电感耦合等离子体发射光谱测定食用植物油中的重金属元素
作者:
江波;陈林
期刊:
中国油脂 ,2022年47(1):126-130 ISSN:1003-7969
作者机构:
[江波] 长江师范学院现代农业与生物工程学院;[陈林] 湖南省中医药研究院中药研究所
关键词:
食用植物油;重金属;电感耦合等离子体发射光谱;多模式进样系统;快速自动曲线拟合技术
摘要:
研究快速准确测定食用植物油中重金属元素的方法。采用微波消解对食用植物油样品进行预处理,在多模式进样系统(MSIS)的双重模式下,采用电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)测定其中可形成蒸气重金属元素As、Sb、Hg和不可形成蒸气重金属元素Ni、Cd、Pb的含量。选择盐酸对样品进行酸化并还原氧化态元素,通过在线加入L-半胱氨酸/酒石酸提高可形成蒸气元素的蒸气发生效率,利用快速自动曲线拟合技术(FACT)消除光谱干扰。方法的检出限(LOD)为0.63~20.60μg/kg,加标回收率为97.0%~104%,相对标准偏差(RSD)为1.5%~2.6%。该方法在分析可形成蒸气元素和不可形成蒸气元素时无需切换不同进样系统,能满足食用植物油中微量重金属元素的高通量分析需要。
语种:
中文
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基于网络药理学和实验验证探讨黄芪散治疗阿尔茨海默病的作用机制
作者:
张运辉;杨梦琳;周小青;伍大华;刘霞;...
期刊:
天然产物研究与开发 ,2022年34(12):2119-2129 ISSN:1001-6880
作者机构:
[杨梦琳; 张运辉] 重庆三峡医药高等专科学校,重庆404120;[杨梦琳; 伍大华; 张运辉] 湖南中医药大学,长沙410208;[伍大华] 湖南省中医药研究院附属医院,长沙410006;[李祥; 刘霞] 重庆三峡医药高等专科学校;[周小青] 湖南中医药大学
关键词:
黄芪散;网络药理学;阿尔茨海默病;线粒体自噬
摘要:
运用网络药理学方法探讨黄芪散治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的作用机制。通过TCMSP数据库检索黄芪散的有效成分及相关靶点;采用DisGeNET和GeneCards数据库搜集AD靶点,通过String在线数据库构建靶蛋白相互作用网络,采用R语言对关键靶点进行GO和KEGG富集分析。采用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤作为AD细胞模型,通过MTT法检测细胞存活率,采用显微镜观察细胞形态和突触生长,通过透射电镜观察PC12细胞自噬小体,利用试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;最后采用ELISA法和Western blot实验对网络药理学主要预测的生物过程与信号通路进行验证。结果共获得黄芪散44个有效成分,对应靶点134个,与AD相关靶点共102个,KEGG相关信号通路前20条,GO分析前20个生物学过程。细胞实验证实了黄芪散能有效增加PC12细胞的存活率和突触长度,有效促进Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞自噬小体包裹受损线粒体,降低其炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α的含量,降低ROS水平,升高LC3Ⅱ/Ⅰ比值,上调PINK1、parkin、BDNF蛋白表达,下调p62、NLRP3蛋白表达。黄芪散可能是通过激活PINK1/parkin通路促进线粒体自噬,降低ROS水平进而抑制NLRP3炎症小体的活化和改善突触可塑性而发挥治疗AD作用。
语种:
中文
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枳实通降颗粒通过干预MK2磷酸化调控c-kit表达防治术后炎性肠梗阻的机制研究
作者:
莫黎;李倩;周平兰;王华帅;李莹;...
期刊:
世界科学技术-中医药现代化 ,2022年24(12):4977-4983 ISSN:1674-3849
作者机构:
[莫黎; 周平兰] 湖南中医药大学第二附属医院;[李莹; 李倩; 黄丽; 王华帅] 湖南中医药大学研究生院;[何永恒] 湖南省中医药研究院附属医院
关键词:
术后炎性肠梗阻;大鼠;枳实通降颗粒
摘要:
目的研究枳实通降颗粒对术后炎性肠梗阻模型大鼠小肠组织中MAPK激活蛋白激酶2(MAPK-activated protein kinase 2,MK2)、磷酸化MAPK激活蛋白激酶2(p-MK2)、炎症因子IL-6、IL-8、TNF- α及原癌基因(c-kit)的影响,探讨其作用机制。方法先将大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、枳实通降颗粒4.2 g·kg~(-1)、8.3 g·kg~(-1)、16.6 g·kg~(-1)组和普芦卡必利0.18 mg·kg~(-1)组,药物干预组于造模术后6 h灌胃给药1次,其余各组以生理盐水代替,术后24 h取材。ELISA法测定各组大鼠小肠组织中炎症因子的含量; Western blot检测小肠组织中MK2、p-MK2和c-kit的蛋白表达情况;RT-PCR检测MK2和c-kit mRNA的表达情况;免疫组化观察c-kit阳性细胞情况。结果与假手术组及空白组比较,模型组大鼠肠道推进率及ckit蛋白、阳性细胞、mRNA的表达水平均明显偏低,而胃内容物残留率及小肠组织中炎症因子含量、p-MK2蛋白的表达水平则明显偏高(P<0.01);与模型组比较,枳实通降颗粒各剂量组及普芦卡必利组肠道推进率、 c-kit蛋白及mRNA、阳性细胞的表达水平均明显升高,而胃内容物残留率及小肠组织中炎症因子含量、p- MK2蛋白表达水平则明显偏低(P<0.01)。但各组MK2蛋白及mRNA的表达水平并无明显差异(P>0.05)。结论枳实通降颗粒能显著促进术后炎性肠梗阻模型大鼠的胃肠功能恢复,其作用机制是通过干预MK2磷酸化,抑制肠壁组织的炎症反应,增加c-kit表达水平来实现的。
语种:
中文
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基于网络药理学与分子对接技术探讨固脾消积饮对肝癌HepG2.2.15细胞焦亡的影响
作者:
翦慧颖;郜文辉;谭小宁;柳卓;张振;...
