作者： 凌佳;杨琴;刘检;王宇红;徐雅岚;...

期刊： 中国中医药信息杂志,2017年24(10):35-39 ISSN：1005-5304

作者机构： 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208;湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007;常德职业技术学院, 湖南, 常德, 415003;[凌佳; 王宇红; 孟盼] 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208;[杨琴; 刘检; 韩远山; 杨蕙] 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007

关键词： 左归降糖解郁方;糖尿病并发抑郁症;海马神经元;大鼠

摘要： 目的探讨左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经元凋亡相关蛋白Bcl-2、 Bax及Caspase-8的调控作用。方法采用受孕18 d SD大鼠胎鼠进行海马神经元原代培养,葡萄糖联合皮质酮干预构建DD模拟环境。将培养的海马神经元随机分为正常组、空白血清组、模型组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)药物血清组和待测药(左归降糖解郁方)药物血清组,正常组和模型组给予等量培养液,其余组给予相应体积分数10%药物血清或空白血清,造模干预18 h后,Hoechst荧光染色检测海马神经元凋亡;高内涵分析技术检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-8的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠海马神经元树突断裂或减少,神经网络连接降低,细胞存在明显的浓染、破碎、光点分布不均现象,Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05),Bax和Caspase-8蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,阳性药药物血清组和待测药药物血清组大鼠海马神经元网络连接显著恢复,Hoechst荧光染色可见细胞核明显均匀化,局部亮点明显减少,Bcl-2蛋白表达水平显著上调(P<0.05,P<0.01),Bax和Caspase-8蛋白表达水平显著下调(P<0.05, P<0.01)。结论左归降糖解郁方对模型大鼠海马神经元凋亡的保护作用可能与调控海马神经元Bcl-2,Bax和Caspase-8的表达有关。

语种： 中文

作者： 韩远山;杜青;赵洪庆;王宇红;杨蕙;...

期刊： 基础医学与临床,2017年37(12):1663-1667 ISSN：1001-6325

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院中心实验室, 湖南, 长沙, 410007;湖南中医药大学, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208;湖南中医药大学第一附属医院中心实验室, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410007;[韩远山; 杨蕙] 湖南中医药大学第一附属医院中心实验室, 湖南, 长沙, 410007;[杜青; 赵洪庆; 孟盼; 秦裕辉] 湖南中医药大学, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208

关键词： 糖尿病并发抑郁症;血脑屏障

摘要： 目的探讨S100B、AQP4和CX43表达紊乱对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障功能的影响。方法将大鼠分为糖尿病组[高脂乳灌胃2周+尾静脉注射链脲佐菌素(STZ,38 mg/kg)]、抑郁症组(慢性不可预知性应激28 d)、糖尿病并发抑郁症组(联合以上两种方法建立)、对照组。造模结束后,旷场实验和Morris水迷宫实验观察大鼠行为学,ELISA检测血清S100B含量,免疫组化法检测海马血脑屏障AQP4和CX43的表达。结果与对照组比较,糖尿病组和抑郁症组大鼠自主活动次数和空间探索时间显著减少,逃避潜伏期延长(P<0.05, P<0.01);血清S100B含量明显增多(P<0.01);海马血脑屏障功能性蛋白AQP4、CX43积分吸光度明显减少(P<0.01)。与糖尿病组比较,糖尿病并发抑郁症组大鼠自主活动次数和空间探索时间减少,逃避潜伏期延长(P<0.05, P<0.01);血清S100B含量明显增多(P<0.05);海马血脑屏障功能性蛋白AQP4、CX43积分吸光度明显减少(P<0.05, P<0.01)。结论S100B、AQP4和CX43表达紊乱所致海马血脑屏障功能障碍可能是糖尿病并发抑郁症发生机制之一。

语种： 中文

作者： 杜青;赵洪庆;王宇红;徐雅岚;杨蕙;...

