Cloning and expression of AGL19 gene in two Lonicera macranthoides varieties
作者:
Long, Yu Qing;Liu, Xia;Zeng, Juan;Li, Can;Liu, Xiang Dan* ;...
期刊:
JOURNAL OF GENETICS ,2021年100(1):1-10 ISSN:0022-1333
通讯作者:
Liu, Xiang Dan;Zhou, Ri Bao
作者机构:
[Zeng, Juan; Liu, Xiang Dan; Zhou, RB; Long, Yu Qing; Zhou, Ri Bao; Li, Can; Liu, Xia] Hunan Univ Chinese Med, Coll Pharm, Changsha 410208, Peoples R China.;[Zeng, Juan; Liu, Xiang Dan; Zhou, RB; Long, Yu Qing; Zhou, Ri Bao; Li, Can; Liu, Xia] Key Lab Germplasm Resources & Standardized Planti, Changsha 410208, Peoples R China.;[Liu, Xiang Dan] Hunan Tradit Chinese Med Piece Standardizat & Fun, Changsha 410208, Peoples R China.
通讯机构:
[Liu, XD; Zhou, RB; Liu, Xiang Dan] H;[Liu, XD; Zhou, RB] K;Hunan Univ Chinese Med, Coll Pharm, Changsha 410208, Peoples R China.;Key Lab Germplasm Resources & Standardized Planti, Changsha 410208, Peoples R China.;Hunan Tradit Chinese Med Piece Standardizat & Fun, Changsha 410208, Peoples R China.
关键词:
AGL19 gene;bioinformatics;gene cloning;plant expression vector;quantitative real-time polymerase chain reaction;Lonicera macranthoides Hand. -Mazz.
摘要:
AGLl9 is an important regulator for flowering in plants and critical in controlling the morphogenesis of flower organs. The full-length cDNAs of AGL19 in conventional Lonicera macranthoides (Lm-AGL19) and the mutant ‘Xianglei’ cultivar (Lm-XL-AGL19) were obtained using rapid amplification of cDNA ends and the expression vectors for Lm-XL-AGL19 were constructed to investigate the roles of AGL19 in the ‘Xianglei’ cultivar. Lm-AGL19 (GenBank: MK419948) and Lm-XL-AGL19 (GenBank: MK419948) were isolated from the conventional variety and ‘Xianglei’ cultivar of L. macranthoides, respectively. Lm-AGL19 is 1274 bp in length, whereas Lm-XL-AGL19 is 1264-bp long, and both include a 654 bp open reading frame, encoding 217 amino acids, which has a highly conserved MADS_MEF2_like domain and a moderately conserved K-box domain, belonging to the type II MADS-box family of genes. Quantitative real-time polymerase chain reaction indicated that the expression levels of these genes at different flowering stages were significantly different, and that the genes were also expressed in stems and leaves. Lm-XL-AGL19 is underexpressed at flowering period 5 that the key time node for corolla expansion and nonexpansion, while LM-AGL19 is overexpressed during this flowering period. AGL19 was speculated to be a functional gene causing different phenotypes in the two L. macranthoides varieties. The successfully constructed plant expression vector provides an experimental reference for further research on the function of this gene and the basis for the excellent phenotype of L. macranthoides ‘Xianglei’.
语种:
英文
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HPLC法同时测定黄花石蒜不同部位中3种生物碱
作者:
刘霞;龙雨青;曾娟;李灿;郎培蕾;...
期刊:
中成药 ,2021年43(01):132-136 ISSN:1001-1528
作者机构:
[郎培蕾; 周日宝; 龙雨青; 刘霞; 曾娟; 李灿] 湖南中医药大学药学院;湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心;[刘湘丹] 湖南中医药大学药学院<&wdkj&>湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心
关键词:
黄花石蒜;部位;石蒜碱;加兰他敏;力可拉敏
摘要:
目的建立HPLC法同时测定黄花石蒜不同部位中石蒜碱、加兰他敏、力可拉敏的含量。方法黄花石蒜甲醇溶液的分析采用Supersil ODS-B柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长石蒜碱230 nm,加兰他敏、力可拉敏289 nm。结果石蒜碱、加兰他敏、力可拉敏分别在10~360μg/mL(r=0.999 6)、5~180μg/mL(r=0.999 8)、2.5~90μg/mL(r=0.999 7)范围内线性范围良好,平均加样回收率分别为98.92%(RSD 1.69%)、96.76%(RSD 1.01%)、99.30%(RSD 1.89%)。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于黄花石蒜的质量控制。
语种:
中文
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不同来源百合HPLC指纹图谱建立
作者:
刘湘丹;陈娅;刘霞;周日宝;裴刚;...
