血清hTERT mRNA实时荧光PCR定量方法的建立及在胃癌中的初步应用
期刊:
现代检验医学杂志 ,2013年28(1):17-20 ISSN:1671-7414
作者机构:
武警湖南总队医院检验科,长沙,410006;湖南中医药大学生物化学教研室,长沙,410007;[胡梅] 湖南中医药大学;[刘阳; 喻红波] 武警湖南总队医院
关键词:
人端粒酶逆转录酶;实时荧光定量PCR;胃癌
摘要:
目的 建立血清人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)mRNA实时荧光定量PCR检测方法,并初步应用于胃癌检测.方法 以hTERT基因为靶基因设计引物,构建携带hTERT cDNA的质粒pMD-hTERT,建立血清hTERT mRNA实时荧光PCR定量方法,检测经病理确诊的48例胃癌患者,58例健康人血清hTERT mRNA表达水平并分析其差异.结果 建立血清hTERT mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,以拷贝数的对数表示,胃癌患者hTERT mRNA表达水平为7.20±2.25,显著高于健康人5.11±2.47(t=4.481,P=0.001),与肿瘤大小和分期、分化等级明显相关(P〈0.01),与年龄、性别以及肿瘤数量无明显关联(P>0.05).结论 成功建立了血清hTERT mRNA表达的实时荧光定量PCR方法,实验表明检测血清hTERT mRNA有助于胃癌诊断和研究.
语种:
中文
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还少丹对D-半乳糖衰老模型小鼠白介素-2及线粒体DNA含量的影响
期刊:
临床与病理杂志 ,2012年32(1):8-11 ISSN:2095-6959
作者机构:
湖南中医药大学中医学院生物化学教研室,长沙,410007;[程莉娟; 胡梅; 张波; 谭峰; 刘群良] 湖南中医药大学
关键词:
还少丹;抗衰老;D-半乳糖;白介素-2;线粒体DNA
摘要:
目的:探讨还少丹对衰老模型小鼠白介素-2(IL-2)及线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)含量的影响。方法:将40只小鼠随机分成空白对照组、衰老模型组、低剂量药物组和高剂量药物组,每组10只。采用皮下注射D-半乳糖溶液(100 mg/kg)制备亚急性衰老模型,同时用还少丹水煎液灌胃6周。双抗夹心ELISA法测定血清IL-2的含量;分光光度法测定肝、脑组织中mtDNA含量。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠血清IL-2含量明显减少,肝和脑组织mtDNA含量明显增高(均P<0.01)。与模型组比较,还少丹低剂量和高剂量组都能提高衰老模型小鼠血清IL-2的含量,降低肝、脑组织mtDNA的含量,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。结论:还少丹能够提高衰老小鼠的机体免疫功能,降低肝、脑组织中mtDNA的含量,从而起到延缓衰老的作用。
语种:
中文
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肝癌患者外周血单个核细胞ILT-4mRNA的表达
期刊:
武警后勤学院学报(医学版) ,2012年21(12):955-957 ISSN:2095-3720
作者机构:
武警湖南总队医院检验科,湖南长沙,410006;武警湖南总队医院医务处,湖南长沙,410006;湖南中医药大学生物化学教研室,湖南长沙,410006;[胡梅] 湖南中医药大学;[刘阳; 简明; 喻红波] 武警湖南总队医院
关键词:
肝癌;外周血单个核细胞;免疫球蛋白转录子4;实时相对定量聚合酶链式反应
摘要:
[目的]检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)免疫球蛋白转录子4(immunoglobulin-liketranscript-4,ILT-4)mRNA在肝癌患者中的表达,并探讨其在肿瘤发生发展中的作用.[方法]以β-actin为内参照,实时荧光定量RT-PCR方法检测肝癌患者和健康体检者外周血单个核细胞ILT-4 mRNA的表达.[结果]正常对照组ILT-4 mRNA表达水平(0.450±0.216)显著低于肝癌组(0.887±0.253,P<0.05),肝癌患者组在不同分期之间的表达差异无统计学意义(P>0.05),低分化(1.061±0.126)显著高于高、中分化(0.693±0.215,P<0.05).[结论]肝癌患者外周血PBMC ILT-4mRNA表达水平上调,检测PBMC的ILT-4基因表达水平有助于肝癌的诊断和研究.
