 目的探讨"风寒湿"外邪影响类风湿关节炎（痹证）病证发生的分子机制,促进中医论治类风湿关节炎的理论提升和临床指导应用。方法 （1）雄性SD系大鼠90只,随机分为正常对照组、单纯AIA组和AIA风寒湿痹组,每组30只。正常对照组和单纯AIA组大鼠正常饲养;AIA风寒湿痹组大鼠每天置于智能人工气候箱内接受风寒湿刺激1次,每次4 h,14天后于尾根部皮下注射0.1ml含200mg Mtb的CFA,CFA免疫后再接受风寒湿刺激6天。CFA免疫前1天、免疫后第6天以及第10天取血,分离外周血单核细胞（PBMCs）,流式细胞术检测CD4+Th17和CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞,分析确定Th17/Treg细胞比例失衡。（2）雄性SD系大鼠,随机分为正常组和AIA风寒湿痹组。大鼠接受风寒湿刺激或正常饲养14天,麻醉后无菌取出脾脏,分离富集CD4+T细胞,采用流式荧光激活细胞分选法（FACS）分选异常分化的CD4+Th17细胞亚群。筛选有85%MHC II相同点的雄性SD系大鼠,将CD4+Th17细胞亚群过继性转移到正常饲养大鼠后再注射CFA诱导AIA,观察AIA的发病时间和发病率,称量动物体质量、评定关节炎指数、测量后足肿胀体积,从而确认CD4+Th17细胞对AIA风湿寒痹大鼠病证发生的作用。（3）筛选有85%MHC II相同点的雄性SD系大鼠,随机分为空白组和CD4+Th17细胞亚群过继性转移组。实验第1天于大鼠尾静脉注射2×106个FACS分选的CD4+Th17细胞;实验第2天于大鼠尾根部皮下注射0.1ml含200mgMtb的CFA诱导AIA。发病后,分离PBMCs,流式细胞术检测外周血CD4+T细胞pSTAT3蛋白、CD4+IL-17+淋巴细胞p STAT4及CD4+IL-17+淋巴细胞p STAT6的蛋白平均荧光强度,荧光定量PCR检测外周血CD4+T细胞中转录因子RORγt mRNA,Foxp3 mRNA,STAT3、STAT4、STAT6 mRNA的表达。结果随着AIA风寒湿大鼠病情的进展,CD4+Th17细胞比例逐渐增加,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例逐渐降低,与同时间点单纯AIA组大鼠比较,差异具有显著性（P<0.01）。与模型组比较,注射CFA组大鼠体质量显著减轻,足肿胀体积、关节评分均显著增加（P<0.01）。与空白组比较,过继性转移组大鼠外周血CD4+T细胞中转录因子Foxp3 mRNA表达量显著降低,STAT3、STAT4、STAT6 mRNA、RORγt mRNA表达量显著增加,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论 "风寒湿"外邪通过JAK/STAT信号通路激活Th17细胞分化,并抑制Treg细胞分化导致Th17/Treg细胞失衡,从而促进RA病证发生。

语种： 中文

作者： 曾梅艳;彭彩云;宋厚盼;陈小娟;陈雪莲;...

期刊： 中医药导报,2019年25(16):116-119 ISSN：1672-951X

作者机构： 湖南中医药大学中医诊断学重点实验室,湖南长沙410208;湖南中医药大学数字中医药协同创新中心,湖南长沙410208;湖南中医药大学针灸推拿学院,湖南长沙,410208;[陈小娟; 宋厚盼; 彭彩云; 蔡雄; 曾梅艳; 谢梦洲; 喻嵘; 陈新怡; 陈雪莲] 湖南中医药大学

关键词： 脾阳虚证;动物模型;模型评价;综述

摘要： 从中医单因素造模法、西医单因素造模法、中医复合因素造模法、中西医结合复合因素造模法概述了中医学脾阳虚证候的造模方法;从宏观评价指标、形态学指标、功能性指标、细胞分子指标综述了脾阳虚证候模型成功构建的评价方法;尽管脾阳虚证动物模型的建立现已取得一定成果,但仍存在一些问题尚待解决。选择更加贴合临床实践的脾阳虚证候模型,建立更加标准、更具特异性的模型评价体系仍是中医脾胃藏象学说未来研究的方向。

语种： 中文

作者： 宋厚盼;陈小娟;曾梅艳;陈新怡;蔡雄;...

