Graphene oxide-based fluorometric determination of methicillin-resistant Staphylococcus aureus by using target-triggered chain reaction and deoxyribonuclease-assisted recycling
作者:
Ning, Yi
( 宁毅 ) ;Zou, Li;Gao, Qiang
( 高强 ) ;Hu, Jue
* ( 胡珏 ) ;Lu, Fangguo
( 卢芳国 )
期刊:
Microchimica Acta ,2018年185(3):1-8 ISSN:0026-3672
作者机构:
[Ning, Yi; Zou, Li; Gao, Qiang; Hu, Jue; Lu, Fangguo; Lu, FG] Hunan Univ Chinese Med, Dept Microbiol, Sch Med, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.;[Lu, Fangguo; Lu, FG] Univ Innovat Team Hunan Prov, Key Discipline Pathogen Biol, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.
通讯机构:
[Hu, J; Lu, FG ] H;Hunan Univ Chinese Med, Dept Microbiol, Sch Med, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.;Univ Innovat Team Hunan Prov, Key Discipline Pathogen Biol, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.
关键词:
deoxyribonuclease I;DNA;graphite;oxide;RNA 16S;chemistry;genetic procedures;genetics;isolation and purification;limit of detection;methicillin resistant Staphylococcus aureus;nucleic acid hybridization;nucleotide sequence;procedures;spectrofluorometry;Base Sequence;Biosensing Techniques;Deoxyribonuclease I;DNA;Graphite;Limit of Detection;Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus;Nucleic Acid Hybridization;Oxides;RNA, Ribosomal, 16S;Spectrometry, Fluorescence
摘要:
The authors describe a method for the fluorometric determination of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) by exploiting target-triggered chain reactions and deoxyribonuclease I (DNase I)-aided target recycling. It is making use of a carboxy-fluorescein (FAM)-labeled single-stranded probe containing two sections. One is complementary to the 5′ terminus of the target, while the 3′ terminus of the other target is adsorbed on the surface of graphene oxide (GO) via π-stacking interactions without the target (16S rRNA). This adsorption results in quenching of the fluorescence of the label and protects it from being cleaved by DNase I. However, upon addition of the target, DNA/RNA hybrids are repelled by GO. This leads to fluorescence recovery as measured at excitation/emission wavelengths of 480/514nm due to a chain reaction that is triggered by the target. The signal is strongly amplified by using DNase I-mediated target recycling. The 16S rRNA of MRSA can be detected by this method in the 1 to 30nM concentration range, and the detection limit is 0.02nM. The method was applied to analyze bacterial samples, and the detection limit is as low as 30 CFU. mL−1. The assay is highly sensitive and selective and in our percpetion has a large potential in diagnosis of drug-resistant bacteria. [Figure not available: see fulltext.]. © 2018, Springer-Verlag GmbH Austria, part of Springer Nature.