期刊:
中成药 ,2020年42(8):2195-2200 ISSN:1001-1528
作者机构:
湖南中医药大学药学院,湖南长沙410208;湘户大宗道地药材种质资源及规范化种植重点研究室,湖南长沙410208;湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心,湖南长沙410208;中国医学科学院北京协和医学院药物研究所,北京100050
关键词:
卷丹百合;龙牙百合;细叶百合;兰州百合;金百合;指纹图谱
摘要:
目的 建立不同来源百合HPLC指纹图谱.方法 百合75%甲醇提取物的分析采用Supersil ODS-B 100 A柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长310 nm.结果 20批卷丹百合样品指纹图谱中有10个共有峰,相似度0.964~0.997;10批龙牙百合样品指纹图谱中有5个共有峰,相似度0.986~0.999之间;不同来源品种间相似度均小于0.9.结论 该方法准确可靠,重复性好,可区分卷丹百合、龙牙百合、细叶百合、兰州百合及百合药材混伪品金百合.
语种:
中文
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忽地笑不同器官RNA提取方法比较研究
作者:
樊青玲;周日宝;刘湘丹;陈娅
期刊:
安徽农业科学 ,2020年48(18):169-172 ISSN:0517-6611
作者机构:
常德职业技术学院,湖南常德415000;湖南中医药大学,湖南长沙410000
关键词:
忽地笑;不同器官;RNA提取方法
摘要:
[目的]建立忽地笑不同器官总RNA最佳提取方法.[方法]以忽地笑鳞茎、叶、花葶和花器官为材料,分别用普通试剂盒法、多糖多酚试剂盒法、Trizol法、SDS法和CTAB法进行不同器官总RNA提取方法比较.[结果]忽地笑不同器官最佳RNA提取方法不同,仅Trizol法能提取出鳞茎中RNA,普通试剂盒法和CTAB法均能提取出叶和花器官高质量RNA,多糖多酚试剂盒法和CTAB法能提取出花葶高质量RNA.[结论]普通试剂盒法是忽地笑叶和花的最快速、最简便的提取方法;多糖多酚试剂盒法是提取花葶的最佳提取方法;CTAB法能有效去除多糖、多酚,适合忽地笑叶、花葶和花中总RNA提取;试剂盒法和CTAB法均能提取高质量RNA,满足RT-PCR及后续试验的要求.
语种:
中文
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思维导图在药用植物保护学教学中的应用
作者:
王志辉;刘笑蓉;周日宝
期刊:
安徽农学通报 ,2020年26(15):176-178 ISSN:1007-7731
作者机构:
湖南中医药大学,湖南长沙 410208
关键词:
思维导图;药用植物保护学;教学
摘要:
药用植物保护学是中药资源与开发专业的一门核心专业基础课,课程知识点较分散,知识点的系统比较和纵横联系是该课程学习的关键。为应对信息时代给教学带来的变化,将思维导图引入药用植物保护学教学过程中,旨在培养学生自主整合知识并构建知识体系,从而提高学生自主创新能力,探索出一种更简单、便捷、高效的教学模式。
语种:
中文
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混合式教学模式背景下药用植物学课程改革探索
作者:
王志辉;刘笑蓉;刘湘丹;周日宝
期刊:
教育教学论坛 ,2020年(50):142-144 ISSN:1674-9324
作者机构:
湖南中医药大学 药学院,湖南 长沙 410208;[刘湘丹; 刘笑蓉; 周日宝; 王志辉] 湖南中医药大学
关键词:
混合式教学;药用植物;教学改革
摘要:
药用植物学是中药学、药学类专业重要的基础课,其实践性强,理论知识枯燥难记,学生学习主动性不强,学习效果差。为调动学生学习积极性,充分发挥其在学习过程中的主体作用,基于"互联网+"背景下,利用线上平台和优质的教学资源创造一个新型混合式教学模式,借助思维导图促进学生知识结构化自主构建,从而提高教学质量。
