作者： 王珊;刘湘丹;周日宝;徐玉琴

期刊： 中南药学,2016年14(3):286-289 ISSN：1672-2981

作者机构： 湖南中医药大学药学院,长沙410208;湖南中医药大学第二附属医院,长沙410005;湖南中医药大学药学院,长沙,410208;[刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 王珊] 湖南中医药大学

关键词： 药用植物;基因工程技术;育种研究

摘要： 随着药用植物基因工程技术的快速发展,在提高药用植物抗病性和抗逆性、提高药用植物的有效成分含量、改善药材品质等方面的研究也越来越多,对中药现代化和可持续性发展具有重要意义。但转基因药用植物的安全性,药用价值是否改变等尚存争议,因此建立一套适用于转基因药用植物的安全性评价体系和判断标准,有利于促进基因工程技术在药用植物育种研究中的应用。

语种： 中文

项目作者： 刘湘丹

项目作者单位： 湖南中医药大学

项目批准号： 16B193

资助经费： 5万

立项时间： 2016

项目级别： 厅局市级

项目来源： 省教育厅科研项目

作者： 王志辉;彭美晨;刘湘丹;王朝珲;周日宝

期刊： 中药材,2016年39(10):2190-2193 ISSN：1001-4454

作者机构： [王志辉; 彭美晨; 刘湘丹; 王朝晖; 周日宝] 湖南中医药大学, 湖南, 长沙, 410208

关键词： 镉;低吸收;药用植物;筛选;农艺措施

摘要： 目的:在重金属镉污染地区筛选出镉低吸收药用植物品种以及采用农艺措施对重金属镉吸收产生调控效应。方法:采用大田筛选试验及施用石灰和厩肥等农艺措施。结果:车前、夏枯草、薏苡、决明、白扁豆为镉低积累品种,施用石灰和厩肥能明显降低植物中镉的含量,厩肥能明显增加地上部分生物量,并且石灰与厩肥同时施用效果最佳。结论:在重金属镉污染的地区种植镉低吸收的药用植物品种代替水稻等镉高积累的粮食作物,同时施用石灰和厩肥,进一步降低植物中镉含量,生产出合格的中药材,可以在镉污染地区实现更好的经济效益和社会效益。

语种： 中文

作者： 周日宝;刘畅宇;彭美晨;王朝晖;刘湘丹

期刊： 湖南中医药大学学报,2016年36(12):85-90 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208;[刘湘丹; 周日宝; 彭美晨; 王朝晖; 刘畅宇] 湖南中医药大学

关键词： 加兰他敏;生物合成途径;关键酶;基因调控;石蒜

摘要： 加兰他敏是一种广泛用于治疗阿尔茨海默氏症等疾病的药物,但研究发现,植物中加兰他敏含量极少,故科研人员一直致力于加兰他敏的合成研究。迄今为止,研究工作者已提出多种加兰他敏化学合成策略,但因其化学合成方法存在产率低、成本高、步骤复杂等诸多缺陷,不利于投入实际生产,探索其生物合成途径是目前最有效替代办法。本文综述了近年来加兰他敏合成的相关研究,且着重介绍了其生物合成途径及其相关酶研究进展,并对其后续研究进行展望。

语种： 中文

作者： 刘湘丹;蔡嘉洛;邹君华;郭婷;刘平安;...

期刊： 中医药导报,2016年22(3):39-41 ISSN：1672-951X

作者机构： [刘湘丹; 蔡嘉洛; 易刚强; 邹君华; 张亚利; 郭婷; 张聪子; 刘平安; 高昱] 湖南中医药大学

关键词： 吴茱萸碱;吴茱萸次碱;柠檬苦素;对比分析

摘要： 目的：通过建立的高效液相色谱法对吴茱萸及其炮制品中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素3个指标性成分含量进行测定,并进行对比分析。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱Agi Lent C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：乙腈-水（55：45）;流速：1 m L·min~（-1）;检测波长：225 nm;柱温：25℃。结果：吴茱萸炮制品与生品相比较,3个指标性成分含量均下降,其中柠檬苦素含量下降较多。结论：吴茱萸炮制后对吴茱萸碱、吴茱萸次碱含量影响不大,对柠檬苦素含量影响较大。

语种： 中文

作者： 易刚强;蔡嘉洛;朱贻霖;陈林;樊悦;...

期刊： 中草药,2016年47(4):640-647 ISSN：0253-2670

通讯作者： Tong, Q.-Z.