期刊： 中国药理学通报,2019年35(8):1172-1178 ISSN：1001-1978

作者机构： [彭清华] Institute of Tradition Chinese Medicine Diagnostics, Changsha, 410208, China;College of Traditional Chinese Medicine, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410208, China;[喻嵘; 宋厚盼; 蔡雄; Zeng M.-Y.; 陈小娟; 谢明霞; 陈新怡] Institute of Tradition Chinese Medicine Diagnostics, Changsha, 410208, China, College of Traditional Chinese Medicine, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410208, China

关键词： 黄芪建中汤;十二指肠溃疡;细胞因子;Toll样受体;髓样分化因子;免疫屏障

摘要： 目的 研究黄芪建中汤(Huangqi Jianzhong decoction,HQJZ)对大鼠十二指肠溃疡(duodenal ulcer,DU)的治疗效应及其对TLR-2介导的肠黏膜免疫屏障功能的影响.方法 将大鼠分为正常组、模型组、阳性药组和HQJZ组,采用复合病因法构建DU模型.观测大鼠整体状态;对DU损伤进行评分;HE染色观察十二指肠病理改变;ELISA法检测细胞因子含量;荧光定量PCR和免疫组化法分别检测mRNA及蛋白表达.结果 与正常组比较,模型大鼠十二指肠黏膜发生明显溃疡病变;血清IL-4、IL-10含量明显下降,TNF-α 含量明显升高;黏膜TLR-2、MyD88 mRNA及蛋白表达明显上调.给予HQJZ治疗后,大鼠体质量、进食量、肛温明显回升;溃疡指数明显降低;十二指肠黏膜形态恢复正常,绒毛高度和隐窝深度明显增加;IL-4、IL-10含量明显增加,TNF-α 含量明显下降;黏膜TLR-2、MyD88 mRNA及蛋白表达明显下调.结论 HQJZ可促进DU愈合,其机制可能与干预TLR-2介导的肠黏膜免疫屏障功能有关.

语种： 中文

作者： 李鑫;林也;陈小娟;魏艳霞;宋厚盼;...

期刊： 中华中医药杂志,2019年34(1):403-407 ISSN：1673-1727

作者机构： 湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,长沙410208;湖南中医药大学附属第一医院,长沙410007;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,长沙,410208;湖南中医药大学附属第一医院,长沙,410007;广东药科大学中药学院,广州510006

关键词： 青附蠲痹汤;类风湿关节炎;寒湿痹阻证;临床疗效;安全性;疗效机制

摘要： 目的:观察青附蠲痹汤治疗寒湿痹阻型类风湿关节炎(RA)临床疗效及安全性,探讨其疗效机制.方法:寒湿痹阻型RA患者120例,按随机数字表法分为治疗组(青附蠲痹汤联合甲氨喋呤片)60例和对照组(甲氨喋呤片)60例,连续治疗8周后,评价RA患者DAS28评分及证候疗效.于治疗前和治疗后采集RA患者静脉血,分别检测血沉(ESR)、类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1 β(IL-1β)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)含量.记录治疗过程中出现的所有不良反应.结果:经8周治疗,治疗组和对照组总有效率分别为96.67％和83.33％,治疗组显著优于对照组(P＜0.05).治疗后,治疗组较对照组同期显著改善关节疼痛、关节肿胀、屈伸不利、晨僵及肢体冷痛等症状评分(P＜0.01).治疗组DAS28评分、ESR、RF及CRP均较对照组同期显著降低(P＜0.01).治疗组TNF-α、IL-1 β及MMP-3较对照组同期降低,TIMP-1较对照组同期上调(P＜0.01,P＜0.05).两组不良反应率差异无统计学意义.结论:青附蠲痹汤治疗寒湿痹阻型RA疗效显著,显著改善临床症状,降低CRP、ESR、CRP水平,其疗效机制可能与抑制促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β表达,降低MMP-3水平、上调TIMP-1表达有关.