语种:
中文
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人工栽培黄花石蒜乙醇提取物HPLC指纹图谱研究
作者:
王姣;刘霞;刘湘丹;周日宝
期刊:
中国民族民间医药 ,2020年29(6):14-18 ISSN:1007-8517
作者机构:
湘潭医卫职业技术学院,湖南湘潭 411104;湖南中医药大学药学院,湖南长沙 410208
关键词:
黄花石蒜;花;加兰他敏;高效液相;指纹图谱
摘要:
目的:建立人工栽培黄花石蒜乙醇提取物HPLC指纹图谱。方法:黄花石蒜乙醇提取物的分析采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(4. 6×250 mm,5μm);流动相:甲醇(A)-水(含0. 1%磷酸,B),梯度洗脱见表2;柱温:30℃;紫外检测波长:238 nm;流速:1. 0 m L/min。结果:以加兰他敏为参照峰,确定了13个特征峰,10批样品指纹图谱相似度均在0. 9以上。结论:此方法操作简单,准确可靠,可为黄花石蒜鉴别及内在质量评价提供参考依据。
语种:
中文
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灰毡毛忍冬LmC3H1基因的克隆及表达模式与绿原酸含量相关性分析
作者:
陈娅;王安琪;刘聪;龙雨青;刘霞;...
期刊:
中国实验方剂学杂志 ,2020年26(9):167-175 ISSN:1005-9903
作者机构:
湖南中医药大学药学院,长沙 410208;湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心,长沙410208
关键词:
灰毡毛忍冬;对-香豆酸3-羟化酶(C3H);基因克隆;生物信息学;表达分析;含量测定
摘要:
目的:以灰毡毛忍冬为材料,克隆对-香豆酸3-羟化酶(LmC3H1)基因,进行生物信息学和表达模式分析,结合绿原酸含量,研究推测灰毡毛忍冬LmC3H1基因的功能。方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和RACE技术克隆LmC3H1基因的全长cDNA序列,对该序列进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和HPLC分别测定灰毡毛忍冬茎、叶及不同花期花中LmC3H1的相对表达量及绿原酸含量。结果:克隆得LmC3H1(GenBank:MN177695)基因,开放阅读框(ORF)长度为1 533 bp,编码510个氨基酸,推测其分子式为C_(2618)H_(4134)N_(718)O_(727)S_(22),相对分子质量为58 005.32,等电点8.92,为亲水性蛋白,定位于叶绿体中,具有跨膜区域LLLIPAVLFLISLVYPLI,含有细胞色素P450的保守结构域CYTOCHROME_P450(422-433 aa);Real-time PCR结果显示,LmC3H1在灰毡毛忍冬茎、叶及不同花期花有不同程度的表达,其中在花发育阶段,白色花蕾期相对表达量最高,花蕾初期及白色开花期次之;白色花蕾期花与茎、叶比,花的相对表达量最高,叶的最低;HPLC结果显示,从绿白色花蕾期到金黄色开花期绿原酸含量呈上升趋势,金黄色开花期含量最高,不同器官中,花中绿原酸最高,茎最低。结论:克隆得到灰毡毛忍冬LmC3H1基因,推测LmC3H1可能参与灰毡毛忍冬花绿原酸的生物合成。该研究为进一步研究该基因的功能及探究灰毡毛忍冬绿原酸生物合成和调节机制提供了依据,同时为遗传改良灰毡毛忍冬品质奠定了基础。
语种:
中文
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灰毡毛忍冬LmPAL1基因的克隆及表达分析
作者:
陈勋;刘畅宇;陈娅;龙雨青;童巧珍;...
期刊:
中草药 ,2019年50(1):178-187 ISSN:0253-2670
通讯作者:
Zhou, R.-B.