期刊:
中国实验方剂学杂志 ,2022年28(6):159-166 ISSN:1005-9903
通讯作者:
Zeng, P.-H.
作者机构:
[李可心; 张振; 郜文辉; 翦慧颖] Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410208, China;[谭小宁; 柳卓; Zeng P.-H.] Affiliated Hospital of Hunan Academy of Chinese Medicine, Changsha, 410006, China
通讯机构:
[Zeng, P.-H.] A;Affiliated Hospital of Hunan Academy of Chinese MedicineChina
关键词:
固脾消积饮;细胞焦亡;网络药理学;分子对接
摘要:
目的:以半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)介导的细胞焦亡为基础,采用网络药理学及分子对接技术筛选中药复方固脾消积饮中抗肿瘤的活性成分,通过体外实验探讨该方干预肝癌HepG2.2.15细胞焦亡的分子机制。方法:利用中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选中药复方固脾消积饮的化合物及靶点,并获取对应的基因Symbol;从GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库、PharmGKB数据库、TTD数据库搜集Caspase-1的靶点,运用Cytoscape构建化合物-基因靶点调控网络;采用STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络分析,采用基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析预测该方有效成分对Caspase-1的作用机制,应用AutoDock Vina进行分子对接验证。制备固脾消积饮含药血浆,体外培养肝癌HepG2.2.15细胞;将HepG2.2.15细胞分为空白血浆组、VX-765组、VX-765+含药血浆组、含药血浆组,使用15%含药血浆干预48 h后,免疫荧光染色法检测细胞膜表面GSDMD-N的表达及分布情况,检测HepG2.2.15细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)的释放情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中特征蛋白Caspase-1、消皮素D-N端(GSDMD-N)的表达水平。结果:网络药理学筛选得到丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、蛋白激酶B1(Akt1)、丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)、V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)、TP53为主要作用靶点,化合物7-hydroxy-5,8-dimethoxy-2-phenyl-chromone、黄芩素、鼠李素、荠苎黄酮、异鼠李黄素、7-O-methylisomucronulatol、芒柄花黄素、毛蕊异黄酮、木犀草素、槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、黄芩苷为主要活性成分,GO富集分析涉及氧化应激反应、对金属离子的反应、与泛素-类蛋白连接酶结合、磷酸酶结合等多个生物过程, KEGG通路富集分析涉及MAPK、核转录因子(NF)-κB、p53、低氧诱导因子-1(HIF-1)等信号通路,分子对接表明靶点与成分具有较好结合性。体外实验表明,与空白血浆组相比,VX-765组的GSDMD-N荧光信号减少减弱,LDH、IL-1β、IL-18的释放量均减少,Caspase-1、GSDMD-N的表达显著下调(P&0.01);固脾消积饮含药血浆组的GSDMD-N荧光信号增加增强,LDH、 IL-1β、IL-18的释放量显著增加,Caspase-1、GSDMD-N的表达显著增高(P&0.01)。结论:固脾消积饮通过多靶点多通路调控Caspase-1以诱导肝癌HepG2.2.15细胞发生焦亡。
语种:
中文
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金刚丸对骨质疏松症模型大鼠p38 MAPK、JNK、IL-1表达的影响
作者:
沈琳玲;戎宽;叶子丰;安娟;匡浩铭;...
期刊:
中国实验方剂学杂志 ,2022年28(9):29-35 ISSN:1005-9903
通讯作者:
Kuang, J.-J.
作者机构:
[匡浩铭; 沈琳玲; 安娟; 叶子丰] Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410208, China;[戎宽] Affiliated Hospital of Hunan Academy of Chinese Medicine, Changsha, 410000, China;[匡建军] Hunan Traditional Chinese Medical College, Hunan Academy of Chinese Medicine, Changsha, 410000, China
通讯机构:
[Kuang, J.-J.] H;Hunan Traditional Chinese Medical College, China
关键词:
骨质疏松;破骨细胞;金刚丸;p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK);c-Jun氨基末端激酶(JNK);白细胞介素-1(IL-1);绝经后骨质疏松症
摘要:
目的:探讨不同浓度金刚丸对骨质疏松症模型大鼠破骨细胞、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及白细胞介素-1(IL-1)表达的影响,根据实验结果分析金刚丸治疗骨质疏松症作用机制,同时筛选出金刚丸最佳用药浓度。方法:将56只SPF级大鼠随机分为空白组(n=8)、假手术组(n=8)、模型组(n=8)、金刚丸低剂量组(n=8)、金刚丸中剂量组(n=8)、金刚丸高剂量组(n=8)、戊酸雌二醇组(n=8)。金刚丸高、中、低剂量组分别以0.72、0.36、0.18 g·kg~(-1)·d~(-1)给予金刚丸蒸馏水溶液灌服;戊酸雌二醇组以0.009 g·kg~(-1)·d~(-1)灌服。模型组大鼠、空白组、假手术组给予3 mL生理盐水。给药12周后取样。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察破骨细胞数量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清JNK、p38 MAPK及IL-1含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测p38 MAPK、JNK mRNA表达水平。结果:TRAP染色结果显示,与模型组比较,雌二醇组及不同浓度的金刚丸溶液均可不同程度抑制破骨细胞的形成。ELISA检测结果显示,与空白组及假手术组比较,模型组大鼠血清中的p38 MAPK、JNK及炎性因子IL-1水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,金刚丸低、中、高剂量组及戊酸雌二醇组p38 MAPK、JNK及IL-1水平显著降低(P<0.01)。金刚丸高剂量组血清中JNK及IL-1含量低于雌二醇组(P<0.05)。Real-time PCR结果显示,与空白组比较,模型组股骨中p38 MAPK、JNK mRNA相对表达量显著增加(P<0.01),与模型组比较,戊酸雌二醇组、金刚丸高、中、低剂量组股骨中p38 MAPK、JNK mRNA相对表达量均显著降低(P<0.01)。结论:金刚丸可以抑制破骨细胞的形成,同时降低骨髓腔的直径,提高骨质量,降低炎性因子的产生,并影响MAPK信号通路代谢,降低p38 MAPK、JNK活性从而抑制破骨细胞的分化及增殖,调节骨代谢预防骨质疏松症。因此,金刚丸可能在维持骨骼健康,治疗骨质疏松方面具有应用的价值。
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茶组植物新资源元宝山茶的毒理学安全性评价
作者:
陈涛林;陈美丽;葛智文;廖寅平;杨雪梅;...