期刊： 中国现代应用药学,2016年33(5):521-525 ISSN：1007-7693

作者机构： [杜青; 赵洪庆; 徐雅岚; 孟盼] 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地,长沙,410007;[王宇红] 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地,长沙 410007;[王宇红] 湖南中医药大学第一附属医院,长沙 410007;湖南中医药大学第一附属医院,长沙,410007;[杨蕙] 湖南中医药大学附属第一医院

关键词： 糖尿病并发抑郁症;左归降糖解郁方

摘要： 目的针对NR受体亚型及其下游分子CaMKII、SynGAP的表达情况,探索左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马神经元突触功能可塑性的影响。方法复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型并随机分为4组:模型组,阳性药组(二甲双胍0.18 g·kg~(-1)+盐酸氟西汀1.8 mg·kg~(-1)),左归降糖解郁方高、低剂量组(32.82,8.20 g·kg~(-1)),以正常大鼠为空白对照组。采用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,Western-blotting实验检测大鼠海马NR2A、NR2B、CaMKII、 SynGAP的表达情况。结果与空白对照组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,空间探索时间减少(P<0.05),NR受体亚型NR2A、NR2B及CaMKII、SynGAP的表达明显减少(P<0.01);与模型组比较,阳性药组和左归降糖解郁方高剂量组逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),空间探索时间显著增加(P<0.05),NR2A、NR2B、CaMKII、SynGAP的表达明显增多(P<0.05或0.01)。结论左归降糖解郁方可以明显增强糖尿病并发抑郁症大鼠的学习记忆能力,改善认知功能障碍,缓解抑郁症状,该作用可能与调节海马NR受体亚型NR2A、NR2B及其下游分子CaMKII、SynGAP的表达,保护海马神经元突触功能可塑性有关。

语种： 中文

作者： 刘林;刘羽;廖亮英;孟盼;韩远山;...

期刊： 中华中医药学刊,2016年34(2):317-319 ISSN：1673-7717

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院;[王宇红; 孟盼] 湖南中医药大学;[刘羽; 刘林; 韩远山; 廖亮英] 中医药大学第一附属医院

关键词： 百事乐加味方;抗抑郁;卒中后抑郁;行为学

摘要： 目的:考察百事乐加味方(MBD)的抗抑郁作用.方法:采用小鼠模型和卒中后抑郁大鼠模型(PSD)等方法进行研究.观察MBD对小鼠的抗抑郁作用.结果:小鼠抑郁实验中,MBD能明显对抗利血平引起的小鼠眼睑关闭程度,体温下降,差异有统计学意义(P＜0.05);MBD动物活动数明显增多,悬尾不动、游泳不动时间明显缩短,差异有统计学意义(P ＜0.05～0.01);PSD实验中,MBD增加大鼠体重,糖水消耗,改善旷野实验水平活动得分和垂直活动得分.结论:MBD具有一定的抗抑郁作用,能够改善抑郁模型的抑郁状态.

语种： 中文

作者： 蔺晓源;韩远山;孟盼;杨蕙;王宇红

期刊： 时珍国医国药,2016年27(8):1942-1943 ISSN：1008-0805

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007;湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208;[蔺晓源; 韩远山; 杨蕙] 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007;[孟盼; 王宇红] 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208

关键词： 糖尿病并发抑郁症;虚;瘀;郁;中医病机

摘要： 糖尿病并发抑郁症发病率广、危害性大、治疗难度高,中医立足整体、辨证论治疗效独特,而紧扣糖尿病并发抑郁症以“虚”为本、“瘀、郁”为标的中医病机特点,对于防治该病的理法方药研究意义重大。

语种： 中文

作者： 刘林;杨蕙;刘羽;刘检;韩远山;...

期刊： 中华中医药杂志,2016年31(4):1398-1401 ISSN：1673-1727

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院中药药理(心血管)实验室, 长沙, 410007;湖南中医药大学, 中药粉体与创新药物湖南省省部共建国家重点实验室培育基地, 长沙, 410208;[刘林; 杨蕙; 刘羽; 刘检; 韩远山] 湖南中医药大学第一附属医院中药药理(心血管)实验室, 长沙, 410007;[孟盼; 王宇红] 湖南中医药大学, 中药粉体与创新药物湖南省省部共建国家重点实验室培育基地, 长沙, 410208