作者机构： [易刚强; 欧阳琳] The First Hospital of Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410000, China;[张亚丽; 蔡嘉洛; 樊悦; 陈林; 朱贻霖; 刘湘丹; 童巧珍] Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410208, China;[刘峰] Hunan Academy of Agricultural Sciences, Changsha, 410000, China

通讯机构： [Tong, Q.-Z.] H;Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, China

关键词： 灰毡毛忍冬;蕾期延长;基因克隆;生物信息学分析;基因表达

摘要： 目的基于前期对灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides转录组测序结果,从灰毡毛忍冬RNa中克隆灰毡毛忍冬MADS-box基因家族蕾期延长相关基因AGL15,并对其进行生物信息学及表达分析。方法对灰毡毛忍冬总RNA进行反转录酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增反应(rapid amplification of cDNA ends,RACE),获得完整的开放阅读框(ORF)。运用生物信息学的方法对该序列进行同源性分析和相似性比较,预测编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析。运用半定量PCR测得该基因在灰毡毛忍冬不同部位的表达情况。结果获得AGL15基因,ORF长795 bp,编码264个氨基酸,与葡萄Vitis vinifera中MADS-box基因家族AGL15基因相似性最高,且包含MADS和K-box的保守序列。AGL15蛋白无跨膜区域,定位于细胞质中,在灰毡毛忍冬各部位均有表达。结论首次从灰毡毛忍冬中克隆得到可能控制蕾期延长的基因,分析了其在灰毡毛忍冬不同部位表达差异性,为灰毡毛忍冬蕾期延长研究提供参考。

语种： 中文

作者： 刘湘丹;王朝晖;徐玉琴;周日宝;童巧珍;...

期刊： 中医药导报,2015年21(15):90-93 ISSN：1672-951X

作者机构： [刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 王朝晖; 黄嘉琪; 童巧珍] 湖南中医药大学

关键词： 重楼属;资源分布与生态环境;化学成分与药理作用;内生菌;栽培技术和组织培养

摘要： 对重楼属植物资源分布、生长生态环境、化学成分、药理作用、内生菌、栽培技术和组织培养相关研究进行了综述，其中重楼的化学成分、药理作用等方面的研究已日臻成熟，结合相关组织培养研究基础可知重楼内生菌、药材毒性及组织培养等方面仍有较大的研究空间。

语种： 中文

作者： 蔡嘉洛;易刚强;高昱;张亚利;童巧珍;...

期刊： 中南药学,2015年13(1):71-74 ISSN：1672-2981

作者机构： [刘湘丹; 蔡嘉洛; 易刚强; 张亚利; 童巧珍; 高昱] 湖南中医药大学

关键词： 山银花;绿原酸;木犀草苷;加工方法;高效液相色谱法

摘要： 目的 建立高效液相色谱法对不同加工方法山银花药材中绿原酸、木犀草苷2个指标性成分进行含量测定,确定山银花最佳加工方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱:AgiLent C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.4％冰醋酸,梯度洗脱;流速:1 mL·min-1;检测波长:350 nm;柱温:25℃.结果 不同加工方法山银花中绿原酸、木犀草苷含量有明显变化,其中低温烘干与杀青烘干山银花中绿原酸、木犀草苷含量较高.结论 低温烘干法加工山银花外观质量最优,绿原酸、木犀草苷含量最高,应广泛推广应用.

语种： 中文

作者： 刘湘丹;黄攀;卢岳华;马铭;周日宝;...

