作者： 成细华（成细华）;喻嵘

期刊： 中医药导报,2008年14(11):107-108 ISSN：1672-951X

作者机构： 湖南中医药大学,湖南,长沙,410007

关键词： 生物化学;实验教学;科研素质

摘要： 文章通过生化试验课教学实践,认为中医药院校学生科研素质的提高,可以通过规范教师示范操作,学生亲自设计实验,重视实验小结等途径来实现.

语种： 中文

作者： 喻嵘;成细华（成细华）;胡伟;魏开春

期刊： 中国糖尿病杂志,2008年16(7):438-440 ISSN：1006-6187

作者机构： [成细华; 喻嵘; 胡伟; 魏开春] 湖南中医药大学基础医学院血管生物学实验室;[Guo Yubing; Liu Junli] 加拿大麦吉尔大学医学院内科医学系

关键词： 糖尿病,2型;转基因技术;胰岛素样生长因子1受体;胰岛素受体

摘要： 目的 观察骨骼肌胰岛素样生长因子1受体及胰岛素受体的功能缺失(MKR)转基因2型糖尿病小鼠的血糖及其生长情况.方法 以MKR鼠自然交配繁殖的子代为研究对象,定时检测其血糖、体重、胰岛素.采用C57小鼠为对照.结果 MKR鼠所有子代均出现长度为330bp的DNA片断,表明该MKR鼠后代能稳定遗传.新生MKR鼠自出生3周开始,血糖即显著增高,5周后血糖则稳定地维持在较高水平.其体重增长随年龄的增长而减慢,至4月龄时基本稳定.MKR鼠在2月龄时即表现出显著的高胰岛素血症及糖耐量减低,与对照组小鼠比较,差异有统计学意义(P＜0.01).MKR鼠在生长过程中无自然死亡发生.结论 MKR鼠是研究2型糖尿病较好的动物模型之一.

语种： 中文

作者： 贺卫和;曾嵘;成细华（成细华）

期刊： 中药药理与临床,2008年24(4):43-44 ISSN：1001-859X

作者机构： [贺卫和; 曾嵘] 湖南中医药大学药理教研室;[成细华] 湖南中医药大学生化教研室

关键词： 土鳖虫;缺血再灌注;抗氧化

摘要： 目的：研究土鳖虫对脑缺血缺氧的保护作用。方法：采用结扎双侧颈总动脉和迷走神经的方法后观察小鼠存活时间；采用化学法测量缺血再灌注小鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合成酶（NOS）活性，一氧化氮（NO）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）的含量。结果：土鳖虫水提取液能明显延长小鼠耐缺氧时间；增强脑组织中SOD的活性，降低NOS活性，增加GSH含量和降低NO、MDA的含量。结论：土鳖虫提取液对脑缺血再灌注小鼠具有一定的保护作用。

语种： 中文

作者： R. Yu;X.-H. Cheng;W. Hu;M.J. Xiao;J.-L. Liu

期刊： 中国组织工程研究,2007年11(45):9075-9078 ISSN：2095-4344

通讯作者： Yu, R.

作者机构： [Yu R.; Xiao M.J.; Hu W.; Cheng X.-H.] Basic Medical College, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007 Hunan Province, China;[Liu J.-L.] Fraser Laboratories, Department of Medicine, McGill University, 687 Pine Avenue West, Montreal, QC H3A 1A1, Canada

通讯机构： [Yu, R.] B;Basic Medical College, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, China