期刊:
南方农业学报 ,2022年53(2):299-313 ISSN:2095-1191
作者机构:
[陈涛林] 贵州大学茶学院,贵阳 550025;[陈涛林] 湖南农业大学茶学教育部重点实验室,长沙 410128;柳州市绿化建设发展中心,广西柳州 545001;[张征; 葛智文; 廖寅平] 柳州市农业技术推广中心,广西柳州 545003;融水县农业农村局,广西柳州 545300
关键词:
元宝山茶;茶组植物;毒理学安全性评价;茶多酚;半数致死剂量(LD_(50))
摘要:
【目的】评价茶组植物新资源元宝山茶(Camellia yungkiangensis var.Yuanbaoshanica)的饮用安全性,为该资源的高效开发利用提供科学依据。【方法】以元宝山茶资源的鲜叶固定样和红茶工艺样为材料,参照食品毒理学安全性评价程序,通过经口急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、Ames试验和慢性喂养(30 d)亚急性毒性试验对其毒理学安全性进行评价。【结果】元宝山茶具有较高的茶多酚、可溶性糖及可可碱含量,但咖啡碱和游离氨基酸含量相对较低。元宝山茶鲜叶固定样提取物对ICR小鼠的半数致死剂量(LD_(50))为5.123 g/kg,其红茶工艺样提取物对小鼠的LD_(50)为7.573 g/kg;元宝山茶(红茶工艺样提取物)各剂量组在添加S_9与不加S_9时均未导致测试菌株(TA97a、TA98、TA100和TA102)出现致突变作用,即Ames试验结果呈阴性;在5.00 g/kg剂量(相当于人体推荐食用量的144倍)条件下,元宝山茶(红茶工艺样提取物)对小鼠骨髓细胞无明显毒性作用,表明小鼠骨髓细胞微核试验结果呈阴性。按0.87、1.74和3.47 g/kg的剂量经口灌胃红茶工艺样提取物给SD大鼠30 d,试验期间各剂量组大鼠的精神状态、行为活动、摄水、粪便、尿液及各腔道分泌物等均未见异常,也无大鼠死亡;其体重增重、摄食量、食物利用率、血液指标、血清生化指标、脏器湿重及脏/体比值等除个别指标与阴性对照组相比差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)外,绝大部分指标均无明显的剂量-反应关系,且均在正常范围内波动;剖检观察及组织病理学检查也未发现元宝山茶对大鼠产生明显毒性意义的病理变化。【结论】元宝山茶属于典型的高茶多酚、高可溶性糖、高可可碱及低咖啡碱的特异性资源,且具有很高的饮用安全性,按食品毒理学安全性评价标准属于无毒级食品,作为代茶饮料植物具有广阔的应用前景。
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基于现代筋膜理论探究传统分层复式针刺手法
作者:
李里;谭朝坚;潘江;叶勇;陈成;...
期刊:
中国中医药信息杂志 ,2022年29(3):131-133 ISSN:1005-5304
作者机构:
湖南中医药大学第一附属医院;[张斯雅; 吴雅超] 湖南中医药大学;衡阳县中医医院;[丁正香] 湖南省中医药研究院附属医院;[叶勇; 潘江; 李里; 罗容; 陈成; 谭朝坚] 中医药大学第一附属医院
关键词:
分层治疗;筋膜;手法;针刺
摘要:
在众多分层治疗的传统复式针刺手法中,隐藏着古代先贤们的临床智慧,因此有必要揭示分层针刺治疗的必要性和科学性。本文尝试基于现代筋膜学,多角度探析分层治疗的传统复式手法的科学性,认为其手法得气的产生与对筋膜分层刺激有关,能有效治疗筋膜相关疾病,手法分层行针的机械力刺激对筋膜有很好的分层治疗作用。对各筋膜行分层治疗符合腧穴的动态性治疗。
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中文
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加味独活寄生合剂对兔膝骨关节炎软骨Wnt3a及β-catenin蛋白表达的影响
作者:
黄璐;谭旭仪;邝高艳;卢敏
期刊:
时珍国医国药 ,2022年33(09):2053-2055 ISSN:1008-0805
作者机构:
[卢敏; 邝高艳; 黄璐] 湖南中医药大学第一附属医院;[谭旭仪] 湖南省中医药研究院
关键词:
膝骨关节炎;软骨;细胞外因子3a;连环素蛋白
摘要:
目的 观察加味独活寄生合剂对兔膝骨关节炎软骨Wnt3a及β-catenin蛋白表达的影响。方法 在成功制备兔KOA模型后,80只白兔随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组和独活寄生组,各20只,独活寄生组给予加味独活寄生合剂灌胃,6.8ml/(kg·d),阳性对照组给予盐酸氨基葡萄糖胶囊,0.07g/(kg·d),正常对照组和模型对照组给予等剂量生理盐水灌胃,在实验干预前、干预第2、4、8周,Western Blot法检测Wnt3a及β-catenin蛋白表达。结果 HE染色发现独活寄生组关节软骨显微结构得到改善。与模型对照组比较,独活寄生组关节软骨Wnt3a及β-catenin蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 加味独活寄生合剂可调控KOA关节软骨Wnt3a及β-catenin蛋白表达,改善关节软骨显微结构,这可能是其治疗KOA的作用机制。
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中文
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黄芪甲苷对结肠炎小鼠的抑炎作用及对外周血Th17细胞比例的影响研究
作者:
徐胜艳;胡响当;杨宗亮;刘安;何永恒;...