关键词： 百事乐加味方;卒中后抑郁;海马-前额叶皮层环路;脑源性神经营养因子

摘要： 目的:考察百事乐加味方对脑卒中后抑郁症(PSD)大鼠海马、前额叶皮层病理形态及脑源性神经影响因子(BDNF)水平的影响。方法:采用大脑中动脉线栓(MCAO)法建立大鼠局灶性脑缺血模型,再结合慢性不可预见的温和性应激(CUMS)和孤养法建立PSD,通过HE染色和免疫组化技术,观察百事乐加味方对PSD大鼠海马、前额叶皮层形态及BDNF的影响。结果:HE染色显示:百事乐加味方组大鼠海马CA1区神经元排列稍不整齐,大部分神经元细胞核、核膜结构较清楚, 部分细胞尼氏体消失,少部分细胞胞浆浓缩深染, 可见少部分变性或坏死的细胞, 损伤程度较PSD组轻;百事乐加味方组大鼠前额叶皮层细胞形态未发生明显改变,结构部分清晰,胞数目减少,内锥体细胞层和多形细胞层损伤较PSD组轻。免疫组化结果显示:百事乐加味方上调PSD大鼠海马、前额叶皮层BDNF的表达(P<0.01)。结论:百事乐加味方增加海马-前额叶皮层环路神经可塑性可能是其治疗PSD的主要机制之一。

语种： 中文

作者： 骆敏;王宇红;黄熙

作者机构： [骆敏; 王宇红; 黄熙] 南京中医药大学共病郁证研究所(基础医学院);[骆敏; 王宇红; 黄熙] 中南大学湘雅二医院肾内科;[骆敏; 王宇红; 黄熙] 湖南中医药大学第一附属医院中心实验室

会议名称： 第二届国际抑郁共病暨第十二届中国中西医结合基础理论学术研讨会

会议时间： 2016-10-14

会议地点： 中国江苏南京

摘要： <正>笔者师从生物方剂分析药理(BAP)策略创始人黄熙教授,博士毕业后留校在中南大学湘雅二医院任职,在导师黄熙教授的指导下与湖南中医药大学及第一附属医院开展了BAP的合作研究。现在就研究经历做一下回顾和前景展望:BAP策略包括:方剂吸收生物活性成分测定、吸收生物活性成分与母方疗效的比较及在进行药效比较时吸收生物活性成分剂量等于母方中含量。使用这一策略,可阐明很多方剂

语种： 中文

作者： 刘芳;杨岩涛;贺福元;刘林;吴双;...

期刊： 中国中医药信息杂志,2016年23(7):82-86 ISSN：1005-5304

作者机构： 湖南中医药大学药学院, 湖南, 长沙, 410208;湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007;湖南中医药大学第一附属医院, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地;[王宇红] 中药粉体关键技术及装备国家地方联合工程实验室, 湖南, 长沙, 410007;湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地

关键词： 药代动力学;补阳还五汤;脑健片;阿魏酸;洋川芎内酯A;藁本内酯

摘要： 目的比较补阳还五汤类方(补阳还五汤和脑健片)中阿魏酸、洋川芎内酯A、藁本内酯在大鼠体内的药代动力学特征。方法将补阳还五汤类方灌胃颈静脉插管大鼠,采用HPLC-DAD法同时检测3种成分在不同时间点的血药浓度,经DAS2.0计算得单成分的药代动力学参数,再采用总量统计矩(相似度)法整合成整体药代动力学参数并进行比较。结果3种成分在体内的总量统计参数相差甚远,而3种成分总和的统计矩参数却比较接近,补阳还五汤和脑健片在大鼠体内AUC分别为240.6和133.0,MRT分别为3.192 min和3.259 min,VRT分别为21.59 min~2和19.75 min~2;补阳还五汤和脑健片中3种成分总量的相似度达到0.977 8。结论补阳还五汤和脑健片在体内代谢过程具有相似性,中药复方发挥功效依赖于多成分的整体贡献。

语种： 中文

作者： 孟盼;赵洪庆;杜青;王宇红;杨蕙;...

期刊： 中国中医药信息杂志,2016年23(9):78-81 ISSN：1005-5304

作者机构： 湖南中医药大学, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208;湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007;[孟盼; 赵洪庆; 杜青; 王宇红; 张秀丽; 徐雅岚] 湖南中医药大学, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208;[杨蕙] 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007