作者机构:
湖南中医药大学药学院, 湖南, 长沙, 410208;湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心, 湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410208;[陈勋] 陈勋;[童巧珍] 童巧珍;[刘畅宇] 刘畅宇
通讯机构:
[Zhou, R.-B.] C;College of Pharmacy, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, China
关键词:
灰毡毛忍冬;苯丙氨酸解氨酶(PAL);基因克隆;生物信息学;表达分析
摘要:
目的 克隆灰毡毛忍冬苯丙氨酸解氨酶(LmPAL1)基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析.方法 提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和RACE技术克隆LmPAL1基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶和不同花期花中该基因的相对表达量.结果 克隆的LmPAL1基因开放阅读框(ORF)长度为2 145bp,编码714个氨基酸,生物信息学分析预测为亲水性蛋白,定位于叶绿体中,包含PAL shielding结构域(527~641 aa),并且含有PAL/HAL活性中心序列GT兀TASGDLVPLSYIAG(196~212 aa),与其他LmPAL1具有较高的相似度;LmPALl基因qRT-PCR结果显示,7个花期材料以金黄色开花期相对表达量较高;与茎、叶比,白色花蕾期花的相对表达量最高,叶的最低.结论 成功克隆了LmPAL1基因,为进一步研究该基因的功能以及遗传改良灰毡毛忍冬品质奠定基础,同时为探究灰毡毛忍冬绿原酸生物合成和调节机制提供了依据.
语种:
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乙烯生物合成及信号转导途径中介导花衰老相关基因的研究进展
作者:
刘畅宇;陈勋;龙雨青;陈娅;刘湘丹;...
期刊:
生物技术通报 ,2019年35(3):171-182 ISSN:1002-5464
作者机构:
湖南中医药大学药学院, 长沙, 410208;湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心, 湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心, 长沙, 410208;[陈娅; 刘湘丹; 周日宝; 龙雨青; 陈勋; 刘畅宇] 湖南中医药大学
关键词:
乙烯生物合成;乙烯信号转导;花衰老;基因调控
摘要:
乙烯为植物重要内源激素,参与植物多项生命活动,在花发育及衰老进程中起重要调节作用。在花卉中,研究者可通过调控其乙烯生物合成及信号转导途径相关基因影响内源乙烯生成,继而影响其发育与衰老进程。目前,通过调控内源乙烯延长花期的研究主要应用于观赏花卉,对于药用等其他花类应用尚少。对乙烯生物合成和信号转导途径模型及其相关基因的互作模式、近年来乙烯反应中介导花发育与衰老相关基因克隆及调控的相关研究进行综述,以期将通过调控内源乙烯途径相关基因来延缓植物花期的研究应用于其他花期短的观赏切花、花类药材等,为从基因水平调控内源乙烯以获得花期延长的观赏、药用花类等优良育种提供参考。
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中文
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不同来源百合药材的质量评价及分析
作者:
刘湘丹;陈勋;刘畅宇;裴刚;周日宝;...
期刊:
湖南中医药大学学报 ,2019年39(04):480-484 ISSN:1674-070X
作者机构:
湖南中医药大学药学院,湖南 长沙 410208;湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心,湖南 长沙 410208;湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208;中国医学科学院北京协和医学院药物研究所,北京 100050;[刘湘丹; 周日宝; 王智; 陈勋; 刘畅宇; 陈乃宏; 裴刚] 湖南中医药大学
关键词:
百合;水分;浸出物;多糖;含量测定;质量评价
摘要:
目的 基于水分、浸出物、多糖、Regaloside A含量进行不同来源百合药材质量评价及分析,为多基原百合药材鉴别及质量评价提供依据.方法 按照2015版《中华人民共和国药典》方法测定水分、浸出物;采用紫外分光光度法测定百合多糖含量;采用高效液相色谱法测定Regaloside A含量:Supersil ODS-B(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温为30℃,进样量为10μL,流速为1.0 mL/min,流动相0.1%磷酸水溶液:乙腈=85:15(V/V),检测波长为310 nm.结果 54批百合样品水分均≤13%;43批百合样品浸出物≥18%,11批百合样品浸出物<18%;54批百合样品多糖含量区间为9.89%~23.42%;54批百合样品Regaloside A含量区间为0.019%~0.599%.结论 所有百合样品水分均符合药典要求;11批百合药材浸出物未达到药典要求,且均为龙牙百合药材;17批百合多糖含量未达湖南省地方标准;卷丹百合浸出物和Regaloside A含量均普遍高于市购龙牙百合药材.该研究为市场药用百合以卷丹百合为主提供了佐证,为不同来源百合鉴别及百合药材质量控制提供了参考依据.
