作者： 蔡嘉洛;朱贻霖;谢舒平;陈林;欧阳琳;...

期刊： 中草药,2016年47(15):2727-2733 ISSN：0253-2670

通讯作者： Yi, G.-Q.

作者机构： [蔡嘉洛; 欧阳琳] The First Hospital of Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410000, China;[刘湘丹; 张亚丽; 易刚强; 朱贻霖; 童巧珍; 陈林] Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410208, China;[刘峰] Hunan Academy of Agricultural Sciences, Changsha, 410000, China;[谢舒平] College of pharmacy Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing, 210000, China

通讯机构： [Yi, G.-Q.] H;Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, China

关键词： 灰毡毛忍冬;内参基因;蕾期延长;时空表达特性

摘要： 目的筛选灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides基因表达分析的内参基因,研究其Mads-box基因家族AGL15基因(LmAGL15)的时空表达特性。方法克隆灰毡毛忍冬内参基因18 S rRNA、Ubiquilin、Actin和Efl-β的基因片段,评价了4个基因在不同部位叶、茎和花蕾,以及4个基因在灰毡毛忍冬生长不同时期的稳定性,筛选内参基因,分析LmAGL15基因的时空表达特性。结果18 S rRNA表达最稳定,适宜作为内参基因,叶片、茎的LmAGL15基因相对表达量较低,花蕾相对表达量较高。花蕾不同发育时期,LmAGL15的相对表达量呈现逐渐降低的变化,20 d后LmAGL15的相对表达量最低,然后依次是花蕾初期(15 d)、青绿色花蕾期(10 d)、绿白色花蕾期(5 d)。结论18 S rRNA是适宜的内参基因。叶片、茎和花蕾中,LmAGL15的相对表达量差异明显。花蕾发育不同时期,LmAGL15的相对表达量呈逐渐降低的变化,与花蕾开放变化规律相似。

语种： 中文

作者： 童巧珍;高昱;刘平安;蔡嘉洛;张亚利;...

期刊： 江苏农业科学,2016年44(1):56-60 ISSN：1002-1302

作者机构： [蔡嘉洛; 易刚强; 樊悦; 张亚利; 童巧珍; 刘平安; 高昱] 湖南中医药大学

关键词： 湖南省;百合;核心种质;遗传多样性;种质资源

摘要： 利用相关序列扩增多态性(SRAP)标记技术,以45份初级种质代表的87份湘产百合种质为材料,通过PopGene32、NTSYS-PC(Version 2.1)等软件筛选湘产百合核心种质.结果表明:共获得多态位点218个,物种水平上多态性比例78.42％;通过对SRAP信息进行遗传多样性分析,使用逐步聚类取样法和分层抽样法筛选出15份核心种质,占收集资源总数的17.2％;t检验表明,核心种质的有效等位基因数、Nei's遗传多样性指数、Shannon's信息指数在0.05水平上与初始种质差异不显著,说明核心种质能很好地代替初始种质.

语种： 中文

作者： 张亚利;谢玲玲;欧阳娴;樊悦;罗娟;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2016年36(7):11-19 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学药学院;湖南省农业科学院西瓜甜瓜研究所;[欧阳娴; 刘峰] 湖南省农业科学院蔬菜研究所;[谢玲玲] 湖南省农业科学院;[樊悦; 张亚利; 童巧珍; 罗娟] 湖南中医药大学

关键词： 辣椒;VQ基因家族;鉴定;低温胁迫表达分析

摘要： 目的从辣椒(Capsicum annuum L.)全基因组中鉴定VQ基因,并进行基因结构、基因进化、染色体定位以及组织表达和低温诱导表达分析。方法利用辣椒基因组数据库,通过生物信息学方法,鉴定辣椒基因(Ca VQ)家族成员;利用MEME、GSDS 2.0、DNAMAN8、Map Inspect等软件进行基因结构及染色体定位分析;采用MEGA6.0软件进行系统进化树分析;利用RNA-seq数据及q RT-PCR的方法进行辣椒组织表达模式和低温胁迫分析。结果辣椒全基因组中含有29个Ca VQ基因;Ca VQ基因结构相对简单,不均匀地分布在辣椒各染色体上;Ca VQ基因家族分为2组(GroupⅠ和GroupⅡ)及6个亚组(GroupⅠa、GroupⅠb、GroupⅠc、GroupⅡa、GroupⅡb和GroupⅡc);不同组织中Ca VQ基因的表达量具有一定差异,低温胁迫可抑制或激活部分Ca VQ基因表达量。结论 Ca VQ基因家族包括29个成员,分为2组,6个亚组,分布于10条染色体上,其组织表达模式及基因响应具有多样性。

语种： 中文

作者： 刘湘丹;蔡嘉洛;邹君华;郭婷;刘平安;...