关键词： 左归降糖解郁方;糖尿病并发抑郁症;神经元凋亡;大鼠

摘要： 目的：观察左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠学习记忆能力以及海马 JNK、Bcl-2、Bax 表达的影响，探讨其对糖尿病并发抑郁症大鼠海马损伤的保护机制。方法采用高脂饲料灌胃联合尾静脉注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，继续给予28 d慢性应激建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型。实验大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组及左归降糖解郁方高、中、低剂量组。末次给药后，采用 Morris 水迷宫测试大鼠逃避潜伏期时间，Western blot检测海马JNK、Bcl-2、Bax蛋白表达；RT-PCR检测JNK、Bcl-2、Bax基因表达。结果与空白组比较，模型组大鼠逃避潜伏期明显延长（P＜0.01），JNK、Bax蛋白及基因表达明显上升， Bcl-2表达明显下降（P＜0.05，P＜0.01）；与模型组比较，左归降糖解郁方高剂量组大鼠逃避潜伏期明显缩短（P＜0.01），JNK、Bax 蛋白及基因表达均明显下降，Bcl-2表达明显升高（P＜0.05，P＜0.01）。结论左归降糖解郁方能明显改善糖尿病并发抑郁症大鼠的学习记忆能力，其作用机制可能与抑制海马神经元凋亡有关。

语种： 中文

作者： 佘颜（佘颜）;王宇红;邵乐;夏相宜;刘芳;...

期刊： 中国药理学通报,2016年32(1):123-128 ISSN：1001-1978

作者机构： [佘颜] Medical College, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410208, China;[王宇红; 刘芳; 邵乐; 蔡光先; 夏相宜] Training Bases, Hunan Key Lab. of Chinese Materia Medica Powder and Innov. Drugs Estab. by Provincel and Ministry, Changsha, 410208, China

关键词： 补阳还五汤精简方;血管新生;核转录因子E2相关因子2;血红素加氧酶-1;血浆Ⅷ因子相关抗原;微血管密度

摘要： 目的：观察补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及核转录因子 E2相关因子2( Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号途径的影响。方法120只 SD 大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤精简方组。采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,各组给予相应处理。在 d 1、3、7三个时间点取脑组织进行检测,免疫组织化学法检测血浆Ⅷ因子相关抗原(vWF),测定微血管密度(MVD)。采用 Real-time PCR 和 Western blot 法检测大鼠脑组织中 Nrf2、HO-1基因及蛋白表达。结果①与假手术组比,模型组 vWF 阳性表达微血管在 d 3时表达明显升高(P<0．05),给药组 d 7与模型组比较差异有显著性( P <0．05)；②假手术组 Nrf2、HO-1mRNA 及蛋白呈少量表达,模型组 Nrf2蛋白表达水平 d 3与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P <0．01),各给药组能上调 Nrf2mRNA 及蛋白表达,其中 Nrf2mRNA 在 d 7,Nrf2蛋白表达在 d 1及 d 7上调最明显,与同时间点模型组比较差异具有统计学意义(P <0．01)。模型组 HO-1mRNA 及蛋白在 d 7与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P <0．05),各给药组 HO-1mRNA 在 d 3,HO-1蛋白在 d 3及 d 7上调最明显,与同时段模型组比较差异具有统计学意义(P <0．05,P <0．01)。结论补阳还五汤精简方促进脑缺血后血管新生,这一作用可能与调控 Nrf2/ HO-1信号途径的表达有关。

语种： 中文

项目作者： 王宇红

项目作者单位： 湖南中医药大学

项目批准号： 2015DK3003

资助经费： 10万

立项时间： 2016

项目级别： 省部级

项目来源： 湖南省科技计划项目

作者： Bu, Yiwen;Li, Xiaoning;He, Yingchun;Huang, Chenfei;Shen, Yi;...

期刊： International Journal of Cancer,2016年138(5):1186-1198 ISSN：0020-7136

通讯作者： Cao, Deliang;Liao, Duan-Fang

作者机构： [Huang, Chenfei; Li, Xiaoning; Shen, Yi; Cao, Yu; Bu, Yiwen; He, Yingchun; Cao, Deliang] So Illinois Univ, Sch Med, Simmons Canc Inst, Dept Med Microbiol Immunol & Cell Biol, 913 N Rutledge St, Springfield, IL 62794 USA.;[Wang, Ziqi; Wang, Yuhong; He, Yingchun; Cao, Deliang; Huang, Dan; Liao, Duan-Fang; Cai, Chuan] Hunan Univ Chinese Med, Div Stem Cell Regulat & Applicat, State Key Lab Chinese Med Powder & Med Innovat Hu, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.