关键词： 2型糖尿病;转基因技术;胰岛素样生长因子1受体;胰岛素受体;炎症因子

摘要： 目的:临床研究表明,2型糖尿病及其并发症患者,均可出现炎症反应标志物的异常改变.观察骨骼肌胰岛素样生长因子1受体及胰岛素受体功能缺失转基因2型糖尿病小鼠的糖代谢及其相关炎症因子的变化.方法:实验于2005-11/2006-08在湖南中医药大学SPF实验动物中心及血管生物学实验室(国家三级实验室)完成.①实验材料:由美国国立卫生研究院(MH)授权使用引进的10只MKR鼠,经自然交配后繁殖的子代28只及30只C57小鼠.②实验方法:对MKR鼠进行鉴定后,从MKR鼠子代出生第3周开始每周定时以电化学法血糖仪进行血糖检测.③实验评估:观察2月龄MKR鼠血糖及胰岛素的水平;双抗体夹心ELISA法检测3月龄MKR鼠细胞间黏附分子1、血管内皮黏附分子1、脂联素的变化.同期采用C57小鼠进行对照.结果:纳入由10只MKR鼠经自然交配后繁殖的子代28只,经鉴定后22只纳入实验观察;C57小鼠30只,相关炎症分子检测的实验中有2例因血液样本溶血剔除,其余均进入结果分析.①MKR鼠所有子代鼠均会出现长度为330 bp的DNA片断,表明该MKR鼠后代能稳定遗传.②新生MKR鼠自出生3周开始,即出现显著的血糖增高,5周以后血糖则较稳定地维持在高水平.MKR鼠在2月龄时即表现出显著的高胰岛素血症及糖耐量低下,与C57对照组小鼠比较,差异具有非常显著性意义(P＜0.01).③MKR鼠的脂联素含量显著升高,而细胞间黏附分子1、血管内皮黏附分子1含量亦显著增高,与C57对照组小鼠相比,差异具有非常显著性意义(P＜0.01).结论:本文成功地引进了MKR模型,MKR鼠是目前一种非常良好的2型糖尿病动物模型,并具有明显的炎症反应特征.

语种： 中文

作者： 成细华（成细华）;杨美辉;田道法;喻嵘;胡伟;...

期刊： 中华中医药学刊,2007年25(4):712-714 ISSN：1673-7717

作者机构： 湖南中医药大学,湖南,长沙,410007;湖南省地震局卫生所,湖南,长沙,410003

关键词： 益气解毒;气虚;体质状态;免疫机能

摘要： 目的:观察中药"益气解毒"法对力竭性游泳所致气虚体质状态小鼠运动能力及免疫功能的影响.方法:实验动物随机分为4组,正常对照组常规饲养,其余3组动物采用控制进食量,150g/(kg·d)加力竭游泳造成气虚体质状态,并分别灌服生理盐水、"益气解毒"颗粒或贞芪颗粒,连续16天.在实验开始后第4、8、12、15天记录力竭游泳时间,实验第16天处死动物,观察免疫机能指标的变化.结果:与模型组动物相比较,"益气解毒"法能明显延长小鼠负重游泳时间(P＜0.01);激活网状内皮系统的吞噬功能(P＜0.01),提高外周血中T淋巴细胞比率(P＜0.01).结论:"益气解毒"法有增强气虚体质状态小鼠机体免疫功能和抗疲劳作用.

语种： 中文

作者： 成细华（成细华）;田道法

期刊： 中国中医药信息杂志,2006年13(3):106-109 ISSN：1005-5304

作者机构： 湖南中医学院,湖南,长沙,410007

关键词： 肿瘤细胞;信号传导;中药调节;综述

摘要： 细胞信号通路是细胞应答内外环境信息，经信号网络整合作用调节基因表达及细胞的增殖、分化、发育、死亡的途径。癌症几乎都起源于单个体细胞和他们的祖细胞，是一种体细胞遗传疾病。现在比较公认的癌发生模式是多基因突变、多因素、多途径、多步骤的过程。细胞信号修饰和改变所有细胞的行为和功能，细胞生长、分化和死亡的许多方面都受细胞内外正性和负性信号平衡的调控。肿瘤细胞生长失调的发生是以信号传导紊乱为特征的，在肿瘤细胞中这种平衡被打破引起基因产物改变、细胞间正常的相互接触抑制功能丧失，从而获得生长优势。通过中医药干预肿瘤细胞信号通路来实现对肿瘤治疗作用的研究，国内外虽起步较迟。