期刊:
中国中药杂志 ,2022年47(2):469-475 ISSN:1001-5302
通讯作者:
Lu, H.-Y.
作者机构:
[杨宗亮; 徐胜艳; 鲁海燕; 胡响当] 湖南中医药大学第二附属医院肛肠科;[刘安] 湖南中医药大学研究生院;[何永恒] 湖南省中医药研究院附属医院肛肠科
通讯机构:
Anorectal Department, Second Affiliated Hospital of Hunan University of Chinese medicine, Changsha, China
关键词:
结肠炎;黄芪甲苷;Th17细胞
摘要:
探讨黄芪甲苷对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的抑炎作用及对外周血辅助性T细胞(Th17)比例的影响。采用2%葡聚糖硫酸钠(DSS)建立结肠炎小鼠模型,阳性对照组以及黄芪甲苷低、高剂量组小鼠分别灌胃相应药物,计算疾病活动指数(DAI),ELISA法检测血清白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)含量,HE染色法观察结肠组织病理学变化,流式细胞仪检测外周血Th17细胞/调节性T细胞(Treg)比例,蛋白印迹法检测叉头蛋白p3(Foxp3)、视黄酸相关孤儿核受体γt(ROR-γt)蛋白相对表达量。结果显示,正常小鼠结肠组织结构完整,杯状细胞未减少,腺体排列整齐,无黏膜糜烂、出血,无阳性细胞浸润;模型组小鼠结肠组织黏膜结构严重破坏,腺体排列紊乱或缺失,可见血管扩张、充血,大量炎性细胞浸润;各药物治疗组结肠组织病理损伤出现不同程度减轻。与正常组比较,模型组Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量升高,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量降低;与模型组比较,阳性对照组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷高剂量组DAI评分、组织病理学评分、Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量降低,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量升高;与阳性对照组比较,黄芪甲苷低剂量组DAI评分、组织病理学评分、Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量升高,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量降低;与黄芪甲苷低剂量组比较,黄芪甲苷高剂量组DAI评分、组织病理学评分、Th17细胞百分比、IL-17和TNF-α含量、ROR-γt蛋白相对表达量降低,TGF-β含量、Treg细胞百分比、Foxp3蛋白相对表达量升高;阳性对照组与黄芪甲苷高剂量组比较,各指标差异无统计学意义。结果表明,黄芪甲苷可抑制结肠炎小鼠的炎症反应,降低Th17细胞比例。
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基于知识图谱分析中药灭菌未来发展趋势
作者:
廖鑫;王适;蔡媛;李鹏辉;孙瑜;...
期刊:
辐射研究与辐射工艺学报 ,2022年40(6):29-39 ISSN:1000-3436
通讯作者:
Peng, Y.