通讯机构： [Cao, Deliang] S;[Liao, Duan-Fang] H;So Illinois Univ, Sch Med, Simmons Canc Inst, Dept Med Microbiol Immunol & Cell Biol, 913 N Rutledge St, Springfield, IL 62794 USA.;Hunan Univ Chinese Med, Div Stem Cell Regulat & Applicat, State Key Lab Chinese Med Powder & Med Innovat Hu, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.

关键词： NF-kappaB;RelA/p65;Ser536 phosphorylation;apoptosis;phosphomimetic mutation;senescence;tumor suppressor

摘要： Hundreds of NF-κB inhibitors have been developed for cancer therapy, but their clinical efficacy is unsatisfactory. Here we show that the phosphorylation activation at Ser536 of RelA/p65 protein, a main subunit in the NF-κB family, may play a tumor-suppressive role. In normal colon mucosa, RelA/p65 phosphorylation at Ser536 was increasingly increased with the maturation and apoptotic shedding of epithelial cells, but the phosphorylation at Ser536 was decreased in colon cancer. In colon (HCT116 p53 wt and p53 -/-), breast (MCF7), and prostate (LNCaP and DU145) cancer cells, a phosphomimetic mutation of RelA/p65 at Ser536 (named p65/S536D) triggered dramatic apoptosis through affecting expression of a wide range of cell death/survival genes, such as Bim, Puma, Noxa, Bcl-2 and survivin. In HCT116 cells, p65/S536D mutant upregulated Fas, insulted mitochondrial membrane potential, and triggered cleavage and activation of caspase-3, 7, 8 and 9. A FasL neutralizing antibody (NOK1) prevented cell death induced by the p65/S536D. A pan inhibitor of caspases, Z-VAD-FMK (20 μM), blocked caspase-mediated mitochondrial membrane depolarization. This p65/S536D also triggered senescence in HCT116 cells through a p16-dependent pathway, but not in MFC7 due to lack of p16. Intratumoral delivery of the p65/S536D effectively suppressed tumor growth in nude mice. Together our data suggest that the phosphorylation of RelA/p65 at Ser536 may confer it a tumor-suppressive role by inducing apoptosis and senescence, highlighting the importance of discriminating the function and active status of individual active sites in RelA/p65 when NF-κB inhibitors are considered for targeted therapy of cancer. What's new? The nuclear factor-kappa B (NF-κB) family is activated in a wide array of cancers, with phosphorylation of the RelA/p65 subunit thought to play a critical role in tumorigenesis. However, there is also evidence that RelA/p65 can suppress tumor growth. This study shows that phosphomimetic mutation of RelA/p65 at the Ser536 residue results in dramatic death and senescence of breast, colon, and prostate cancer cells in vitro. In mice, injection of the mutated subunit effectively suppressed tumor growth. The findings elucidate a tumor-suppressive mechanism for RelA/p65 and offer insight for the development of novel NF-κB-targeted therapies. © 2015 UICC.

语种： 英文

发明/设计人： 王宇红;刘检;韩远山;徐雅岚

申请/专利权人： 湖南中医药大学

申请/专利号： CN201510919049.1

申请时间： 2015-12-10

公开号： CN105441391A

公开时间： 2016-03-30

主申请人地址： 410208 湖南省长沙市岳麓区象嘴路湖南中医药大学含浦校区

摘要： 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种糖尿病并发抑郁症细胞模型的建立方法：向培养海马神经元的培养基中加入终浓度为50-200mmol/L葡萄糖和100-400μmol/L皮质酮，干预培养所述海马神经元18-24h，即得所述细胞模型。通过一般形态学观察、HE染色、葡萄糖消耗量检测、细胞内神经递质检测、MTT法检测、流式细胞仪技术、Hoechst荧光染色法和TUNEL染色法对所述模型进行了评价，显示该模型效果良好，可用于糖尿病并发抑郁症的病理生理研究或发病机制研究或体外药物筛选或药物评价。

作者： 王宇红;徐雅岚;刘检;杨蕙;孟盼;...