期刊： 中医药导报,2016年22(3):39-41 ISSN：1672-951X

作者机构： [刘湘丹; 蔡嘉洛; 易刚强; 邹君华; 张亚利; 郭婷; 张聪子; 刘平安; 高昱] 湖南中医药大学

关键词： 吴茱萸碱;吴茱萸次碱;柠檬苦素;对比分析

摘要： 目的：通过建立的高效液相色谱法对吴茱萸及其炮制品中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素3个指标性成分含量进行测定,并进行对比分析。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱Agi Lent C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：乙腈-水（55：45）;流速：1 m L·min~（-1）;检测波长：225 nm;柱温：25℃。结果：吴茱萸炮制品与生品相比较,3个指标性成分含量均下降,其中柠檬苦素含量下降较多。结论：吴茱萸炮制后对吴茱萸碱、吴茱萸次碱含量影响不大,对柠檬苦素含量影响较大。

语种： 中文

作者： 易刚强;蔡嘉洛;朱贻霖;陈林;樊悦;...

期刊： 中草药,2016年47(4):640-647 ISSN：0253-2670

通讯作者： Tong, Q.-Z.

作者机构： [易刚强; 欧阳琳] The First Hospital of Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410000, China;[张亚丽; 蔡嘉洛; 樊悦; 陈林; 朱贻霖; 刘湘丹; 童巧珍] Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410208, China;[刘峰] Hunan Academy of Agricultural Sciences, Changsha, 410000, China

通讯机构： [Tong, Q.-Z.] H;Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, China

关键词： 灰毡毛忍冬;蕾期延长;基因克隆;生物信息学分析;基因表达

摘要： 目的基于前期对灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides转录组测序结果,从灰毡毛忍冬RNa中克隆灰毡毛忍冬MADS-box基因家族蕾期延长相关基因AGL15,并对其进行生物信息学及表达分析。方法对灰毡毛忍冬总RNA进行反转录酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增反应(rapid amplification of cDNA ends,RACE),获得完整的开放阅读框(ORF)。运用生物信息学的方法对该序列进行同源性分析和相似性比较,预测编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析。运用半定量PCR测得该基因在灰毡毛忍冬不同部位的表达情况。结果获得AGL15基因,ORF长795 bp,编码264个氨基酸,与葡萄Vitis vinifera中MADS-box基因家族AGL15基因相似性最高,且包含MADS和K-box的保守序列。AGL15蛋白无跨膜区域,定位于细胞质中,在灰毡毛忍冬各部位均有表达。结论首次从灰毡毛忍冬中克隆得到可能控制蕾期延长的基因,分析了其在灰毡毛忍冬不同部位表达差异性,为灰毡毛忍冬蕾期延长研究提供参考。

语种： 中文

作者： 刘湘丹;王朝晖;徐玉琴;周日宝;童巧珍;...

期刊： 中医药导报,2015年21(15):90-93 ISSN：1672-951X

作者机构： [刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 王朝晖; 黄嘉琪; 童巧珍] 湖南中医药大学

关键词： 重楼属;资源分布与生态环境;化学成分与药理作用;内生菌;栽培技术和组织培养

摘要： 对重楼属植物资源分布、生长生态环境、化学成分、药理作用、内生菌、栽培技术和组织培养相关研究进行了综述，其中重楼的化学成分、药理作用等方面的研究已日臻成熟，结合相关组织培养研究基础可知重楼内生菌、药材毒性及组织培养等方面仍有较大的研究空间。

语种： 中文

作者： 蔡嘉洛;易刚强;高昱;张亚利;童巧珍;...

期刊： 中南药学,2015年13(1):71-74 ISSN：1672-2981

作者机构： [刘湘丹; 蔡嘉洛; 易刚强; 张亚利; 童巧珍; 高昱] 湖南中医药大学

关键词： 山银花;绿原酸;木犀草苷;加工方法;高效液相色谱法

摘要： 目的 建立高效液相色谱法对不同加工方法山银花药材中绿原酸、木犀草苷2个指标性成分进行含量测定,确定山银花最佳加工方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱:AgiLent C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.4％冰醋酸,梯度洗脱;流速:1 mL·min-1;检测波长:350 nm;柱温:25℃.结果 不同加工方法山银花中绿原酸、木犀草苷含量有明显变化,其中低温烘干与杀青烘干山银花中绿原酸、木犀草苷含量较高.结论 低温烘干法加工山银花外观质量最优,绿原酸、木犀草苷含量最高,应广泛推广应用.