语种:
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不同品种灰毡毛忍冬ACS3基因克隆、表达及生物信息学分析
作者:
刘畅宇;陈勋;陈娅;龙雨青;童巧珍;...
期刊:
中草药 ,2019年50(9):2154-2164 ISSN:0253-2670
通讯作者:
Liu, X.-D.
作者机构:
湖南中医药大学药学院, 湖南, 长沙, 410208;湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心, 湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心, 湖南, 长沙, 410208;[陈勋] 陈勋;[童巧珍] 童巧珍;[刘畅宇] 刘畅宇
通讯机构:
[Liu, X.-D.] C;College of Pharmacy, China
关键词:
灰毡毛忍冬;乙烯生物合成;1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶;基因克隆;生物信息学;实时荧光定量PCR
摘要:
目的 分别克隆灰毡毛忍冬野生型与湘蕾型ACS3基因,并进行生物信息学和表达模式分析.方法 筛选灰毡毛忍冬转录组数据库中与ACS蛋白同源性较高的Unigene序列,设计引物,利用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)及RACE技术对该Unigene进行全长克隆;用生物信息学软件分析蛋白的理化性质、结构域和同源性等特性;借助qRT-PCR检测1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(ACS3)基因在不同品种、不同花期灰毡毛忍冬中表达模式.结果 从灰毡毛忍冬野生品种及湘蕾品种中分别克隆得Lm-ACS3 (GenBank:MH724196)及Lm-XL-ACS3 (GenBank:MH724197),开放阅读框长度均为1 452 bp,编码483个氨基酸,包含保守的Aminotran_1_2结构域,与其他植物的ACC合酶具较高相似度;qRT-PCR结果显示,野生型ACS3基因不同花期间表达差异显著,从花期3开始呈整体明显上升趋势,湘蕾型中花期间表达差异相对较小.结论 分别克隆得到灰毡毛忍冬野生型和湘蕾型ACS3基因,该基因在2品种中具不同表达模式;推测ACS3基因或为导致灰毡毛忍冬不同品种间差异表型的可能功能基因之一,为进一步验证该基因在调控蕾期长短及花表型的生物学功能提供实验基础.
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基于响应面法优化白及原球茎液体培养基
作者:
王艳;陈勋;李灿;娄婷;周日宝
期刊:
湖南中医药大学学报 ,2019年39(02):190-194 ISSN:1674-070X
作者机构:
[娄婷; 王艳; 周日宝; 陈勋; 李灿] 湖南中医药大学
关键词:
白及;原球茎;响应面;BBD设计;诱导率
摘要:
目的 采用响应面优化(Box-Behnken design,BBD)法优选白及原球茎液体培养基,提高白及种子萌发形成原球茎的诱导率.方法 采用3水平4因素设计BBD实验,在30 g/L的蔗糖溶液中添加大量元素(MS)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)和玉米素(ZT)作为白及原球茎液体培养基,并通过响应面法优选4种添加物浓度配比.结果 BBD实验模型设计成功可用于响应面结果优化,经响应面优化后,在1 mg/L MS、2 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA、0.07 mg/L ZT条件下,白及原球茎诱导率可达(93.13±0.34)%,与预测值95.38%差异无统计学意义(P>0.05).白及原球茎直播种苗存活率良好,长出的叶片数、植株高度、茎长及茎宽均超过种子直播种苗的数值.结论 在基本液体培养基中合理配比4种天然添加物可提高白及原球茎诱导率,进而提高种子萌发率.
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不同镉污染程度地区药用植物镉低积累品种大田筛选
作者:
刘笑蓉;王志辉;刘湘丹;王智;王朝晖;...
期刊:
中医药导报 ,2018年24(2):20-23 ISSN:1672-951X
作者机构:
湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208
关键词:
镉污染;低积累;药用植物品种;筛选
摘要:
目的:在不同重金属镉污染地区筛选出镉低积累药用植物品种.方法:采用大田筛选实验及方差分析方法.结果:重度污染地区车前、夏枯草、薏苡、决明、白扁豆;中轻度污染地区薄荷、车前、夏枯草、桔梗、薏苡、黑芝麻、白扁豆、决明中镉含量≤0.3 mg/kg,符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》.结论:可以在镉轻、重度污染的地区种植合适的镉低积累的药用植物品种代替水稻等镉高积累的粮食作物,生产出合格的中药材,使镉污染地区农田得到更好地利用.