期刊： 中国中药杂志,2015年40(12):2428-2434 ISSN：1001-5302

作者机构： [刘湘丹; 周日宝; 袁林祥; 彭新君] 湖南中医药大学药学院;[黄攀; 卢岳华; 马铭] 湖南师范大学化学化工学院

关键词： 补肾通络方;马钱苷;阿魏酸;二苯乙烯苷;药代动力学

摘要： 研究灌胃补肾通络方后大鼠血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷药代动力学特征。采用液-液萃取法处理血浆样品;HPLC-UV 检测含量,色谱柱为Johnson spherigel C_(18)(4. 6 mm × 250 mm,5 μm),流动相为甲醇-0. 01% 冰醋酸水溶液,梯度洗脱,流速为1 mL·min ~(-1) ,柱温为30 ℃,检测波长:马钱苷为235 nm,阿魏酸和二苯乙烯苷为320 nm,进样量为10 μL。采用 DAS 2. 0软件对所测数据进行处理,得到大鼠血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的主要药动学参数如下:C_(max)分别为(0. 369 ± 0. 042),(0. 387 ± 0. 071),(0. 233 ± 0. 044) mg·L ~(-1) ;t_(max)分别为(0. 226 ± 0. 022),(0. 282 ± 0. 031),(0. 233 ± 0. 044) h;t_(1 /2β)分别为(6. 89 ± 0. 20),(10. 7 ± 0. 11),(6. 93 ± 0. 090) h;AUC_(0-∞)分别为(1. 91 ± 0. 36),(3. 22 ± 0. 52),(1. 52 ± 0. 33) mg·h·L ~(-1) ;AUC_(0-t)分别为(1. 62 ± 0. 33),(2. 58 ± 0. 43),(1. 30 ± 0. 30) mg·h·L ~(-1) ;CL 分别为(20. 2 ± 4. 0),(1. 39 ± 0. 23),(31. 7 ± 6. 9) L·h ~(-1)·kg ~(-1)。药代动力学研究结果表明,灌胃补肾通络方后马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷药动学曲线均符合血管外给药二室模型,且3种成分吸收快,马钱苷和二苯乙烯苷消除速度中等,阿魏酸消除慢(但生物利用度为最高),每天给药3次能维持血药浓度,适合制成普通口服制剂。

语种： 中文

作者： 徐玉琴;王珊;刘湘丹;童巧珍;周日宝;...

期刊： 中医药导报,2015年21(24):31-34 ISSN：1672-951X

作者机构： [刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 童巧珍; 孙梦姗; 王珊] 湖南中医药大学

关键词： 灰毡毛忍冬;花蕾;总RNA提取;改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法

摘要： 目的：探讨灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取的有效方法。方法：采用SDS法、Trizol法、普通试剂盒法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法提取灰毡毛忍冬花蕾总RNA并比较其效果。结果：SDS法、Trizol法和普通试剂盒法均不适用于本样品总RNA的提取;改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法均能有效去除蛋白质、多糖多酚及DNA,OD260/280为1.86-2.00,OD260/230为1.96-2.63,电泳条带清晰,RNA完整性好,且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带。但以多糖多酚试剂盒法提取效果最佳。结论：改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法均适合灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取,完全满足后续RT-PCR等分子生物学研究。

语种： 中文

作者： 刘湘丹;高昱;张亚利;蔡嘉洛;童巧珍;...

期刊： 中国药房,2015年(19):2628-2631 ISSN：1001-0408

作者机构： 湖南中医药大学药学院,长沙,410208;[刘湘丹; 蔡嘉洛; 张亚利; 童巧珍; 张聪子; 高昱] 湖南中医药大学

关键词： 蛇莓;种质资源;随机扩增多态性脱氧核糖核酸;遗传多样性;聚类分析;聚合酶链反应

摘要： 目的:研究湘产蛇莓种质资源的遗传多样性。方法:建立不同地理分布的蛇莓种质资源随机扩增多态性DNA（RAPD）反应体系,RAPD-聚合酶链反应（PCR）法检测湘产24组蛇莓样本（21个野生品,3个栽培品）,琼脂糖凝胶电泳分析结果,计算等位基因数（Na）、有效等位基因数（Ne）、多态性位点百分比（PPB）、Nei’s基因多样性指数（H）、Shannon’s信息指数（I）。结果:筛选出多态性引物14条,共扩增出90条电泳谱带,其中多态带为81条,Na为1.900 0,Ne为1.540 1,PPB为90.0%,H为0.312 8,I为0.467 5。结论:湘产蛇莓各区域样本间遗传多样性丰富,人工栽培品与野生品之间存在遗传背景上的差异,聚类结果与地理分布表现出明显相关性。

语种： 中文

作者： 袁林祥;刘湘丹;徐玉琴;周日宝;刘承;...