作者机构:
湖南中医药大学 长沙 410208;湖南省中医药研究院 长沙 410006;湖南中医药大学第二附属医院 长沙 410005;[李鹏辉; 胥新元; 蔡媛; 彭艳梅] Hunan Academy of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410006, China;[孙瑜; 廖鑫] Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410208, China, Hunan Academy of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410006, China
通讯机构:
[Peng, Y.] H;Hunan Academy of Traditional Chinese MedicineChina
关键词:
中药;灭菌;知识图谱
摘要:
中药应用形式多样,有饮片、生粉入药、提取物、中成药等,如何把控外源微生物污染,保障中药的安全性和有效性,选择适宜的灭菌技术是关键。本文通过检索中国知网、万方、维普、Web of Science自2001-2021年已发表的中药灭菌文献,应用可视化分析软件VOSviewer与CiteSpace对近20年来中药灭菌方法的应用现状与趋势进行分析。经过筛选,本研究共纳入文献322篇,收录中药灭菌相关文献载文量第一的期刊为《机电信息》;作者合作网络分析发现,中药灭菌领域主要形成了中国食品药品检定研究院和广州市药品检验所等核心研究团队;文献关键词显示,中药灭菌研究主要集中在辐照、微波、制备工艺、有效成分、干燥、指纹图谱等方面。本研究还深入探讨了不同灭菌技术的优缺点及其适宜范围,结合中药灭菌未来发展趋势进行深入分析,以期为研究者选择合适的灭菌方法提供参考。为进一步统筹推进中药灭菌科学发展,笔者提出中药灭菌未来需要紧密结合技术、设备和政策,才能更快推进中药现代化发展。
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健脾消癌方通过PI3K/Akt信号通路抑制结肠癌血管生成的研究
作者:
王容容;王其美;田雪飞;柏正平;蒋益兰
期刊:
世界科学技术-中医药现代化 ,2022年24(2):502-512 ISSN:1674-3849
作者机构:
湖南省中医药研究院 长沙 410006;[田雪飞] 湖南中医药大学中西医结合学院 长沙 410028;[王其美; 蒋益兰; 王容容; 柏正平] 湖南省中医药研究院
关键词:
结直肠癌;健脾消癌方;PI3K/Akt信号通路;血管内皮生长因子;血管生成
摘要:
目的 观察结肠癌HCT116细胞健脾消癌方的条件培养液对HUVEC细胞管腔形成的影响,从PI3K/Akt生物轴调控角度探讨其作用机制。方法 培养HCT116细胞,细胞设3组:对照组,健脾消癌方组(加入15%健脾消癌方含药血清)及人参皂苷Rg3组;制备HCT116细胞健脾消癌方条件培养液(分组及制备方法见实验方法),用条件培养液干预HUVEC(脐静脉内皮细胞,Human Umbilical Vein Endothelial Cells),Matrigel基质胶法检测HCT116细胞健脾消癌方条件培养液对HUVEC小管形成的影响。随后采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组HCT116细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、VEGF(血管内皮生长因子,Vascular endothelial growth factor)蛋白表达。最后在结肠癌HCT116荷瘤小鼠中验证健脾消癌方对肿瘤生长速度的影响,并经瘤组织VEGF蛋白表达、CD31免疫组化染色检测肿瘤内血管生成情况。结果 模型组HUVEC细胞管腔形成较空白血清组显著增加(P<0.05);健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组较模型组HUVEC细胞管腔形成显著减少(P<0.01)。p-Akt和VEGF蛋白表达水平模型组高于空白血清组(P<0.05),健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组显著低于模型组(P<0.01);PI3K、Akt蛋白表达量组间差异无统计学意义。与对照组比较,模型组荷瘤小鼠肿瘤体积显著性增大,瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积显著性增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组荷瘤小鼠肿瘤体积显著减小,瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 健脾消癌方可抑制肿瘤的血管生成和生长,其作用机制可能与PI3K/Akt生物轴调控VEGF表达有关。
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治伤巴布剂对大鼠急性软组织损伤模型P38MAPK、AKT信号通路的影响
作者:
刘永利;谢芳;戴斌玉;李树冬;郭玉星;...
期刊:
世界科学技术-中医药现代化 ,2022年24(2):694-704 ISSN:1674-3849
作者机构:
[刘永利] 海口市中医医院骨伤科;[谢芳; 邵先舫; 李前; 李树冬; 戴斌玉] 湖南中医药大学附属常德医院骨伤科;[郭玉星] 湖南省中医药研究院附属医院骨伤科
关键词:
治伤巴布剂;软组织;信号通路;损伤
摘要:
目的 观察治伤巴布剂对急性软组织损伤(acute soft tissue injury,ASTI)模型p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、丝/苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路的影响,探讨治伤巴布剂干预ASTI的可能作用机制.方法 将40只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、治伤巴布剂组、p38MAPK信号通路抑制剂组、AKT信号通路抑制剂组,每组8只.除正常对照组外,其余四组均予以左侧后肢小腿ASTI造模.造模成功后,治伤巴布剂组于标记部位立即予治伤巴布剂(修剪成1.5×3cm大小)外敷,并用胶布固定;其余四组均予等剂量赋形剂(修剪成1.5×3 cm大小)外敷处理,胶布固定;持续外敷,共持续24 hop38MAPK信号通路抑制剂组在造模前30min予腹腔注射p38MAPK信号通路抑制剂SB203580(400 μg/kg/天)1次;AKT信号通路抑制剂组在造模前30 min予腹腔注射AKT信号通路抑制剂perifosine(20 mg/kg/天)1次.分别于0(造模前)、2h、4h、8h、12h、24h测量受伤小腿肌肉处的周长,并计算肌肉肿胀率(muscle swelling rate,MSR).24 h药物干预结束后,采用颈椎脱臼法处死大鼠.后将左侧后肢小腿损伤中心部位进行取材,分成三份.一部分用于观察组织病理学形态变化;一部分用于逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)p65 mRNA、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA、白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达水平;剩下部分用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测骨骼肌组织TNF-α、IL-1β含量水平及蛋白质免疫印迹(Western-blot)法测定p38MAPK、AKT、NF-κB p65、核因子抑制蛋白α(inhibitor kappa B alpha,IκBα)表达水平.结果 与正常对照组相比,模型对照组MSR显著增加(P<0.01);病理形态学上,骨骼肌组织可见大面积肌细胞排列紊乱,肌细胞变性坏死,间质内可见红细胞聚集及大量炎症细胞浸润;骨骼肌组织TNF-α、IL-1β含量水平显著升高(P<0.01);磷酸化p38MAPK(p-p38)/总p38MAPK(t-p38),磷酸化-AKT(p-AKT)/总-AKT(t-AKT)明显升高(P<0.01),NF-κB p65及 NF-κB p65mRNA表达水平明显升高(P<0.01).与模型对照组相比,治伤巴布剂组MSR在治疗第8 h、12 h、24 h显著下降(P<0.01),且在治疗第24h,其MSR较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组下降更明显(P<0.05);病理学评分显著下降(P<0.01),且较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组下降更显著(P<0.05);骨骼肌组织TNF-α、IL-1β含量水平明显下降(P<0.01),且较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组更显著(P<0.05);p-p38/t-p38及 p-AKT/t-AKT 明显下降(P<0.01),NF-κB p65及 NF-κB p65 mRNA 表达水平显著下降(P<0.01),且较p38MAPK、AKT信号通路抑制剂组在降低NF-κB p65及NF-κB p65 mRNA相对表达值方面更显著(P<0.01).结论 治伤巴布剂可能同时对p38MAPK、AKT信号通路产生了一定的抑制作用,引起NF-κB活性下调,NF-κB p65蛋白的表达下调,进而引起骨骼肌组织TNF-α、IL-1β炎性细胞因子含量水平下调,减轻ASTI炎症反应,从而改善ASTI.