语种： 中文

作者： 宋厚盼;曾梅艳;彭俊;陈小娟;陈新怡;...

期刊： 中国实验方剂学杂志,2019年25(14):199-206 ISSN：1005-9903

作者机构： 湖南中医药大学中医诊断研究所,长沙 410208;湖南中医药大学中医学院,长沙 410208;湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室,长沙 410208;湖南中医药大学中医学院,长沙,410208;湖南中医药大学第一附属医院,长沙 410007

关键词： 视网膜色素变性;枸杞子;丹参;网络药理学;生物信息学;分子机制

摘要： 目的:基于网络药理学和生物信息学方法探讨枸杞子-丹参(LFSMR)药对治疗视网膜色素变性(RP)的分子机制.方法:通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)筛选和预测LFSMR药对可能的入血活性成分和作用靶点;通过疾病基因数据库挖掘视网膜色素变性相关的基因靶点;采用功能蛋白联合网络数据库(STRING)绘制成分-靶点和疾病-靶点的蛋白质-蛋白质交互作用(PPI)网络,并取这两个网络的交集;运用注释、可视化和整合发现数据库(DAVID)对交集网络进行基因本体和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;采用cytoHubba分析筛选关键靶点.结果:在TCMSP数据库共检索出与LFSMR相关的活性成分390个,根据药代动力学参数筛得活性成分110个,进一步筛选获得19个入血活性成分,并检索出与这些成分相关的靶点208个;从疾病基因数据库获得与RP直接相关的基因206个;成分靶点和疾病靶点PPI网络取交集后得到79个基因;这些基因主要涉及蛋白自体磷酸化、转录调节、细胞增殖等生物学过程,分子功能主要涉及三磷酸腺苷结合、转录因子活性、核心启动子结合等,富集于核质、转录因子复合物、细胞核、细胞质等区域,主要与神经营养素信号通路,细胞周期相关通路,Wnt信号通路有关;进一步分析筛选得到LFSMR治疗RP的8个关键性基因靶点.结论: LFSMR药效作用的物质基础为多孔甾醇、丹参酮Ⅱ_A等19个入血活性成分,其治疗RP的关键靶点包括E2F转录因子1(E2F1),视网膜母细胞瘤基因1(RB1)等8个基因,主要作用机制与调控神经营养素信号通路、细胞周期相关通路等信号网络有关.

语种： 中文

作者： 曾梅艳;宋厚盼;陈小娟;陈新怡;袁振仪;...

期刊： 时珍国医国药,2019年30(10):2540-2544 ISSN：1008-0805

作者机构： 湖南中医药大学中医学院,湖南长沙,410208;湖南中医药大学中医学院,湖南长沙410208;湖南中医药大学中医诊断研究所,湖南长沙410208;[陈小娟; 宋厚盼; 曾梅艳; 袁振仪; 喻嵘; 陈新怡] 湖南中医药大学

关键词： 脾胃虚寒证;十二指肠溃疡;动物模型;模型评价

摘要： 目的基于方证对应理论构建可靠、稳定的脾胃虚寒型十二指肠溃疡(DU)病证结合大鼠实验模型,并对模型进行综合评价。方法将36只SD大鼠随机分为正常组、模型组、黄芪建中汤组(方证对应组) 。运用中医学病因苦寒泻下加劳倦过度法建立脾胃虚寒证候模型,采用无水乙醇加阿司匹林构建DU模型。观察大鼠的整体症状与体征,监测大鼠体质量、进食量、饮水量、肛温变化,肉眼评估十二指肠黏膜溃疡指数,HE染色镜下观察十二指肠黏膜病理改变,酶联免疫法检测血清NO、PGE、MDA含量,免疫组化检测TLR - 2、MyD88蛋白表达。结果①与正常组比较,模型组大鼠表现出脾胃虚寒证候,大鼠体质量、进食量、饮水量、肛温均明显降低(P < 0.05) 。给予黄芪建中汤治疗后,大鼠整体症状与体征恢复正常,与模型组比较,大鼠体质量增加(P < 0.05),进食量增多(P < 0.05),饮水量增加,肛温升高(P < 0.05) 。②与正常组比较,模型组大鼠溃疡指数明显增加(P < 0.01),HE染色显示小肠绒毛受损严重;给予黄芪建中汤治疗后,大鼠溃疡指数显著降低(P < 0.01),十二指肠黏膜形态恢复正常。③与正常组比较,模型组大鼠血清NO、PGE含量显著降低(P < 0.01),MDA含量明显增加(P < 0.01),TLR - 2及MyD88蛋白表达显著上调(P < 0.01);给予黄芪建中汤治疗后,大鼠血清NO、PGE含量明显增加(P < 0.01),MDA含量显著降低(P < 0.01),TLR - 2及MyD88蛋白表达明显下调(P < 0.01) 。结论基于方证对应理论,该研究构建了可靠、稳定的脾胃虚寒型DU病证结合大鼠实验模型,该模型可为消化性溃疡疾病的基础与临床研究奠定基础。