期刊： 时珍国医国药,2016年27(8):1802-1806 ISSN：1008-0805

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208;湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007;[王宇红; 徐雅岚; 孟盼; 杜青; 赵洪庆; 凌佳] 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208;[刘检; 杨蕙] 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007

关键词： 左归降糖解郁方;糖尿病并发抑郁症;海马神经元;细胞培养;凋亡

摘要： 目的研究左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)环境下海马神经元凋亡的保护作用。方法从胎鼠海马组织中分离、纯化和培养海马神经元,采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)鉴定海马神经元。采用高糖(150mM)联合皮质酮(200μM)诱导复制模拟DD环境海马神经元损伤模型。实验分为空白对照组、空白血清组、高糖联合皮质酮组、二甲双胍0.18g/kg+氟西汀1.8mg/kg(M+ F)组、左归降糖解郁方32.82g/kg(ZGJTJYF)组,造模及药物干预18h,采用MTT法,流式细胞术,高内涵成像分析系统检测各组海马神经元损伤及干预后活力及凋亡的变化情况。结果与空白对照组比较,高糖联合皮质酮组海马神经元胞体破裂,神经网络断裂,细胞活力减小,凋亡显著(P< 0.05); ZGJTJYF组海马神经元胞体圆润,神经网络丰富,细胞活力较强,凋亡率小,与模型组比较,差异有统计学意义(P< 0.05)。空白血清组细胞状态和细胞活力与正常对照组比较,无明显差异,与模型组比较,差异有统计学意义(P< 0.05)。M+ F组细胞状态和细胞活力与模型组比较有明显差异(P< 0.05),与ZGJTJYF组比较不具有统计学意义。结论左归降糖解郁方能增强模拟DD环境下海马神经元的活力,减少其凋亡,对模拟DD环境下海马神经元具有保护作用。

语种： 中文

作者： 刘检;王宇红;徐雅岚;孟盼;刘林;...

期刊： 神经解剖学杂志,2016年32(4):459-465 ISSN：1000-7547

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007;湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 长沙, 410208;[刘检; 刘林; 杨蕙; 韩远山] 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007;[王宇红; 徐雅岚; 孟盼] 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 长沙, 410208

关键词： 细胞培养;海马神经元;糖尿病;抑郁症;模拟DD环境;凋亡;胎鼠

摘要： 目的:建立一种改良的胎鼠海马神经元原代培养方法,研究模拟糖尿病并发抑郁(diabetes mellitus with depression,DD)环境对其的损伤作用。方法:取胎龄18 d的SD大鼠,体视显微镜下分离海马,0.25%胰蛋白酶和0.2%胶原酶(1∶1)消化后进行体外培养,分别观察培养后4 h、24 h、5 d、8 d、14 d海马神经元的基本形态结构;神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。采用高糖联合皮质酮造模构建类似糖尿病并发抑郁症状的模拟DD环境,MTT法检测神经元的存活率;流式AnnexinV/PI双染和Hoechst荧光染色检测神经元的凋亡情况。结果:经NSE免疫细胞化学鉴定,培养7 d后的神经元纯度达95%以上,细胞胞体成球形,树突分支明显,并相互交织成丰富的神经网络;高糖、皮质酮及两者联用造模18 h后,与正常对照组相比,MTT检测细胞存活率分别为53.1%、64.3%和56.7%,P < 0.05;流式细胞仪检测正常对照组、高糖组、皮质酮组、两者联用组Q3区的比例(分别为71.6%、47.9%、53.6%和39.2%), 明显低于阴性对照组(98.5%), P < 0.05。后四者Q2 + Q4区总比例分别为24.4%、46.6%、40.4%、67.0%; Hoechst染色结果提示上述三个造模组的神经元细胞核均出现不同程度的核染色质聚集、浓缩,甚至核碎裂,呈现出典型的凋亡特征。结论:成功建立一种操作简便、细胞纯度佳、活性好、产率高的胎鼠海马神经元原代培养方法,验证了模拟DD环境对海马神经元的损伤作用,为体外深入研究DD的发病机制及药物防治提供了实验依据。

语种： 中文

作者： 刘检;王宇红;徐雅岚;杨蕙;李薇

期刊： 沈阳药科大学学报,2016年33(7):581-587 ISSN：1006-2858

作者机构： 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007;湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208;[刘检; 杨蕙; 李薇] 湖南中医药大学第一附属医院, 湖南, 长沙, 410007;[王宇红; 徐雅岚] 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南, 长沙, 410208

关键词： 脑皮质;星形胶质细胞;原代培养;纯化;高内涵细胞成像分析技术(HCA);鉴定;胶质纤维酸性蛋白(GFAP)