语种:
中文
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基于网络药理学研究六味地黄丸治疗阿尔茨海默病作用机制
作者:
张运辉;周小青;伍大华;杨梦琳;郑彩杏;...
期刊:
中国现代应用药学 ,2022年39(2):154-160 ISSN:1007-7693
通讯作者:
Zhou, X.
作者机构:
[杨梦琳; 张运辉] 重庆三峡医药高等专科学校,重庆404120;[杨梦琳; 伍大华; 张运辉] 湖南中医药大学,长沙410208;[伍大华] 湖南省中医药研究院附属医院,长沙410006;[郑彩杏; 周小青; 童天昊] 湖南中医药大学
通讯机构:
[Zhou, X.] H;Hunan University of Chinese MedicineChina
关键词:
六味地黄丸;阿尔茨海默病;网络药理学;作用机制
摘要:
目的基于网络药理学探讨六味地黄丸治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法从TCMSP数据库筛选六味地黄丸治疗AD的活性成分,并构建药物-靶标网络、蛋白与蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,运用生物信息学分析方法进行GO分析、KEGG通路富集分析和PPI网络分析。采用荧光实时定量PCR对网络药理学主要分析结果进行验证。结果分析结果表明,六味地黄丸主要关联AD的β淀粉样蛋白聚集、Tau蛋白的磷酸化、细胞凋亡、氧化应激反应、炎症反应、自噬、胰岛素代谢等;体外实验提示,六味地黄丸参与调控APP介导的β淀粉样蛋白聚集,GSK-3β介导的Tau蛋白磷酸化,GNB1介导的炎症反应,Caspase-3介导的细胞凋亡,MAOB介导的氧化应激反应,mTOR介导的自噬,以及INSR介导的胰岛素代谢等通路。结论六味地黄丸治疗AD具有多成分、多靶点的特点,可为进一步研究其作用机制提供依据。
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中文
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高血压和衰老为主要危险因素的脑小血管病动物模型的建立
作者:
刘彤彤;张熙;王枭冶;方锐;葛金文;...
期刊:
中国实验动物学报 ,2022年30(7):918-926 ISSN:1005-4847
作者机构:
[孟盼; 刘彤彤] 湖南中医药大学科技创新中心;[张熙; 王枭冶] 湖南省脑科医院;[方锐] 湖南中医药大学中西医结合学院;[葛金文] 邵阳学院
关键词:
脑小血管病;高血压;衰老;D-半乳糖
摘要:
目的以SHR大鼠为研究对象,采用不同时间的D-半乳糖诱导的方法构建以高血压和衰老为主要危险因素的脑小血管病动物模型。方法18只SHR大鼠按体重随机分为3组:D-半乳糖150 mg/(kg·d) + 4周组、D-半乳糖150 mg/(kg·d) + 8周组、D-半乳糖150 mg/(kg·d) + 12周组,每组6只。另设6只WKY大鼠为空白对照组。造模期间,每周采用无创血压计监测大鼠血压变化;造模结束后,采用Morris水迷宫检测大鼠认知功能变化;称重法检测大鼠脑指数、胸腺指数、脾指数和肝指数;ELISA法检测大鼠血清中T-SOD、GSH-Px、MDA、NEFL含量和CALB/SALB指数;HE和LFB染色观察大鼠脑组织前额叶皮质细胞形态、脑室微出血以及胼胝体髓鞘损伤情况。结果与WKY组比较,随着D-半乳糖注射时间的增加,各组SHR大鼠血压升高;学习记忆能力明显下降;脑、胸腺、脾、肝各脏器指数降低;血清中T-SOD、GSH-Px含量减少,MDA、NEFL水平和CALB/SALB指数上升;脑组织前额叶皮质细胞病变数量增多,血管周围间隙和三脑室背侧微出血量增大以及胼胝体髓鞘空泡化加重。其中以D-半乳糖150 mg/(kg·d)注射12周组大鼠的病理生理变化最显著。结论SHR大鼠注射D-半乳糖150 mg/(kg·d) 12周可复制与人类CSVD疾病状态接近的CSVD动物模型。
语种:
中文
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人参配伍贯叶金丝桃对抑郁症模型大鼠行为学及海马组织GR、SGK1表达的影响
作者:
雷昌;凌成利;黄丹;邹蔓姝;赵洪庆;...