语种： 中文

项目作者： 童巧珍

项目作者单位： 湖南中医药大学

项目批准号： 14K073

资助经费： 6万

立项时间： 2015

项目类别： 重点项目

项目级别： 厅局市级

项目来源： 湖南省教育厅创新平台开放基金

作者： 徐玉琴;王珊;刘湘丹;童巧珍;周日宝;...

期刊： 中医药导报,2015年21(24):31-34 ISSN：1672-951X

作者机构： [刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 童巧珍; 孙梦姗; 王珊] 湖南中医药大学

关键词： 灰毡毛忍冬;花蕾;总RNA提取;改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法

摘要： 目的：探讨灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取的有效方法。方法：采用SDS法、Trizol法、普通试剂盒法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法提取灰毡毛忍冬花蕾总RNA并比较其效果。结果：SDS法、Trizol法和普通试剂盒法均不适用于本样品总RNA的提取;改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法均能有效去除蛋白质、多糖多酚及DNA,OD260/280为1.86-2.00,OD260/230为1.96-2.63,电泳条带清晰,RNA完整性好,且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带。但以多糖多酚试剂盒法提取效果最佳。结论：改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法均适合灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取,完全满足后续RT-PCR等分子生物学研究。

语种： 中文

作者： 刘湘丹;高昱;张亚利;蔡嘉洛;童巧珍;...

期刊： 中国药房,2015年(19):2628-2631 ISSN：1001-0408

作者机构： 湖南中医药大学药学院,长沙,410208;[刘湘丹; 蔡嘉洛; 张亚利; 童巧珍; 张聪子; 高昱] 湖南中医药大学

关键词： 蛇莓;种质资源;随机扩增多态性脱氧核糖核酸;遗传多样性;聚类分析;聚合酶链反应

摘要： 目的:研究湘产蛇莓种质资源的遗传多样性。方法:建立不同地理分布的蛇莓种质资源随机扩增多态性DNA（RAPD）反应体系,RAPD-聚合酶链反应（PCR）法检测湘产24组蛇莓样本（21个野生品,3个栽培品）,琼脂糖凝胶电泳分析结果,计算等位基因数（Na）、有效等位基因数（Ne）、多态性位点百分比（PPB）、Nei’s基因多样性指数（H）、Shannon’s信息指数（I）。结果:筛选出多态性引物14条,共扩增出90条电泳谱带,其中多态带为81条,Na为1.900 0,Ne为1.540 1,PPB为90.0%,H为0.312 8,I为0.467 5。结论:湘产蛇莓各区域样本间遗传多样性丰富,人工栽培品与野生品之间存在遗传背景上的差异,聚类结果与地理分布表现出明显相关性。

语种： 中文

作者： 童巧珍;蔡嘉洛;邹君华;易刚强;郭婷;...

期刊： 中医药导报,2015年21(17):34-35,38 ISSN：1672-951X

作者机构： [蔡嘉洛; 易刚强; 邹君华; 陈林; 张亚利; 郭婷; 童巧珍; 刘平安; 高昱] 湖南中医药大学

关键词： 吴茱萸碱;吴茱萸次碱;柠檬苦素;采收期;HPLC法

摘要： 目的：建立同时测定疏毛吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素的含量的方法以及分析含量动态变化,为合理采收提供科学依据。方法：采用HPLC法,色谱柱：Agi Lent C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：乙腈-水（55：45）;流速：1 m L·min-1;检测波长：225 nm;柱温：25℃。结果：疏毛吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量在7月底即果实呈黄绿色未开裂前最高,柠檬苦素含量从6月初开始逐渐递减。结论：疏毛吴茱萸的最佳采收期为果实呈黄绿色未开裂前。