语种： 中文

作者： 陈小娟;曾梅艳;宋厚盼;彭彩云;陈新怡;...

期刊： 环球中医药,2019年12(07):1118-1124 ISSN：1674-1749

作者机构： 410208 长沙,湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室;湖南中医药大学中医学院;湖南中医药大学针灸推拿学院;[宋厚盼; 陈小娟; 彭彩云; 蔡雄; 曾梅艳; 喻嵘; 陈新怡] 湖南中医药大学

关键词： 消化性溃疡;不荣则痛;不通则痛;气血辨证;津液辨证;脏腑辨证;微观指标

摘要： 中医学将消化性溃疡归属于"胃痛""痞满"等病证.本文从不荣则痛、不通则痛、毒热、气火观理论等方面综述其中医病机;从气血辨证、津液辨证和脏腑辨证等方面概述其中医辨证分型研究;从溃疡分期、胃黏膜征象、胃动力、幽门螺旋杆菌检出率、胃肠黏膜细胞因子及电镜检测等现代医学指标进一步探讨本病的辨证论治研究.消化性溃疡中医病机复杂,辨证困难,临床治疗可根据具体病机和证候,结合相关客观指标确定治疗方案.

语种： 中文

作者： 曾梅艳;陈小娟;宋厚盼;陈新怡;彭彩云;...

期刊： 山西中医药大学学报,2019年20(3):223-227 ISSN：2096-7403

作者机构： 湖南中医药大学中医学院,湖南长沙,410208;湖南中医药大学针灸推拿学院,湖南长沙,410208;湖南中医药大学医学院,湖南长沙,410208;湖南中医药大学药学院,湖南长沙,410208;[宋厚盼; 陈小娟; 彭彩云; 刘周全; 曾梅艳; 陈雪莲; 陈新怡] 湖南中医药大学

关键词： 消化性溃疡;中医病因病机;辨证论治

摘要： 消化性溃疡是临床最常见的消化系统疾病,现代医学通过抑制胃酸、根除幽门螺旋杆菌以及保护胃肠黏膜等措施来控制病情,难以治愈且极易复发。临床运用中医药治疗本病,可取得确切疗效,提高治愈率的同时降低复发率,因而越来越被人们所接受。通过对消化性溃疡的病因病机、证候分型及治疗进行论述,进一步加深中医对消化性溃疡的认识与研究,提高中医药对消化性溃疡的临床疗效。

语种： 中文

作者： 宋厚盼;曾梅艳;陈小娟;陈新怡;彭俊;...

期刊： 中国临床药理学与治疗学,2019年24(12):1402-1414 ISSN：1009-2501

作者机构： 湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,长沙410208 ,湖南;湖南中医药大学中医学院,长沙410208 ,湖南;湖南中医药大学医学院,长沙410208 ,湖南;[陈小娟; 宋厚盼; 杨焘; 蔡雄; 周亚莎; 彭俊; 曾梅艳; 彭清华; 杨毅敬; 陈新怡] 湖南中医药大学