期刊:
中国中医药信息杂志 ,2022年29(10):73-78 ISSN:1005-5304
作者机构:
[张秀丽; 赵洪庆; 向韵; 刘建军; 黄丹; 雷昌; 王宇红; 邹蔓姝; 苏捷] 湖南中医药大学科技创新中心,中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410208;湖南省中医药研究院,湖南 长沙 410208;[凌成利] 湖南省中医药研究院
关键词:
抑郁症;人参;贯叶金丝桃;基线等比增减设计;海马;糖皮质激素受体;血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1
摘要:
目的 筛选人参-贯叶金丝桃发挥抗抑郁功效的最佳配伍比例,并探讨其抗抑郁的可能作用机制.方法 采用基线等比增减设计法将80只SD大鼠分为空白组、模型组、阳性药组、人参组、贯叶金丝桃组及人参-贯叶金丝桃不同配比组,共10组,每组8只.除空白组外,其余9组采用慢性不可预知性温和应激法制备抑郁症大鼠模型.采用旷场实验和水迷宫实验检测大鼠行为学变化,ELISA检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量,优选人参-贯叶金丝桃最佳配比;Western blot检测最佳配比组大鼠海马组织糖皮质激素受体(GR)、血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠旷场实验水平穿格次数和垂直活动次数明显减少(P<0.01),水迷宫实验逃避潜伏期明显延长(P<0.01),目标象限停留时间明显缩短(P<0.01),血清IL-6、TNF-α、ACTH、CORT含量明显增加(P<0.01),海马组织GR蛋白表达明显降低(P<0.01),SGK1蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,人参、贯叶金丝桃不同配比能增加大鼠旷场实验水平穿格次数和垂直活动次数,缩短水迷宫实验逃避潜伏期,减少血清IL-6、TNF-α、ACTH、CORT含量,其中以人参-贯叶金丝桃1:1配比效果最佳(P<0.05,P<0.01),且最佳配比能明显升高大鼠海马组织GR蛋白表达(P<0.01),降低SGK1蛋白表达(P<0.01).结论 人参配伍贯叶金丝桃能改善抑郁症模型大鼠抑郁样行为,且配比为1:1时作用最显著,其抗抑郁作用可能与调控海马GR/SGK1信号通路相关.
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中文
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肌筋膜理论指导下的针刺髂腰肌治疗腰椎间盘突出症肾虚证临床研究
作者:
叶子丰;沈琳玲;杨惠;匡浩铭;匡建军;...
期刊:
中国中医药信息杂志 ,2022年29(8):123-128 ISSN:1005-5304
作者机构:
[叶子丰; 匡浩铭; 沈琳玲] 湖南中医药大学;[杨惠] 湖南中医药大学第一附属医院;[匡建军; 戎宽; 仇湘中] 湖南省中医药研究院附属医院
关键词:
针灸;髂腰肌;腰椎间盘突出症;肾虚证;临床研究
摘要:
目的 观察肌筋膜理论指导下的针刺髂腰肌对腰椎间盘突出症肾虚证的临床疗效。方法 采用随机数字表法将86例患者分为试验组和对照组各43例。对照组于肾俞、大肠俞、委中、L1~L5夹脊穴、患侧环跳等行常规针刺,试验组对髂腰肌进行针刺,均隔日1次,每周3次,连续治疗4周。观察2组临床疗效,比较2组治疗前后视觉模拟评分法(VAS)评分、日本骨科学会腰椎功能量表(JOA)评分、功能障碍指数评分表(ODI)、中医证候评分,并监测不良反应。结果 2组均无脱落病例。试验组总有效率为88.37%(38/43),对照组为79.07%(34/43),试验组临床疗效优于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后VAS评分、ODI评分、中医证候评分降低,JOA评分升高(P<0.05);2组治疗后比较,试验组VAS评分、ODI评分低于对照组(P<0.05),试验组JOA评分高于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后中医各项评分明显降低(P<0.05);2组治疗后比较,试验组腰膝酸软、渴不欲饮、倦怠乏力、少寐多梦、面色?白、舌红少津、脉沉细评分均低于对照组(P<0.05)。结论 针刺髂腰肌可有效缓解腰椎间盘突出症肾虚证患者疼痛症状,改善患者活动障碍、精神状况,疗效较常规针灸治疗更佳。
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中文
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六味地黄丸指纹图谱和抗氧化活性的"谱-效"关系研究
作者:
易子漾;陈林;郝婧;何丹;梁昊;...
期刊:
中华中医药杂志 ,2022年37(7):4096-4101 ISSN:1673-1727
作者机构:
[戎宽; 黄建华; 易子漾; 郝婧; 张水寒; 陈林; 何丹] 湖南中医药大学湖南省中医药研究院;[梁昊; 喻嵘] 湖南中医药大学中医学院
关键词:
六味地黄丸;指纹图谱;抗氧化活性;化学计量学;“谱-效”相关
摘要:
目的:建立不同厂家六味地黄丸(LWDH) HPLC指纹图谱与抗氧化活性间的"谱-效"关系,为其质量控制提供依据。方法:采用HPLC多波长检测方法建立LWDH指纹图谱,进一步采用DPPH白由基清除率来检测抗氧化活性,并通过主成分分析、系统聚类分析、"谱-效"相关性等化学计量学方法对不同厂家的LWDH成分进行鉴别和比较。结果:HPLC指纹图谱共指认14个共有峰,结合抗氧化活性建立谱效关系,其中北京同仁堂LWDH抗氧化活性高,而没食子酸和莫诺苷具有较显著的抗氧化活性相关系数,可作为质量控制成分结论:本方法简易、快速、准确,可为LWDH质量控制提供一定基础。
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中文
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基于STAT3信号通路探讨脑泰方抑制局灶性脑缺血后炎症反应的神经元保护作用
作者:
余清平;王建君;梅志刚;陈懿;王国佐;...