语种:
中文
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还少丹对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响
期刊:
中国中医药信息杂志 ,2012年19(5):36-37 ISSN:1005-5304
作者机构:
[程莉娟; 胡梅; 张波; 刘群良; 谭峰] 湖南中医药大学生物化学教研室
关键词:
还少丹;抗衰老;D-半乳糖;白细胞介素-2;T淋巴细胞增殖活性;小鼠
摘要:
目的观察还少丹对D-半乳糖致衰老模型小鼠免疫功能的影响,并探讨其延缓衰老的机制。方法将小鼠随机分成对照组、模型组和还少丹低、高剂量组。采用皮下注射D-半乳糖溶液制备亚急性衰老模型,还少丹低、高剂量组给予相应剂量的还少丹水煎液灌胃,对照组和模型组给予等量的蒸馏水灌胃,连续6周。测定各组小鼠胸腺指数和脾脏指数、脾组织IL-2水平及T淋巴细胞的增殖活性。结果与对照组比较,模型组小鼠胸腺和脾脏指数、IL-2水平和T淋巴细胞增殖活性明显降低(P<0.01);与模型组比较,还少丹低、高剂量组均能增加胸腺指数和脾脏指数,提高IL-2水平和T淋巴细胞增殖活性,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论还少丹可通过增加胸腺和脾脏指数来保护免疫器官,通过提高IL-2的水平及T淋巴细胞的增殖活性增加机体免疫活性,这可能是还少丹发挥抗衰老作用的机制之一。
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中文
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肝癌患者血清端粒酶逆转录酶mRNA表达研究
期刊:
武警后勤学院学报(医学版) ,2012年21(3):161-163,166 ISSN:2095-3720
作者机构:
武警湖南总队医院检验科,湖南长沙,410006;湖南中医药大学生物化学教研室,湖南长沙,410007;湖南中医药大学图书馆,湖南长沙,410007;[胡梅; 吴娅娜] 湖南中医药大学;[刘阳; 喻红波] 武警湖南总队医院
关键词:
肝癌;端粒酶逆转录酶;实时相对定量PCR
摘要:
【目的】探讨肝癌患者血清端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)mRNA表达水平及对肝癌的临床应用价值。【方法】设计人端粒酶逆转录酶基因引物和实时荧光PCR相对定量法反应体系,在ABI7500实时荧光PCR仪上检测45例肝癌患者,52例病毒性肝炎患者,29例肝硬化患者和58例健康人血清端粒酶逆转录酶mRNA表达水平并分析其差异。【结果】肝癌患者血清hTERT mRNA水平明显高于肝炎、肝硬化患者及健康人。肝癌患者血清hTERT mRNA相对表达量与肿瘤大小和分化等级及分期明显相关,与年龄、性别、以及肿瘤数量无明显关联。【结论】肝癌患者血清hTERT基因表达上调,其升高程度与肿瘤分化与进展相关,检测血清hTERT基因表达水平有助于肝癌的诊断和研究。
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LNX1基因的研究
期刊:
生命的化学 ,2010年30(6):910-913 ISSN:1000-1336
作者机构:
[胡梅; 张波; 卢芳国] 湖南中医药大学基础医学院
关键词:
PDZ结构域;E3泛素连接酶;紧密接界
摘要:
LNX1基因编码的蛋白质含有2个异形体(isoform),分别称为LNX1-p70和LNX1-p80,其中LNX1-p80具有E3泛素连接酶活性。LNX1蛋白异形体都含有一个NAPY结构域和4个PDZ结构域,其中PDZ结构域是多种蛋白质中具有的结构,主要介导蛋白质相互作用。LNX1可以和细胞中多种蛋白质相互作用,改变被结合蛋白质在细胞中的数量与位置,参与调节生物体胚胎发育,在细胞紧密接界的重构中具有重要作用,可能对肿瘤的形成具有阻抑作用。
语种:
中文
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Contents of blood lipids, apolipoprotein-cholesterol, lipid peroxidation and the activity of monoamine peroxidase in aging rats and the interventional effect of Huanshao dan
作者:
刘群良;张月娟;胡松;谭峰
( 谭峰 ) ;胡梅
( 胡梅 ) ;...