摘要： 目的探索大鼠脑皮质星形胶质细胞(astrocyte,AS)的分离、原代培养及纯化方法,采用高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)对其进行胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)鉴定。方法取2、3 d的新生SD大鼠,体视显微镜下获取大脑皮质,机械分离成1 mm3组织碎块,采用质量分数为0. 25%的胰蛋白酶和0. 2%的胶原酶(体积比为1∶ 1)消化后进行体外培养,分别观察接种1 h、3 d、5 d后原代AS基本形态结构,酶消化3 min后,接种30 min,5 d后传代AS基本形态结构; 采用多次、多阶段的差速贴壁和震荡相结合的方法纯化细胞; 采用HCA技术对AS进行GFAP免疫细胞化学鉴定。结果采用本法培养的大鼠脑皮质星形胶质细胞,数量多、活性佳、纯度高,胞突丰富且细长,并相互交织成网,呈现典型而良好的生长状态; 经本法纯化后的星形胶质细胞,细胞纯度明显提高; 经HCA技术进行GFAP鉴定,AS纯度质量分数达98% 以上,且图片质量佳。结论建立了一种大鼠脑皮质星形胶质细胞原代培养及纯化方法,采用高内涵细胞成像分析技术进行GFAP鉴定的图片质量明显优于传统方法,该技术值得推广和应用。

语种： 中文

作者： Bu, Yiwen;Cai, Guoshuai;Shen, Yi;Huang, Chenfei;Zeng, Xi;...

期刊： Cancer Letters,2016年383(2):261-271 ISSN：0304-3835

通讯作者： Cao, Deliang;Liao, Duan-Fang

作者机构： [Huang, Chenfei; Shen, Yi; Cao, Yu; Bu, Yiwen; Cao, Deliang] Southern Illinois Univ, Sch Med, Simmons Canc Inst, Dept Med Microbiol Immunol & Cell Biol, 913 N Rutledge St, Springfield, IL 62794 USA.;[Cai, Guoshuai] Geisel Sch Med Dartmouth, Dept Genet, Hanover, NH 03755 USA.;[Zeng, Xi] Univ South China, Canc Res Inst, Hengyang 421001, Hunan, Peoples R China.;[Wang, Yuhong; Cao, Deliang; Huang, Dan; Liao, Duan-Fang; Cai, Chuan] Hunan Univ Chinese Med, State Key Lab Chinese Med Powder & Med Innovat Hu, Div Stem Cell Regulat & Applicat, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.;[Liao, Duan-Fang] Hunan Univ Tradit Chinese Med, Div Stem Cell Regulat & Applicat, 1 Xiangzui Rd, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.

通讯机构： [Cao, Deliang] S;[Liao, Duan-Fang] H;Southern Illinois Univ, Sch Med, Simmons Canc Inst, Dept Med Microbiol Immunol & Cell Biol, 913 N Rutledge St, Springfield, IL 62794 USA.;Hunan Univ Tradit Chinese Med, Div Stem Cell Regulat & Applicat, 1 Xiangzui Rd, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.

关键词： NF-kappa B RelA/p65;ABCC6;RITA;Chemoresistance

摘要： Inactivation of p53 occurs frequently in various cancers. RITA is a promising anticancer small molecule that dissociates p53-MDM2 interaction, reactivates p53 and induces exclusive apoptosis in cancer cells, but acquired RITA resistance remains a major drawback. This study found that the site-differential phosphorylation of nuclear factor-kappa B (NF-kappa B) RelA/p65 creates a barcode for RITA chemosensitivity in cancer cells. In naive MCF7 and HCT116 cells where RITA triggered vast apoptosis, phosphorylation of RelA/p65 increased at Ser536, but decreased at Ser276 and Ser468; oppositely, in RITA-resistant cells, RelA/p65 phosphorylation decreased at Ser536, but increased at Ser276 and Ser468. A phosphomimetic mutation at Ser536 (p65/S536D) or silencing of endogenous RelA/p65 resensitized the RITA-resistant cells to RITA while the phosphomimetic mutant at Ser276 (p65/S276D) led to RITA resistance of naive cells. In mouse xenografts, intratumoral delivery of the phosphomimetic p65/S536D mutant increased the antitumor activity of RITA. Furthermore, in the RITA-resistant cells ATP-binding cassette transporter ABCC6 was upregulated, and silencing of ABCC6 expression in these cells restored RITA sensitivity. In the naive cells, ABCC6 delivery led to RITA resistance and blockage of p65/S536D mutant-induced RITA sensitivity. Taken together, these data suggest that the site-differential phosphorylation of RelA/p65 modulates RITA sensitivity in cancer cells, which may provide an avenue to manipulate RITA resistance. (C) 2016 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.