语种： 中文

作者： 邓奕辉（邓奕辉）;李定祥（李定祥）;成细华（成细华）;喻嵘（喻嵘）;梅志刚

期刊： 中国中医药科技,2006年13(5):309-310 ISSN：1005-7072

作者机构： 湖南中医学院中医内科实验室·长沙,410007;[邓奕辉; 成细华; 李定祥; 喻嵘; 梅志刚] 湖南中医学院

关键词： @降糖通脉方/药理学;人脐静脉血管内皮细胞/药物作用;体外研究

摘要： 目的：观察降糖通脉方对由葡萄糖、胰岛素和氧化型低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及机制。方法：采用葡萄糖、胰岛素和氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐带静脉内皮细胞损伤模型为受试对象，观察降糖通脉方（JTTMF）对该损伤细胞膜型的保护作用。各实验组细胞分别施加不同处理因素48小时后，观察各组细胞活性及细胞培养液中一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）含量的变化。结果：各组细胞继续培养48小时后，模型组细胞活力较正常组明显下降（P〈0．01），NO含量明显下降（P〈0．05），ET-1含量明显升高（P〈0．05），而不同剂量的JTIYMF用药后可以显著地改善细胞活力（P〈0．05），显著升高NO含量（P〈0．01），抑制ET-1分泌（P〈0．05）。结论：降糖通脉方具有一定的保护血管内皮细胞的作用，可能与调节血管舒缩功能有关。

语种： 中文

作者： 喻嵘（喻嵘）;陈大舜;邓奕辉;成细华（成细华）

期刊： 中国中医药信息杂志,2005年12(1):17-19 ISSN：1005-5304

作者机构： 湖南中医学院中医内科实验室,湖南,长沙,410007;[成细华; 喻嵘; 邓奕辉; 陈大舜] 湖南中医学院

关键词： 左归双降方;血管内皮细胞;葡萄糖;胰岛素;氧化型低密度脂蛋白;内皮素;一氧化氮;细胞粘附因子;糖尿病血管并发症

摘要： 目的观察左归双降方提取液对葡萄糖(Glu)、胰岛素(Ins)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)联合诱导下血管内皮细胞损伤的干预作用与作用机理.方法以人脐带静脉内皮细胞株ECV-304为受试对象,以不同浓度的Glu、Ins、ox-LDL联合作用24 h,建立了一种糖尿病血管并发症的体外内皮细胞损伤模型,并在此基础上观测左归双降方提取液(ZGSJF)对该细胞损伤模型的调节作用.各试验组细胞继续培养48 h后分别检测细胞活性及其细胞培养液中的内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)以及细胞粘附因子(ICAM-1)的含量.结果细胞继续培养48h后,模型组较正常组细胞活力明显下降(P<0.01),ET-1及ICAM-1含量明显升高(P<0.01),NO含量明显下降(P<0.01).而不同剂量的ZGSJF给药后能显著改善细胞活力(与模型组比较,P<0.05),降低ET、ICAM-1及升高NO含量(与模型组比较,P<0.01),且显著优于对照药达美康.结论左归双降方对血管内皮细胞具有一定的保护作用,而这一作用可能是通过促进内皮细胞分泌舒张性因子NO、减少血管收缩因子ET-1的分泌、抑制与炎症反应相关的细胞粘附过程等途径,从而改善糖尿病合并高血压的血管损伤.