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百合药材质量标准研究进展
作者:
刘畅宇;周日宝;陈勋;陈娅;刘湘丹;...
期刊:
中医药导报 ,2018年24(16):117-120,123 ISSN:1672-951X
作者机构:
湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208
关键词:
百合;质量标准;有效成分;指纹图谱;研究进展
摘要:
通过综述百合药材的性状、显微及薄层色谱鉴别, 水分、灰分及浸出物含量等质控指标, 主要活性成分及指纹特征图谱的研究近况, 为中药百合标准化提供理论基础, 以期进一步为规范和完善百合药材质量标准提供参考.
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中药传统技能大赛中中药炮制项目培训体会
作者:
樊青玲;王虹;陈靖;任旻琼;张平;...
期刊:
卫生职业教育 ,2018年36(17):27-29 ISSN:1671-1246
作者机构:
常德职业技术学院,湖南 常德,415000;湖南中医药大学药学院,湖南 长沙,410208
关键词:
中药传统技能大赛;中药炮制项目;培训
摘要:
中药炮制项目是中药传统技能大赛项目之一。本文对中药炮制项目培训中存在的问题进行总结和分析。
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金钱草及其混伪品的微性状鉴定
作者:
李飞艳;周日宝;刘群群
期刊:
海峡药学 ,2018年30(7):39-41 ISSN:1006-3765
作者机构:
[李飞艳; 刘群群] 湖南中医药高等专科学校;湖南中医药大学药学院;[周日宝] 湖南中医药大学
关键词:
金钱草;广金钱草;聚花过路黄;微性状;性状鉴定
摘要:
目的 采用微性状鉴定法对金钱草及其常见的两种混伪品广金钱草、聚花过路黄进行鉴别.方法 采用体视显微镜分别对金钱草、广金钱草、聚花过路黄的叶表面及茎的表面与断面进行鉴别研究.结果 金钱草、广金钱草、聚花过路黄在茎的表面、断面,以及叶端、叶基、叶缘、表面附属物等方面的微性状特征有明显区别,其中金钱草表面的褐色条纹、聚花过路黄表面的棕红色腺点清晰可见.结论 中药微性状鉴定法能很好的区别金钱草及其混伪品广金钱草、聚花过路黄,且操作简单、实用.
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灰毡毛忍冬Lm-XL-AP1基因克隆、生物信息学和时空表达分析
作者:
彭美晨;刘湘丹;徐玉琴;王珊;刘畅宇;...
期刊:
中草药 ,2018年49(7):1652-1660 ISSN:0253-2670
通讯作者:
Zhou, R.-B.
作者机构:
[彭美晨; 刘畅宇; 陈勋; 周日宝; 刘湘丹] 湖南中医药大学药学院;[刘湘丹] 湖南省中药饮片标准化及功能技术研究中心;[徐玉琴] 湖南中医药大学第一附属医院;[王珊] 湖南中医药大学第二附属医院
通讯机构:
[Zhou, R.-B.] C
关键词:
灰毡毛忍冬;Lm-XL-AP1基因;生物信息学;荧光定量;克隆
摘要:
目的克隆灰毡毛忍冬突变型品种AP1基因(Lm-XL-AP1),并对其进行生物信息学和时空表达分析。方法通过RACE技术克隆Lm-XL-AP1基因全长,运用生物信息学的方法进行基因同源性和相似性比较分析,预测其编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析。运用荧光定量PCR(q RT-PCR)检测该基因在灰毡毛忍冬突变型植株不同花期和不同器官的相对表达量。结果获得AP1基因,开放阅读框(ORF)长729 bp,编码242个氨基酸,与甘菊中MADS-box基因家族AP1基因相似性达80%,且包含MADS和K-box的保守序列。AP1蛋白无跨膜区域,定位于细胞核中;在灰毡毛忍冬突变型植株第6花期相对表达量最高,同时茎、叶中也有表达。结论成功从灰毡毛忍冬突变型植株总RNA中克隆到可能参与控制花器官表达的AP1基因。
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Molecular cloning and spatiotemporal expression of APETALA1-like gene in Lonicera macranthoides
作者:
Wang, Shan;Peng, Mei Chen;Chen, Xun;Liu, Chang Yu;Chen, Ya;...