语种： 中文

作者： 张武;刘志军;童巧珍;常峥

期刊： 安徽中医药大学学报,2015年34(2):26-29 ISSN：2095-7246

作者机构： [张武] 湖南中医药大学;[常峥; 童巧珍; 刘志军] 湖南中医药大学附属常德医院

关键词： 绝经后骨质疏松症;益肾蠲痛口服液;骨康口服液;腰背痛;骨密度;脆性骨折

摘要： 目的 观察益肾蠲痛口服液治疗肾阳虚型绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的临床疗效.方法 将120例肾阳虚型PMOP患者随机分为治疗组和对照组,每组60例.两组患者均口服钙尔奇,治疗组患者加服益肾蠲痛口服液,对照组患者加服骨康口服液,疗程均为12个月,随访24个月.治疗前后及随访时,分别采用视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)评价腰背疼痛,采用双能X线检测骨密度(bone mineral density,BMD);并观察两组中医证候疗效及脆性骨折发生情况.结果 治疗后,两组VAS评分均较治疗前显著降低(P＜0.01);腰椎、股骨颈、Ward三角BMD均较治疗前显著上升(P＜0.01);随访时,治疗组VAS下降值及腰椎(L2-4)、股骨颈、Ward三角BMD升高值均显著大于对照组(P＜0.01).两组中医证候疗效及脆性骨折复发率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 益肾蠲痛口服液可减轻PMOP患者腰背疼痛,提高BMD,改善中医症状,防止脆性骨折复发,在减轻腰背疼痛和提高BMD方面较对照药具有明显优势.

语种： 中文

作者： 刘湘丹;徐玉琴;冯懿卉;周日宝;王朝晖;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2015年35(9):33-36 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学药学院;[石国强] 益阳广播电视大学;[刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 王朝晖; 童巧珍; 冯懿卉] 湖南中医药大学

关键词： 灰毡毛忍冬;灰毡毛忍冬变异株;忍冬;叶;显微特征

摘要： 目的为灰毡毛忍冬及其变异株、忍冬的鉴别和种质选育资源的开发利用提供依据。方法采用性状鉴别和显微鉴别的方法从叶片外部形态和内部构造进行对比研究,探究灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶的异同点。结果灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶在外部形态（叶形、叶大小）和内部构造（毛茸、气孔指数等）均存在差异,其中灰毡毛忍冬与其变异株间差异相对较小,灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬差异较大。结论灰毡毛忍冬、灰毡毛忍冬变异株、忍冬叶外部形态和内部显微特征存在差异,可为三者鉴别提供参考。

语种： 中文

作者： 刘湘丹;徐玉琴;王珊;童巧珍;周日宝

期刊： 湖南中医药大学学报,2015年35(12):60-63 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208;[刘湘丹; 徐玉琴; 周日宝; 童巧珍; 王珊] 湖南中医药大学

关键词： 灰毡毛忍冬;基因全长克隆;总RNA;不同器官;提取方法

摘要： 目的获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法。方法以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果。结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅适用于叶总RNA的提取;改良CTAB法对茎总RNA提取效果最佳;而多糖多酚试剂盒法提取的花蕾总RNA质量高、完整性较好,且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带。结论 Trizol法最适于灰毡毛忍冬叶总RNA提取;改良CTAB法最适于茎总RNA提取;多糖多酚试剂盒法最适于花蕾总RNA提取;3种方法提取出来的总RNA均能满足灰毡毛忍冬中相关基因全长克隆及时空表达分析的要求。

语种： 中文

作者： 刘湘丹;周日宝;王朝晖;童巧珍;刘笑蓉;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2015年35(8):70-71 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学药学院,湖南长沙,410208;[刘湘丹; 周日宝; 王朝晖; 童巧珍; 刘笑蓉; 王智] 湖南中医药大学(湖南省中医药研究院)

关键词： 中药资源与开发专业;实践教学模式;教学改革

摘要： 中药资源是中医治病、中药制药、中医药产业健康发展的物质基础,是国家的重要战略资源.近年来,随着人类医疗和保健产业的快速发展及世界范围内“回归自然”热潮的兴起,现代医药业、美容和保健品等行业对中药的需求与日俱增,过度采挖或掠夺式开发导致资源逐年萎缩与资源有限性之间的矛盾日益加剧.开设中药资源与开发专业,培养实践动手能力强和综合素质高的相关专业人才,合理利用和开发中药资源,是我国医药卫生事业发展的迫切要求.

语种： 中文

作者： 刘平安;刘笑蓉;周日宝;刘湘丹;童巧珍;...