语种： 中文

作者： 成细华（成细华）;喻嵘（喻嵘）;邓奕辉;梅志刚

期刊： 中国中医药信息杂志,2005年12(7):37-39 ISSN：1005-5304

作者机构： [成细华; 喻嵘; 邓奕辉; 梅志刚] 湖南中医学院;湖南中医学院 湖南长沙410007

关键词： 补阳还五汤;缺氧-复氧;人脐静脉ECV

摘要： 目的探讨补阳还五汤(BHD)对缺氧-复氧损伤内皮细胞(ECV)的保护作用.方法体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,缺氧-复氧造成ECV损伤,同时加入不同剂量BHD,检测细胞丙二醛(MDA)、培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、内皮素-1(ET-1)及一氧化氮(NO)的含量变化.结果ECV304缺氧-复氧后,与空白组比较,LDH、MDA及ET-1含量显著升高(P＜0.01),而NO含量显著下降(P＜0.05).当加入低、中、高剂量的BHD或尼莫地平阳性对照药后,与缺氧-复氧模型组比较,LDH、MDA及ET-1含量下降(P＜0.01或P＜0.05),而NO含量升高(P＜0.01).结论BHD能抑制缺氧-复氧对ECV的损伤,对缺氧-复氧环境下的ECV起保护作用.

语种： 中文

作者： 成绍武;葛金文;成细华（成细华）

期刊： 中国中医药信息杂志,2005年12(11):29-31 ISSN：1005-5304

作者机构： [成细华; 葛金文; 成绍武] 湖南中医学院;湖南中医学院 湖南长沙410007

关键词： 降脂通脉方;动脉粥样硬化;低密度脂蛋白受体相关蛋白;家兔

摘要： 目的探讨降脂通脉方对食饵性动脉粥样硬化家兔主动脉平滑肌细胞低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)mRNA表达的影响.方法将24只家兔随机分为空白对照组、动脉粥样硬化模型组、降脂通脉方组、血脂康药物对照组.采用胆固醇高脂饮食喂养复制家兔动脉粥样硬化模型,60 d后开始灌胃给药,30 d后处死取主动脉平滑肌.采用RT-PCR检测LRP mRNA表达.结果模型组与空白组比较,主动脉平滑肌细胞LRP mRNA表达水平均明显增高(P＜0.01);降脂通脉方能显著降低动脉粥样硬化家兔主动脉平滑肌细胞LRP mRNA表达(P＜0.01).结论降脂通脉方能使动脉粥样硬化家兔主动脉平滑肌LRP mRNA表达下调,提示降脂通脉方可能通过调节家兔主动脉平滑肌细胞LRP来防治动脉粥样硬化.

语种： 中文

作者： 胡梅（胡梅）;刘群良;张月娟;谭峰（谭峰）;成细华（成细华）

期刊： 湖南中医药大学学报,2005年25(5):27-28,59 ISSN：1674-070X

作者机构： [胡梅; 成细华; 谭峰; 刘群良; 张月娟] 湖南中医学院;湖南中医学院 湖南长沙410007

关键词： 还少丹;单胺氧化酶;抗衰老;大、小白鼠

摘要： 目的研究还少丹对大、小白鼠脑和肝B型单胺氧化酶(MAO-B)活性的影响.方法采用紫外分光光度法测定各组白鼠脑、肝组织内MAO-B活性.结果老年小白鼠MAO-B有活性增高之老年性变化(P＜0.01),老年大、小白鼠还少丹组脑、肝MAO-B活性明显低于对照组(P＜0.01).结论还少丹能对抗老年白鼠因衰老引起单胺氧化酶活性的改变,从生化酶学角度进一步阐明还少丹的抗衰老作用.

语种： 中文

作者： 成细华（成细华）;邓奕辉;梅志刚;丁志高（丁志高）;喻嵘（喻嵘）;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2004年24(2):4-6 ISSN：1674-070X