期刊： 局解手术学杂志,2015年(1):27-29 ISSN：1672-5042

作者机构： 湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208;[刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 刘承; 袁林祥; 蔡建] 湖南中医药大学

关键词： 大鼠;断尾;新装置;采血

摘要： 目的：探讨应用简易自制新装置进行大鼠断尾采血的效果,建立一种安全、实用、可重复的大鼠采血方法。方法用塑料瓶、木板等制作简易方便的装置固定大鼠,对鼠尾清洗、水浴等合适处理后进行断尾采血。结果自制固定器制作简单、操作方便,1 d可对20只大鼠重复采血6次,出血量0.5~1.0 mL,无大鼠死亡及操作人员受伤等情况发生。结论应用自制大鼠固定装置大鼠采血,血量多、安全性好,是一种理想的大鼠断尾采血新装置。

语种： 中文

作者： 黄攀;刘湘丹;马铭;卢岳华

期刊： 湖南师范大学自然科学学报,2015年38(3):53-57 ISSN：2096-5281

作者机构： 湖南师范大学化学生物学及中药分析教育部重点实验室,中国长沙,410081;湖南中医药大学药学院,中国长沙,410208;[刘湘丹] 湖南中医药大学;[卢岳华; 黄攀; 马铭] 湖南师范大学

关键词： 补肾通络方;马钱苷;阿魏酸;二苯乙烯苷;血药浓度;高效液相色谱法

摘要： 目的:建立灌胃补肾通络方大鼠血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的含量测定方法.方法:以甲醇-乙酸乙酯(V甲醇∶V乙酸乙酯=3∶1)提取处理血浆,氮气吹干后流动相复溶进样.色谱条件:Johnson spherigel C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.01％乙酸水溶液,梯度洗脱;检测波长:马钱苷为235 nm,阿魏酸和二苯乙烯苷为320 nm;流速:1 mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL.结果:空白血浆中内源性物质不干扰样品的测定.马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷分别在0.03～3.00,0.03 ～3.00和0.02 ～2.00 mg/L范围内均有良好的线性关系(r≥0.999),检测限依次为0.020,0.015和0.010 mg/L;提取回收率分别大于79％、74％和58％,日间、日内精密度(RSD)均分别小于10％,7.3％和9.7％.结论:所建立的含量测定方法操作简便,灵敏,准确,适用于大鼠灌胃补肾通络方后血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的同时测定,为补肾通络方中有效成分药动学研究提供参考.

语种： 中文

作者： 刘湘丹;徐玉琴;冯懿卉;周日宝;王朝晖;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2015年35(9):33-36 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学药学院;[石国强] 益阳广播电视大学;[刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 王朝晖; 童巧珍; 冯懿卉] 湖南中医药大学

关键词： 灰毡毛忍冬;灰毡毛忍冬变异株;忍冬;叶;显微特征

摘要： 目的为灰毡毛忍冬及其变异株、忍冬的鉴别和种质选育资源的开发利用提供依据。方法采用性状鉴别和显微鉴别的方法从叶片外部形态和内部构造进行对比研究,探究灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶的异同点。结果灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶在外部形态（叶形、叶大小）和内部构造（毛茸、气孔指数等）均存在差异,其中灰毡毛忍冬与其变异株间差异相对较小,灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬差异较大。结论灰毡毛忍冬、灰毡毛忍冬变异株、忍冬叶外部形态和内部显微特征存在差异,可为三者鉴别提供参考。

语种： 中文

作者： 刘湘丹;王姣;李凤娟;周日宝;王朝晖;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2015年35(5):31-33,72 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学药学院,湖南长沙,410208;[刘湘丹; 刘笑蓉; 李凤娟; 周日宝; 王姣; 王朝晖] 湖南中医药大学

关键词： 黄花石蒜;加兰他敏;花;鳞茎;衡山;大围山

摘要： 目的 探索人工栽培黄花石蒜中加兰他敏的最佳采收器官及最适产地,寻找高含量的药材原料.方法 采用HPLC法测定人工栽培黄花石蒜不同器官及不同产地中加兰他敏含量.结果 采用SPSS 17.0软件Corrected Model(模型检验)进行统计学分析表明:黄花石蒜不同器官加兰他敏的含量差别具有显著统计学意义(P＜0.001),其含量由高到低各产地均依次为:花＞根＞花葶＞鳞茎,其3个产地加兰他敏平均含量依次为花(0.135％)＞根(0.080％)＞花葶(0.020％)＞鳞茎(0.017％);不同产地黄花石蒜中加兰他敏含量差别无统计学意义(P＞0.05).结论 黄花石蒜花中含量远远高于鳞茎中含量,每年都可采收,花可作为提取加兰他敏的药材原料,代替传统上使用的一次性采挖的鳞茎;3个产地人工栽培黄花石蒜中加兰他敏含量有细微差别,若以花作为药材原料,则大围山可作为最适种植区.