期刊:
中国组织工程研究 ,2005年9(23):155-157 ISSN:2095-4344
通讯作者:
Liu, Q.-L.
作者机构:
[胡梅; 谭峰; 阳力争; 张月娟; 张克纯; 刘群良; 胡松] Department of Biochemistry, Human College of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007 Hunan Province, China
通讯机构:
[Liu, Q.-L.] D;Department of Biochemistry, Hunan College of Traditional Chinese Medicine, China
关键词:
大鼠血脂;脂质含量;还少丹;谷胱甘肽过氧化物酶活性;单胺;干预作用;低密度脂蛋白-胆固醇;低密度脂蛋白胆固醇;高密度脂蛋白胆固醇;抗动脉粥样硬化;丙二醛含量;湖南中医学院;中药组成;老年大鼠;三酰甘油;大鼠血清
摘要:
目的:探讨由何首乌、熟地、肉苁蓉等中药组成的还少丹对大鼠血脂、载脂蛋白-胆固醇、过氧化脂质含量和单胺氧化酶活性的影响.方法:实验于2005-04在湖南中医学院分子生物学实验室完成.24只健康SD老年大鼠,随机分为对照组和药物组,每组12只.药物组用还少丹水煎液(由何首乌、熟地、肉苁蓉等中药组成)灌胃2 mL(含生药7 g)/(kg.d),对照组用等量生理盐水灌胃,5 d/周,另2 d自由饮水,给药80 d.大鼠禁食12 h后取血,检测血脂和载脂蛋白-胆固醇的含量,测定血清谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量,并取脑组织测定单胺氧化酶活性.结果:21只老年大鼠进入结果分析.①三酰甘油含量:药物组明显低于对照组[(0.97±0.11,1.50±0.93)mmol/L,(t=11.98,P<0.01)].②低密度脂蛋白-胆固醇:药物组明显低于对照组[(1.99±0.11,2.94±0.12)mmol/L,(t=18.68,P<0.01)].③谷胱甘肽过氧化物酶活性:药物组明显高于对照组[(37.34±2.00,31.51±2.33)nkat/L,(t=6.25,P<0.01)].④丙二醛含量:药物组明显低于对照组[(13.79±1.01,17.70±1 41)nmol/mL,(t=5.12,P<0.01)].⑤单胺氧化酶活性:药物组明显低于对照组[(0.07±0.01,0.24±0.02)nkat/g,(t=13.27,P<0.01)].结论:①还少丹能降低大鼠血清中三酰甘油、总胆固醇的含量,提高高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白胆固醇的比值,起到抗动脉粥样硬化的效应.②有效地提高大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶活性,抑制大鼠脑内的单胺过氧化物酶活性,产生抗衰老的作用.
语种:
中文
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Ability of eliminating active oxygen and the changes of DNA telomere length in aging mice and the interventional effects of huanshao dan
作者:
刘群良;张月娟;胡梅
( 胡梅 ) ;谭峰
( 谭峰 ) ;胡松;...
期刊:
中国组织工程研究 ,2005年9(19):146-147 ISSN:2095-4344
通讯作者:
Liu, Q.-L.