作者机构： [丁志高; 成细华; 喻嵘; 邓奕辉; 梅志刚; 田道法] 湖南中医学院;湖南中医学院 湖南长沙410007

关键词： 补阳还五汤;缺氧-复氧;人脐静脉内皮细胞

摘要： 目的探讨补阳还五汤对缺氧 - 复氧内皮细胞ICAM - 1mRNA表达的影响及其保护作用.方法取内皮细胞株EVC304,随机分为5组进行相应处理.空白组(A)37 ℃, 5%CO2正常培养24 h;缺氧组(B)持续通入95%N2+5%CO2混合气24 h;缺氧 - 复氧组(C)持续通入95%N2+5%CO2混合气12 h后,改用正常培养12 h;西药组(D)实验前加入终浓度为10 ng /L的尼莫地平,方法同C组;补阳还五汤组(E):以补阳还五汤培养,方法同C组.硫氰酸胍 - 酚 - 氯仿法提取各组细胞总RNA,以β - Actin为内对照,将RT - PCR产物用1.5%的琼脂糖凝胶电泳,用ICAM - 1和β - Actin的光密度比值表示mRNA水平.结果缺氧 - 复氧组ICAM - 1mRNA表达最高(P<0.01),补阳还五汤组和西药组均显示ICAM - 1mRNA表达抑制(P<0.01,P<0.01).结论补阳还五汤能抑制内皮细胞ICAM - 1mRNA异常表达,对缺氧 - 复氧内皮细胞起保护作用.

语种： 中文

作者： 贺卫和;成细华（成细华）;徐爱良

期刊： 湖南中医药大学学报,2003年23(2):7-9 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医学院药学院;[成细华; 徐爱良] 湖南中医学科技处;[贺卫和] 湖南中医学院

关键词： 土鳖虫;凝血酶原时间;抗凝血酶Ⅲ;兔

摘要： 目的 观察土鳖虫提取液对家兔抗凝血作用的影响。方法 (1) 体内实验 给家兔灌胃土鳖虫提取液5d后，测定白陶土部分凝血酶时间（KPTT）、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)；(2) 体外实验 体外测定土鳖虫提取液对家兔血浆KPTT、PT、TT及抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）的影响。结果 土鳖虫提取液在家兔体内、外均能使血浆KPTT、PT及TT延长，其作用随土鳖虫提取液浓度的增加而增强，抗凝活性不依赖于AT-Ⅲ。结论 土鳖虫提取液具有明显的抗凝作用，可能是对凝血酶发挥的直接作用。

语种： 中文

作者： 成细华（成细华）;周小云;刘凡;姚磊

期刊： 湖南农业大学学报(自然科学版),2001年27(6):463-466 ISSN：1007-1032

作者机构： [成细华] 湖南中医学院科技处;[周小云] 湖南农业大学;[刘凡; 姚磊] 北京市农林科学院蔬菜研究中心

关键词： 根癌农杆菌;结球白菜;转基因植株;筛选

摘要： 为了给外源有用基因导入结球白菜并高效稳定地表达提供依据,以结球白菜的子叶-子叶柄为外植体,采用农杆菌共培养法把外源基因C58/pV11导入结球白菜.在选择最优的转化条件--根癌农杆菌侵染外植体15 min,农杆菌培养和共培养时在培养基中均加入AS,培养基pH为5.2,共培养3 d的条件下,获得转基因植株.其中抗性植株的抗草丁膦试验、转基因植株DNA的PCR及PCR-Southern斑点杂交鉴定等结果表明,50%的抗性植株的基因组中有外源基因的整合.

语种： 中文

作者： 田雪飞;陈颂;成细华（成细华）;陈大舜

期刊： 湖南中医药大学学报,2001年21(3):14-17 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医学院科技处,;[成细华; 陈颂; 陈大舜; 田雪飞] 湖南中医学院

关键词： 动物实验;免疫组化;降糖益肾方

摘要： 观察降糖益肾方对 2 型糖尿病并发肾病大鼠肾小球转化细胞生长因子β1、IV 型胶原的影响,从分子水平探讨其治疗糖尿病肾病的机理.运用免疫组化的方法(ABC法)观察对比各组肾小球转化细胞生长因子β1 (TGF-β1)、IV 型胶原阳性产物的生成情况.模型组大鼠肾小球棕色阳性产物明显增多,经降糖益肾方治疗后棕色阳性产物生成明显减少.结论:结果提示本方可通过调节TG F- β1达到调控肾脏整体功能,并可减少 IV 型胶原的生成而维持肾小球细胞外基质 (ECM) 的完整性.

语种： 中文