语种： 英文

作者： 张秀丽;雷昌;孟盼;向韵;黄丹;...

期刊： 亚太传统医药,2016年12(15):15-18 ISSN：1673-2197

作者机构： [张秀丽; 蔡川; 向韵; 黄丹; 雷昌; 王宇红; 孟盼] 湖南中医药大学;湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地、中药粉体关键技术及装备国家地方联合工程实验室

关键词： 四妙丸;超微制剂;免疫调节

摘要： 目的：对四妙丸超微制剂与传统制剂治疗佐剂性关节炎（AA）大鼠的药效与免疫调节作用进行比较研究,为类风湿关节炎（RA）临床合理用药提供试验依据。方法：以AA大鼠为实验动物,分别设置四妙丸超微制剂高剂量组（0.71g/kg）、超微制剂低剂量组（0.18g/kg）、传统制剂（粗粉）高剂量组（2.16g/kg）、传统制剂低剂量组（0.54g/kg）,连续灌胃21天,考察四妙丸超微制剂与传统制剂对AA大鼠体重、足趾容积、脏器指数（脾脏、胸腺指数）、血清炎症因子（SOD、MDA、NO）及细胞因子IL-1β、IL-6的影响。结果：四妙丸超微制剂与传统制剂均可显著改善AA大鼠的足肿胀及炎症反应,降低血清中IL-1β、IL-6的含量,但四丸超微制剂的最小有效剂量较其妙传统制剂降低。结论：四妙丸超微制剂在改善足肿胀方面优于其传统制剂。

语种： 中文

作者： 赵洪庆;凌佳;杜青;杨蕙;王宇红

期刊： 中南药学,2016年14(10):1093-1097 ISSN：1672-2981

作者机构： [赵洪庆; 杜青; 凌佳; 王宇红] 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地;湖南中医药大学第一附属医院;[杨蕙] 中医药大学第一附属医院

关键词： 糖尿病;抑郁症;下丘脑-垂体-肾上腺轴;海马损伤

摘要： 糖尿病并发抑郁症继发于糖尿病,是其自杀率最高的慢性并发症之一。目前,糖尿病并发抑郁症发病机制主要集中在下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能异常和海马损伤两方面,2种机制互相影响,加重病情。除常规药物治疗外,心理干预和运动疗法都能改善糖尿病并发抑郁症患者的高血糖状况以及焦虑抑郁症状,多种方法联合具有更好的治疗效果。

语种： 中文

作者： 杜青;赵洪庆;王宇红;徐雅岚;杨蕙;...

期刊： 中国现代应用药学,2016年33(5):521-525 ISSN：1007-7693

作者机构： 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 长沙, 410007;湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007;[杜青; 赵洪庆; 王宇红; 徐雅岚; 孟盼] 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 湖南省中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地, 长沙, 410007;[杨蕙] 湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007

关键词： 糖尿病并发抑郁症;左归降糖解郁方

摘要： 目的针对NR受体亚型及其下游分子CaMKII、SynGAP的表达情况,探索左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马神经元突触功能可塑性的影响。方法复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型并随机分为4组:模型组,阳性药组(二甲双胍0.18 g·kg~(-1)+盐酸氟西汀1.8 mg·kg~(-1)),左归降糖解郁方高、低剂量组(32.82,8.20 g·kg~(-1)),以正常大鼠为空白对照组。采用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,Western-blotting实验检测大鼠海马NR2A、NR2B、CaMKII、 SynGAP的表达情况。结果与空白对照组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,空间探索时间减少(P<0.05),NR受体亚型NR2A、NR2B及CaMKII、SynGAP的表达明显减少(P<0.01);与模型组比较,阳性药组和左归降糖解郁方高剂量组逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),空间探索时间显著增加(P<0.05),NR2A、NR2B、CaMKII、SynGAP的表达明显增多(P<0.05或0.01)。结论左归降糖解郁方可以明显增强糖尿病并发抑郁症大鼠的学习记忆能力,改善认知功能障碍,缓解抑郁症状,该作用可能与调节海马NR受体亚型NR2A、NR2B及其下游分子CaMKII、SynGAP的表达,保护海马神经元突触功能可塑性有关。

语种： 中文