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英文
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小檗碱体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性的研究
期刊:
湖南中医药大学学报 ,2018年38(3):254-256 ISSN:1674-070X
作者机构:
[魏科; 宁毅; 高强; 陈伶利; 卢芳国; 向琴; 胡珏; 李玲] 湖南中医药大学
关键词:
小檗碱;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;生物膜
摘要:
目的研究小檗碱体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)活性。方法运用琼脂扩散法、液体稀释法测定并分析小檗碱对MRSA的抑菌环大小、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);运用96孔酶标板结晶紫法测定并分析小檗碱对MRSA的最小生物膜清除浓度(MBEC)。结果与DMSO比较,小檗碱与氯霉素(阳性对照药物)可显著增加MRSA的抑菌环半径(P<0.01),小檗碱对MRSA的MIC为0.2 mg/m L,MBC为0.4 mg/m L;小檗碱对MRSA的MBEC为0.2 mg/m L。结论小檗碱对MRSA有比较明显的抗菌、抑菌作用,其效应机制可能与其抑制细菌生物膜的形成有关。
语种:
中文
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麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药抗A型流感病毒效应研究
期刊:
中华中医药杂志 ,2017年32(9):4163-4167 ISSN:1673-1727
作者机构:
湖南中医药大学第一附属医院, 长沙, 410007;湖南中医药大学中医学院, 长沙, 410208;湖南中医药大学医学院, 长沙, 410208;[李玲] 湖南中医药大学中医学院, 长沙, 410208;[魏科; 高强; 张波; 杨胜辉; 蔡锐; 卢芳国] 湖南中医药大学医学院, 长沙, 410208
关键词:
麻杏石甘汤;奥司他韦;流感病毒;中西医结合
摘要:
目的:探讨麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药抗A型流感病毒的实验效应。方法:①以血清药理学实验技术检测联合用药的含药血清体外对流感病毒感染MDCK细胞活性和流感病毒神经氨酸酶(NA)活性的影响。②以整体动物实验技术检测联合用药体内对流感病毒感染小鼠体质量、肺指数、肺组织病理变化的影响。结果:①各含药血清组MDCK细胞活性OD值较病毒对照组显著升高(P<0.01),流感病毒NA活性较病毒对照组显著下降(P<0.01)。联合用药组体外抗A型流感病毒效应显著优于麻杏石甘汤组(P<0.01)。②各治疗组小鼠肺指数较病毒对照组显著降低(P<0.01),肺组织病理变化损伤得到不同程度改善,其中联合用药组肺组织病理变化改善程度显著优于麻杏石甘汤组。结论:麻杏石甘汤与奥司他韦联合应用,具有较明显的协同增效作用。
语种:
中文
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利用课外研究论文写作竞赛提升大学生创新性学习能力
期刊:
课程教育研究 ,2017年(34):77-77 ISSN:2095-3089
作者机构:
湖南中医药大学医学院
关键词:
课外研究论文;竞赛;创新性学习
摘要:
为提升大学生的创新性学习能力,我们依托《医学微生物学》课程,利用本学年开授这门课程的班级学生举行研究论文写作竞赛。从活动的宗旨、组织方法、比赛形式、结果判定、效果评估等方面进行了系统阐述,并指出该活动的举行提升了大学生创新性学习能力,并深化了课程教学体系改革。
语种:
中文
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《免疫学基础与病原生物学》中西医结合一体化教学的实践与体会
期刊:
课程教育研究 ,2017年(40):208-209 ISSN:2095-3089
作者机构:
湖南中医药大学医学院
关键词:
中西医结合;一体化教学;教学改革
摘要:
《免疫学基础与病原生物学》是面向中医、中西医结合等专业的开设的一门必修专业基础课程,但是存在教学难度大、教学任务重、学生难以理解等教学困难。本文就中西医结合一体化教学在中西医临床医学专业该课程教学改革中的应用与体会进行总结,以进一步促进其教学质量的提升。
语种:
中文
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基于TLR4-MyD88-TRAF6信号通路的麻杏石甘汤抗A型流感病毒感染小鼠所致的病毒性肺损伤研究
期刊:
中草药 ,2017年48(8):1591-1596 ISSN:0253-2670
通讯作者:
Lu, F.-G.