期刊： 中医药导报,2014年20(13):51-52,55 ISSN：1672-951X

作者机构： [刘湘丹; 刘笑蓉; 周日宝; 王朝晖; 童巧珍; 刘平安] 湖南中医药大学

关键词： 总黄酮;紫珠;正交试验法;超声提取法

摘要： 目的：运用超声提取法提高紫珠属植物粗提物中总黄酮的含量。方法：采用正交实验法,以总黄酮含量为指标优化提取工艺。结果：超声提取法总黄酮的吸光度大于回流提取法,各因素影响由大到小为乙醇浓度〉超声次数〉超声时间,提取最佳工艺为：加95%的乙醇,提取3次,每次1h。结论：该实验为确定紫珠总黄酮的提取方法,制备高含量紫珠制剂提供了一定的试验依据。

语种： 中文

作者： 高昱;易刚强;刘平安;邹君华;蔡嘉洛;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2014年34(12):13-18 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学;[邹君华] 平江县南江学区石浆中学;[高昱; 易刚强; 刘平安; 蔡嘉洛; 张亚利; 童巧珍] 湖南中医药大学(湖南省中医药研究院)

关键词： 百合;核心种质;相关序列扩增多态性;体系优化

摘要： 目的 确立适用于湘产百合核心种质库的相关序列扩增多态性(SRAP)反应体系.方法 根据构建核心种质库的需求,对实验步骤、评分规则进行针对性改良,通过Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶、模板5因素4水平的正交试验与单因素试验构建SRAP体系,并筛选出适用引物.结果 最佳反应体系(20 μL):Mg2+浓度2.5 mmol/L,dNTPs浓度0.20μmol/L,引物浓度0.20 μmol/L,Taq酶1.0 U,模板DNA 50 ng能获得明亮清晰的扩增条带;并由144对引物组合中筛选出32对产物稳定、多态性丰富的引物组合.结论 该体系具有较高的稳定性,并可提高引物使用率,满足百合核心种质构建对大信息量的需求,适用于湘产百合核心种质库的研究.

语种： 中文

作者： 童巧珍;黄政德;张聪子;郭婷;蔡嘉洛;...

期刊： 中医药导报,2014年20(4):55-57 ISSN：1672-951X

作者机构： [蔡嘉洛; 李凤娟; 郭婷; 童巧珍; 黄政德; 张聪子; 孙梦姗] 湖南中医药大学

关键词： 加味丹参饮;丹参酮ⅡA;丹酚酸B;含量测定

摘要： 目的:测定加味丹参饮中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量.方法:采用HPLC法,色谱柱:(4.6 mm×250 mm,5μm);丹参酮ⅡA:流动相为甲醇-水(75:25);流速:1 mL·min-1;柱温:30℃;λ=270 nm;丹酚酸B:流动相:甲醇乙腈-甲酸-水(30:10:1:59);流速:1 mL·min-1;柱温:30℃;λ=286 nm.进样量:10 μL.结果:丹参酮ⅡA和丹酚酸B分别在0.016-0.32 μg,0.14-2.8μg内呈良好的线性关系;平均回收率分别为101.2％(RSD％=2.47％,n=5),99.6％(RSD％=2.71％,n=6).结论:该方法准确、可靠、重复性好,可用于加味丹参饮的质量控制.

语种： 中文

作者： 童巧珍;蔡嘉洛;郭婷;刘平安;张聪子;...

期刊： 中南药学,2014年12(10):950-952,988 ISSN：1672-2981

作者机构： [蔡嘉洛; 易刚强; 郭婷; 童巧珍; 张聪子; 刘平安; 高昱] 湖南中医药大学

关键词： 吴茱萸;高效液相色谱法;指纹图谱;脂溶性成分

摘要： 目的 建立湘产吴茱萸脂溶性成分的HPLC指纹图谱。方法 采用大连伊利特Hypersill ODS（4.6mm×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇-0.02%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速0.8 mL.min^-1,柱温30℃,检测波长245 nm。结果 确定了16个共有峰,收集到的14批吴茱萸药材相似度均〉0.900。结论 该方法较好的体现了湖南省不同产地吴茱萸药材中脂溶性成分在该色谱条件下的整体性。

语种： 中文

作者： 童巧珍;黄政德;蔡嘉洛;张聪子;郭婷;...

期刊： 中南药学,2014年(6):504-506,517 ISSN：1672-2981

作者机构： [蔡嘉洛; 郭婷; 童巧珍; 黄政德; 张聪子; 孙梦姗] 湖南中医药大学

关键词： 加味丹参饮;高效液相色谱;指纹图谱;相似度

摘要： 目的：建立加味丹参饮的HPLC指纹图谱。方法色谱柱：C18（4.6 mm×250 mm，5μm），流动相：甲醇-甲酸-乙腈梯度洗脱，检测波长为270 nm，流速1 mL·min-1，柱温30℃。结果确定了14个共有峰，10批加味丹参饮指纹图谱的相似度均＞0.9。结论该方法简单、准确、重复性好，可为加味丹参饮的质量评价提供依据。

语种： 中文