期刊:
Journal of Genetics ,2018年97(5):1281-1288 ISSN:0022-1333
通讯作者:
Liu, Xiang Dan;Zhou, Ri Bao
作者机构:
[Liu, Xiang Dan; Zhou, RB; Liu, Chang Yu; Zhou, Ri Bao; Chen, Xun; Chen, Ya; Peng, Mei Chen; Wang, Shan] Hunan Univ Chinese Med, Coll Pharm, Changsha, Hunan, Peoples R China.;[Wang, Shan] Hunan Univ Chinese Med, Affiliated Hosp 2, Pharm, Changsha, Hunan, Peoples R China.
通讯机构:
[Liu, XD; Zhou, RB] H;Hunan Univ Chinese Med, Coll Pharm, Changsha, Hunan, Peoples R China.
关键词:
APETALA1 gene;bioinformatics;fluorescence quantification;cloning;Lonicera macranthoides Hand;-Mazz
摘要:
APETALA1 (AP1), a floral meristem identity gene controls the flowering time and floral transition, and plays an important role in inflorescence and floral organ development. The full-length cDNA for AP1 was obtained by rapid amplification of the cDNA ends (RACE) so that the roles of AP1 in Lonicera macranthoides (Lm-AP1) could be better understood. AP1 (accession number in GenBank: MF418642) consisted of a 729-bp open reading frame encoding a protein that contained 242 amino acids, had a deduced molecular mass of 27.9919 kDa and a theoretical isoelectric point of 8.75. No signal peptide or transmembrane domains were detected in the sequences located in the nucleus, but it contained conserved sequences for MADS and the K-box. In the secondary structure, the α-helix accounts for 60.74%, the β-turn 3.72%. The real-time polymerase chain reaction revealed that AP1 was more highly expressed in flowers, especially at the fourth flowering stage, which implied that it may play a role in flower development. Other L. macranthoides organs, such as stems and leaves, also expressed AP1. This research provided the basis for further analysis of the AP1 functional mechanism during L. macranthoides development. © 2018, Indian Academy of Sciences.
语种:
英文
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白及种子繁育的研究现状
作者:
陈勋;王艳;刘畅宇;陈娅;刘湘丹;...
期刊:
中国药房 ,2018年29(18):2585-2588 ISSN:1001-0408
作者机构:
湖南中医药大学药学院,长沙,410208
关键词:
白及种子;共生萌发;非共生萌发;直播萌发;人工种子
摘要:
目的:为促进白及种子繁育、解决种苗短缺问题提供参考。方法:以"白及种子""组织培养""人工种子""Bletilla striata seed""Tissue culture""Artificial seed"等为关键词,组合检索1990年8月-2018年1月发表并收录于中国知网、万方、Pub Med等数据库的相关文献,就白及种子特点以及共生萌发、非共生萌发、直播萌发、人工种子等相关研究情况进行归纳,综述其繁育研究现状。结果与结论:共检索到相关文献98篇,其中有效文献53篇。白及种子在自然条件下萌发率低,且长期采用传统繁殖(块茎分割)方式可导致其种性退化,故可通过共生萌发、非共生萌发、直播萌发、人工种子等人工繁育方式来解决白及种苗短缺等问题。其中,白及种子与真菌的共生萌发可提高种子的萌发率并促进其后期的生长发育,共生真菌包括镰刀菌、丛赤壳属真菌、拟茎点霉菌等。非共生萌发包括固体和液体培养两种方式,种子萌发的关键在于培养基(以固体培养基为主)、激素(6-苄基胺基嘌呤、萘乙酸等)和其他添加物(马铃薯、活性炭等)。非共生萌发的相关研究较多,但所耗人力、物力大,成本较高,需提前炼苗,且所得种苗生长缓慢。直播萌发的关键在于基质土的配比,具有成本较低、炼苗时间短、耗种量大、易出现大量死苗等特点。白及人工种子可以较低成本大量获取,但其制作过程烦琐,难以实现大批量生产。后续研究应深入发掘优势基因品种、加强共生真菌筛选及探讨共生真菌协同作用、完善直播萌发技术,将共生萌发与直播萌发相结合,以进一步提高白及种子的萌发率。
语种:
中文
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