期刊:
中华中医药杂志 ,2022年37(12):7360-7364 ISSN:1673-1727
作者机构:
[余清平; 王建君; 陈懿; 廖君] 湖南中医药大学医学院;[王国佐; 梅志刚] 湖南中医药大学中西医结合学院;[葛金文] 湖南省中医药研究院
关键词:
脑泰方;脑缺血;信号转导和转录激活因子3;白介素6;肿瘤坏死因子α;神经元保护作用;机制
摘要:
目的:探讨脑泰方(NTF)抑制局灶性脑缺血后炎症因子表达机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、NTF低剂量组(3 g/kg) 、 NTF中剂量组(9 g/kg)、NTF高剂量组(27 g/kg)各组大鼠预处理灌胃给药连续3d,大脑中动脉闭塞(MCAO)模型制备术后灌胃给药1 d,取材。 HE染色检测病理组织形态;免疫组织化学染色检测各组大脑皮质信号转导和转录激活因子3磷酸化(p-STAT3)、白介素-6(IL-6)蛋白的表达; Western hlot检测p-STAT3、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达。结果:NTF中、高剂量组中皮质缺血区椎体细胞胞体皱缩和核同缩较模型组少。与模型组比较,NTF中、高剂量组大鼠大脑皮质中IL-6和p-STAT3均表达水平显著下调(P<0.05); NTF中、高剂量组p-STAT3蛋白表达水平显著降低(P<0.05, P<0.01), NTF高剂量组IL-6蛋白表达水平显著下降(P<0.01), NTF中、高剂量组TNF-α蛋白表达水平显著降低(P<0.01) 。结论:脑泰方可以通过抑制STAT3蛋白磷酸化降低脑缺血后炎症反应,起到神经元保护作用。
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补阳还五汤调控Caveolin1-VEGF信号对脑缺血小鼠血管新生的影响
作者:
刘柏炎;陈博威;周胜强;易健;陈雪梅
期刊:
中华中医药杂志 ,2022年37(12):7350-7354 ISSN:1673-1727
作者机构:
[刘柏炎] 湖南中医药大学,,湖南省中医药研究院;[陈博威; 陈雪梅; 易健] 湖南中医药大学;[周胜强] 湖南省中医药研究院
关键词:
血管新生;小窝蛋白1;血管内皮生长因子;脑缺血;补阳还五汤
摘要:
目的:从小窝蛋白1(Caveolin1)-血管内皮生长因子(VEGF)信号探讨补阳还五汤对脑缺血小鼠血管新生的影响。方法:将野生型(WT)和Caveolin1敲除(KO)小鼠随机分为模型组(WTM 、 KOM)和补阳还五汤组(WTB、 KOB),每组12只,大脑中动脉闭塞法复制脑缺血模型,术后7、14 d检测小鼠神经功能情况,免疫组化检测血管性血友病因子(vWF)、VEGF及其受体(VEGFR2)表达,RT-qPCR检测VEGF、VEGFR2 mRNA表达。结果:Caveolin1敲除可加重脑缺血小鼠神经功能缺损,抑制血管新生,7、14 d与WTM比较差异有统计学意义(P<0.05);补阳还五汤治疗可减轻WTM和KOM小鼠神经功能缺损、增加血管新生,差异有统计学意义(P<0.05) 。 Caveolin1敲除可减少VEGF与VEGFR2阳性细胞数和mRNA表达,7、14 d与WTM比较差异有统计学意义(P<0.05);补阳还五汤可增加VEGF与VEGFR2阳性细胞数和mRNA表达,WTB与WTM、KOB与KOM之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Caveolin1通过VEGF信号调控脑缺血后血管新生,该通路可能是补阳还五汤抗脑缺血损伤的机制之一。
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培养条件及人参对嗜酸乳杆菌外膜囊泡的影响
作者:
李星枚;李勇敏;罗吉;吕元;刘芳;...
期刊:
时珍国医国药 ,2022年33(4):824-826 ISSN:1008-0805
作者机构:
[李星枚] 湖南中医药大学;[谭小宁; 罗吉; 吕元; 李勇敏; 刘芳] 湖南省中医药研究院附属医院
关键词:
嗜酸乳杆菌;外膜囊泡;人参;提取;鉴定
摘要:
目的探究在不同培养条件及人参对嗜酸乳杆菌分泌的外膜囊泡(OMVs)的影响。方法在厌氧培养、需氧培养环境及海博、OXOID两种不同厂家培养基的培养条件下,及人参与嗜酸乳杆菌共培养中,提取其分泌的OMVs。用透射电镜观察OMVs的大小、形态;用BCA蛋白含量测定法测定其蛋白含量;SDS-PAGE测定其蛋白分布。结果经电镜鉴定,嗜酸乳杆菌OMVs为20 ~ 200nm的双层囊泡状结构;在厌氧、需氧培养条件下,嗜酸乳杆菌OMVs的蛋白含量分别为0.63 mg/mL、0.45mg/mL;在海博、OXOID两种不同厂家培养基培养的嗜酸乳杆菌OMVs蛋白含量分别为0.92mg/mL、0.45 mg/mL;在有无人参影响下OMVs、Gin-OMVs蛋白含量分别为0.45mg/mL、0.28mg/mL;厌氧、需氧培养的嗜酸乳杆菌OMVs在40 ~55KD均有两条条带,而厌氧培养的OMVs在30 ~40KD另有一条条带;海博、OXOID两种不同厂家培养基培养的嗜酸乳杆菌OMVs蛋白条带无明显差别;OMVs与Gin-OMVs相比Gin-OMVs的条带较浅,且40 ~55KD之间只有一条条带。结论嗜酸乳杆菌在不同培养条件下所分泌的OMVs是有区别的,可选出最佳提取参数;人参可能能够抑制嗜酸乳杆菌分泌OMVs及改变其内含蛋白,此实验可供后续嗜酸乳杆菌OMVs功能研究提供一定的研究价值。
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