关键词： 视网膜色素变性;生物信息学;网络药理学;虹膜色素上皮细胞;视网膜色素上皮细胞;枸杞子

摘要： 目的:基于生物信息学和网络药理学方法探究枸杞子( LF)促进虹膜色素上皮细胞定向分化治疗视网膜色素变性( RP)的分子网络调控机制。方法:在中药系统药理学数据库和分析平台( TCMSP)检索LF的主要活性成分及其可能的作用靶点;从GEO数据库下载GSE81058基因表达谱数据,采用R软件构建虹膜色素上皮细胞( IPE)和视网膜色素上皮细胞( RPE)差异表达基因火山图和聚类热图;采用STRING数据库构建LF成分-靶点和IPE-RPE差异表达基因的蛋白质-蛋白质交互网络( PPI), 运用Cytoscape提取交集网络基因;通过DAVID数据库对交集基因进行基因本体和信号通路分析;采用cytoHubba分析LF作用于IPE的关键靶点。结果:共获得LF的化学成分188个,其中主要的入血活性成分36个,这些活性成分可能作用的靶点201个; IPE与RPE主要的差异表达基因有142个,其中上、下调基因各71个;发掘得到105个与LF促进IPE分化以治疗RP的相关基因靶点; LF作用于这些靶点涉及的生物学过程包括调节细胞分化、调节视网膜层形成等,相关的分子功能主要涉及转录共激活剂活性、离子通道活性等,主要富集于细胞质、高尔基体、细胞核等区域; LF作用于IPE涉及的分子机制包括调控PI3K-Akt信号通路、神经活性配体-受体相互作用通路等; LF促进IPE分化主要作用于SPP1、MMP9等十个关键靶点。结论: IPE与RPE具有明显差异的基因表达谱,LF的有效活性成分可作用于这些差异表达基因,促进IPE细胞分化为RPE,从而治疗RP。本研究可为细胞移植与中医药联合的中西医结合疗法应用于RP的临床治疗提供科学依据。

语种： 中文

作者： 林也;李鑫;徐智慧;陈小娟;余黄合;...

期刊： 中华中医药学刊,2018年36(11):2685-2689 ISSN：1673-7717

作者机构： 湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙,410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙410208;湖南中医药大学附属第一医院,湖南长沙410007;广东药科大学中药学院,广东广州510006;湖南中医药大学附属第一医院,湖南长沙,410007

关键词： 类风湿关节炎;乌头汤;联合用药;随机对照试验;Meta分析

摘要： 目的:系统评价乌头汤联合化学药物治疗类风湿关节炎（RA）有效性及安全性。方法:全面检索中国期刊全文数据库（CNKI）,维普中文科技期刊全文数据库（VIP）、万方医药期刊数据库（WanfangData）、SinoMed、Pubmed等数据库,同时手工检索相关杂志,检索时限均为从建库至2017年12月12日。按Cochrane评价员手册5.1.0评价符合纳入标准的文献质量,采用Review Manager 5.3软件进行分析。结果:最终共纳入12篇文献,共计975例研究对象。结果显示,乌头汤联合化学药物治疗RA临床总有效率显著优于单用化学药物治疗[OR=3.64, 95%CI（2.48, 5.33）,P<0.000 01];对关节压痛数[MD=-2.61, 95%CI （-3.31,-1.91）,P<0.000 01]及晨僵[MD=-19.93, 95%CI（-36.59,-3.27）,P=0.02]改善效果优于单独使用化学药物;并能够显著降低RA患者血沉[MD=-10.81, 95%CI（-14.02,-7.61）,P<0.000 01]、C反应蛋白[MD=-5.45, 95%CI（-6.36,-4.53）,P<0.000 01]和类风湿因子[MD=-17.71, 95%CI（-30.52,-4.90）,P=0.007];乌头汤联合用药组不良反应发生率,与对照组相比,差异无统计学意义（P=0.32）。结论:基于当前证据,乌头汤联合化学药物治疗RA能显著提高临床总有效率、改善患者临床症状及降低实验室指标。但由于受纳入研究文献数量和质量限制,尚需要进一步开展多中心、大样本、双盲、双模拟的高质量临床随机对照试验,系统评价乌头汤联合化学药物治疗RA有效性和安全性。

语种： 中文