语种： 中文

作者： 刘湘丹;徐玉琴;王珊;童巧珍;周日宝

期刊： 湖南中医药大学学报,2015年35(12):60-63 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208;[刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 童巧珍; 王珊] 湖南中医药大学

关键词： 灰毡毛忍冬;基因全长克隆;总RNA;不同器官;提取方法

摘要： 目的获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法。方法以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果。结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅适用于叶总RNA的提取;改良CTAB法对茎总RNA提取效果最佳;而多糖多酚试剂盒法提取的花蕾总RNA质量高、完整性较好,且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带。结论 Trizol法最适于灰毡毛忍冬叶总RNA提取;改良CTAB法最适于茎总RNA提取;多糖多酚试剂盒法最适于花蕾总RNA提取;3种方法提取出来的总RNA均能满足灰毡毛忍冬中相关基因全长克隆及时空表达分析的要求。

语种： 中文

作者： 刘湘丹

导师： 卢岳华   学位年度：2015   授予学位：博士

学位授予单位： 湖南中医药大学

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关键词： 补肾通络方;药代动力学;药效物质基础;肾小球系膜细胞;血浆药理学;作用机制

作者： 刘湘丹;周日宝;王朝晖;童巧珍;刘笑蓉;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2015年35(8):70-71 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学药学院,湖南长沙,410208;[刘湘丹; 周日宝; 王朝晖; 童巧珍; 刘笑蓉; 王智] 湖南中医药大学(湖南省中医药研究院)

关键词： 中药资源与开发专业;实践教学模式;教学改革

摘要： 中药资源是中医治病、中药制药、中医药产业健康发展的物质基础,是国家的重要战略资源.近年来,随着人类医疗和保健产业的快速发展及世界范围内“回归自然”热潮的兴起,现代医药业、美容和保健品等行业对中药的需求与日俱增,过度采挖或掠夺式开发导致资源逐年萎缩与资源有限性之间的矛盾日益加剧.开设中药资源与开发专业,培养实践动手能力强和综合素质高的相关专业人才,合理利用和开发中药资源,是我国医药卫生事业发展的迫切要求.

语种： 中文

作者： 李习平;周日宝;刘湘丹;王姣;单自强;...

期刊： 中国药师,2015年(8):1274-1276 ISSN：1008-049X

作者机构： [李习平] 岳阳职业技术学院;湖南中医药大学药学院;[刘湘丹; 徐玉琴; 王姣; 周日宝; 单自强] 湖南中医药大学

关键词： 杜仲;高效液相色谱法;指纹图谱;松脂醇二葡萄糖苷

摘要： 目的：：用松脂醇二葡萄糖苷为参照物,建立不同生长年限及不同品种类型的杜仲HPLC指纹图谱,以此为建立郴州大诚中药饮片有限责任公司GAP基地杜仲HPLC指纹图谱的企业质量标准提供依据。方法：采用ZORBAX Eclipse XDB-C18(250 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸水,梯度洗脱,检测波长为277 nm,流速为1.0 ml·min-1,柱温为25℃,进样量为5μl。结果：建立了以松脂醇二葡萄糖苷为参照物的杜仲HPLC指纹图谱,确定了14个共有峰,10批样品指纹图谱整体相似度均在0.939以上。结论：该方法简便,重复性好,HPLC指纹图谱可作为郴州大诚中药饮片有限责任公司GAP基地杜仲药材的企业质量标准。

语种： 中文

作者： 黄攀;刘湘丹;卢岳华;马铭

作者机构： [黄攀; 刘湘丹; 卢岳华; 马铭] 化学生物学及中药分析教育部重点实验室植化单体开发与利用湖南省重点实验室湖南师范大学;[黄攀; 刘湘丹; 卢岳华; 马铭] 湖南中医药大学药学院

会议名称： 第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会

会议时间： 2015-01-01

会议地点： 中国陕西西安

会议论文集名称： 第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集(第三分册)

关键词： 补肾通络方;马钱苷;阿魏酸;二苯乙烯苷;血药浓度;高效液相色谱法

摘要： <正>补肾通络方是临床常用的有效治疗肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)的经验方,由制首乌、白术、当归、丹参、淮山、山茱萸、川芎、爵床、车前子、泽兰等药物组成,临床及实验研究表明其对NS肾虚夹瘀症有较好的治疗作用[1,2,3]。为进一步阐明该方的作用机制,建立适合于其主要活性成分的体内分析方法尤为重要。马钱苷是山茱萸的有效成分之一,阿魏酸是当归和川芎的有效成分

语种： 中文