作者机构:
[胡梅; 谭峰; 刘群良; 张月娟; 胡松; 张克纯] Department of Biochemistry, Hunan College of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007 Hunan Province, China
通讯机构:
[Liu, Q.-L.] D;Department of Biochemistry, Hunan College of Traditional Chinese Medicine, China
关键词:
抗衰老药(中药);端粒;超氧化物歧化酶;过氧化氢酶
摘要:
目的:观察还少丹对老年小鼠衰老指标活性氧损害程度与DNA端粒长度的影响.方法:实验于2005-01/04在湖南中医学院分子生物学实验室完成,选择24只健康昆明种老年小鼠,随机分为对照组和药物组,各12只.药物组用还少丹水煎液(由何首乌、熟地、肉苁蓉等中药组成)灌胃10 μL(含生药10 g)/(g·d),对照组用等量生理盐水灌胃,每周灌胃5 d,共给药70 d.小鼠断头取血,离心分离出红细胞,加蒸馏水制成溶血液.溶血液中超氧化物歧化酶含量采用光化学扩增法检测,溶血液中过氧化氢酶含量以过氧化氢分解法检测,同时采血测定溶血液血红蛋白的含量.小鼠肝组织DNA的平均端粒长度应用Southern印迹杂交检测.结果:实验过程中对照组死亡3只,药物组死亡2只,进入结果分析对照组和药物组分别为9和10只.①超氧化物歧化酶活性及过氧化氢酶活性:药物组小鼠显著高于对照组小鼠[(31.41±2.51)μkat/g,(22.95±3.69)K/g;(21.36±3.10)μkat/g,(14.12±1.96)K/g,(t=7.797,6.387,P<0.01)].②肝组织DNA平均端粒长度:药物组小鼠长于对照组[(23.05±0.50)kb,(17.26±0.68)kb,(t=21.358,P<0.01)].结论:服用还少丹后老年小鼠超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性增加,清除活性氧的能力加强,并可能通过此作用延缓了端粒的缩短,达到了延缓衰老的目的.
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中文
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还少丹对大、小白鼠B型单胺氧化酶活性的影响
期刊:
湖南中医药大学学报 ,2005年25(5):27-28,59 ISSN:1674-070X
作者机构:
[胡梅; 成细华; 谭峰; 刘群良; 张月娟] 湖南中医学院;湖南中医学院 湖南长沙410007
关键词:
还少丹;单胺氧化酶;抗衰老;大、小白鼠
摘要:
目的研究还少丹对大、小白鼠脑和肝B型单胺氧化酶(MAO-B)活性的影响.方法采用紫外分光光度法测定各组白鼠脑、肝组织内MAO-B活性.结果老年小白鼠MAO-B有活性增高之老年性变化(P<0.01),老年大、小白鼠还少丹组脑、肝MAO-B活性明显低于对照组(P<0.01).结论还少丹能对抗老年白鼠因衰老引起单胺氧化酶活性的改变,从生化酶学角度进一步阐明还少丹的抗衰老作用.
语种:
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Effects of kangshuai yanshou compound on chromatin structure and injured function in mice
期刊:
中国组织工程研究 ,2004年8(36):8258-8259 ISSN:2095-4344
通讯作者:
Liu, Q.-L.
作者机构:
[胡梅; 吴琼; 刘群良; 张克纯] Department of Biochemistry, Hunan College of Traditional Chinese, Changsha 410007 Hunan Province, China
通讯机构:
[Liu, Q.-L.] D;Department of Biochemistry, Hunan College of Traditional Chinese, China
关键词:
抗衰老药(中药);染色质;动物,实验
摘要:
目的:探讨抗衰延寿方对小鼠染色质结构与功能损害的影响.方法:实验在湖南中医学院分子生物学实验室完成,选用60只小鼠,取小鼠骨髓细胞制片,镜检计数姊妹染色单体互换(SCE)、细胞分裂指数和细胞周期.结果:老年小鼠骨髓细胞SCE频率(1.79±0.35)显著高于青年小鼠(0.80±0.13),服用抗衰延寿方的老年小鼠SCE频率(1.16±0.21)显著低于对照组老年小鼠;环磷酰胺造成小鼠骨髓细胞增殖周期延长,SCE频率增加(3.73±0.57).结论:结果表明,小鼠骨髓细胞SCE频率随增龄而增加,抗衰延寿方可阻抗小鼠骨髓细胞SCE的增龄性改变,并能有效地抑制环磷酰胺所引起的小鼠骨髓细胞分裂增殖与SCE的改变.
语种:
中文
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