作者机构:
湖南中医药大学中医学院, 湖南, 长沙, 410208<&wdkj&> 湖南中医药大学医学院, 湖南, 长沙, 410208<&wdkj&> 湖南省疾病预防控制中心微生物检验科, 湖南, 长沙, 410208<&wdkj&> 湖南中医药大学研究生学院, 湖南, 长沙, 410208<&wdkj&> 湖南中医药大学药学院, 湖南, 长沙, 410208;[李玲] 湖南中医药大学中医学院, 湖南, 长沙, 410208;[魏科; 高强; 张波; 卢芳国] 湖南中医药大学医学院, 湖南, 长沙, 410208;[蔡亮] 湖南省疾病预防控制中心微生物检验科, 湖南, 长沙, 410208;[张世鹰] 湖南中医药大学研究生学院, 湖南, 长沙, 410208
通讯机构:
Medical College, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, China
关键词:
麻杏石甘汤;Toll样受体4;A型流感病毒;病毒性肺损伤;肿瘤坏死因子-α;白细胞介素-1β;白细胞介素-6
摘要:
目的探索Toll样受体4(TLR4)在A型流感病毒所致肺组织损伤中的影响,并进一步探讨麻杏石甘汤的干预作用。方法以A型流感病毒滴鼻感染WT型小鼠为研究对象,实验设麻杏石甘汤低、中、高剂量(1.4、2.8、5.6 g/kg)组、奥司他韦(21.63 mg/kg)组、模型组和对照组,ig给予相应药物5 d后,处理动物。常规法检测小鼠体质量,计算肺指数、脾指数、胸腺指数,观察肺组织病理变化,ELISA法检测肺泡灌洗液中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的量,real-time PCR(RT-PCR)法和Western blotting法检测肺组织中TLR4、MyD88、TRAF6 mRNA和蛋白的表达。结果麻杏石甘汤能上调A型流感病毒感染小鼠的体质量、脾指数、胸腺指数,改善肺组织病理损伤,降低肺泡灌洗液中促炎因子水平,下调肺指数和肺组织中MyD88、TRAF6 mRNA和蛋白表达量,且存在一定的量效关系。其中麻杏石甘汤中、高剂量组的疗效与奥司他韦接近。结论麻杏石甘汤作为有效的抗流感病毒中药复方,能有效地减轻肺部炎症、保护免疫器官、调节细胞因子平衡,其可能的作用机制是通过抑制TLR4-MyD88-TRAF6信号通路的激活而缓解A型流感病毒感染小鼠所致的肺损伤。
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中文
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五倍子含药血清对呼吸合胞病毒感染人支气管上皮细胞损伤及NF-κB核转位和表达的影响
作者:
李玲
( 李玲 ) ;吴东升;刘璐
( 刘璐 ) ;张彧;卢芳国
( 卢芳国 ) ;...
期刊:
中华中医药杂志 ,2017年32(2):790-793 ISSN:1673-1727
作者机构:
湖南中医药大学中医学院, 长沙, 410208;湖南中医药大学中西结合学院, 长沙, 410208;湖南中医药大学医学院, 长沙, 410208;湖南中医药大学第一临床医学院, 长沙, 410208;[李玲; 刘璐] 湖南中医药大学中医学院, 长沙, 410208
关键词:
呼吸道合胞病毒;人支气管上皮细胞;核转录因子-κB;五倍子;含药血清;核转位
摘要:
目的:探讨五倍子含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染人支气管上皮细胞损伤及细胞核因子-κB(NF-κB)核转位和表达的影响。方法:实验分为正常组、病毒处理组、含药血清组,给予相应处理后,进行指标检测。结果:病毒处理组在细胞内病毒核酸的相对表达量和对细胞增殖的抑制率随着浓度的增加而增加,且出现明显的晚期凋亡现象,含药血清能明显抑制上述现象;免疫荧光和Western blot结果显示,RSV感染后NF-κB发生了核转位,而含药血清能明显抑制NF-κB的核转位。结论:五倍子含药血清能抑制RSV病毒的复制,同时通过抑制NF-κB发生核转位,抑制RSV诱导的人支气管上皮细胞的凋亡,进而降低细胞增殖的抑制率。
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中文
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PBL+LBL教学模式在人体寄生虫学教学中的应用
期刊:
课程教育研究 ,2017年(37):234-235 ISSN:2095-3089
作者机构:
湖南中医药大学医学院
关键词:
“PBL+LBL教学模式”;人体寄生虫学;教学质量
摘要:
为了提高《人体寄生虫学》课程的教学质量,我们融合PBL和LBL教学法的优点,对该课程采用PBL+LBL教学模式教学探索。实践证明,PBL+LBL教学法能激发学生学习兴趣,培养学生分析解决实际问题以及知识整合的能力,采用此种教学模式最终提高了这门课程的教学质量。
语种:
中文
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PBL教学法在人体寄生虫学课程教学中的应用
期刊:
求知导刊 ,2016年(23):129-130 ISSN:2095-624X
作者机构:
[高强; 胡珏; 陈伶利; 蔡锐] 湖南中医药大学
关键词:
PBL教学法;人体寄生虫学;教学改革
摘要:
为了探讨PBL教学法在人体寄生虫学教学中的可行性,我们在人体寄生虫学教学中引进PBL教学方法,结果显示该教学模式可以明显提高学生的自学能力、合作能力与交流解决问题的能力,并能极大地激发学生的学习热情,提高学习效果,说明在人体寄生虫学的教学方法中,PBL教学法是值得肯定与研究推广的方法.>>详细
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中文
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PBL教学法在免疫学基础与病原生物学课程教学中的应用
期刊:
知识文库 ,2016年(17):201 ISSN:1002-2708
作者机构:
湖南中医药大学
摘要:
<正>为了探讨PBL教学法在《免疫学基础与病原生物学》课程教学中的可行性。我们在教学中引进PBL教学方法,结果显示该教学模式可以明显提高学生的自学能力、合作能力与交流解决问题的能力,并能极大地激发学生的学习热情,提高学习效果,说明在《免疫学基础与病原生物学》课程的教学方法中,PBL教学法是一值得肯定与研究推广的方法。PBL(Problem Based Learning)教学法即以问题为基础
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中文
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中医类专业《免疫学基础与病原生物学》课程课时精简后教学改革初探
期刊:
教育现代化 ,2016年(24):46-47+50 ISSN:2095-8420
作者机构:
湖南中医药大学医学院;[魏科; 宁毅; 高强; 陈伶利; 卢芳国] 湖南中医药大学
关键词:
免疫学基础与病原生物学;精简;调整
摘要:
为了培养新时代的应用型中医人才,我校对中医类课程教学大纲进行了新的修订,《免疫学基础与病原生物学》课程课时相应进行了缩减,本文从学时调整后的理论课与实验课教材选购、教学内容精简调整、讲授内容和学生自学内容合理分配等方面做了系统阐述,目的是使中医类专业学生既能掌握本课程基础理论知识、增强动手能力,又能拓宽学生的视野、培养学生自主学习的能力,为后续专业课程的学习打下基础。
语种:
中文
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依托病原生物学课程教学法改革培养大学生创新性学习能力
期刊:
求知导刊 ,2016年(16):129-130 ISSN:2095-624X
作者机构:
湖南中医药大学医学院,湖南 长沙,410206;[魏科; 宁毅; 高强; 陈伶利; 卢芳国] 湖南中医药大学
关键词:
病原生物学;教学法;创新性学习
摘要:
医学生是医药卫生事业的建设者,医学生素质水平的高低影响着医药卫生事业的发展.为了培养医学生的创新性学习能力,我们分别采用LBL 教学法(即授课式教学法)、PBL 教学法(即问题式教学法)、CBL 教学法(即案例式教学法)、TBL 教学法(即团队式教学法)对病原生物学课程的部分教学内容进行教学改革尝试,经过长期的试验分析结果发现,采用这些教学法有利于促进学生对基础知识的学习和掌握,有利于提高学生的学习兴趣,培养大学生的创新性学习能力.
语种:
中文
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A Graphene Oxide–Based Sensing Platform for the Determination of Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus Based on Strand-Displacement Polymerization Recycling and Synchronous Fluorescent Signal Amplification
作者:
Ning, Yi
( 宁毅 ) ;Gao, Qiang
( 高强 ) ;Zhang, Xiaoqing;Wei, Ke
( 魏科 ) ;Chen, Lingli
( 陈伶利 )
期刊:
SLAS Discovery ,2016年21(8):851-857 ISSN:2472-5552
通讯作者:
Chen, LL
作者机构:
[Wei, Ke; Ning, Yi; Gao, Qiang; Chen, Lingli] Hunan Univ Chinese Med, Dept Microbiol, Sch Med, Xueshi Rd 300, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.;[Zhang, Xiaoqing] Hunan Univ Chinese Med, Dept Inorgan Phys Chem, Sch Pharm, Changsha, Hunan, Peoples R China.
通讯机构:
[Chen, LL ] H;Hunan Univ Chinese Med, Dept Microbiol, Sch Med, Xueshi Rd 300, Changsha 410208, Hunan, Peoples R China.
会议名称:
中华中医药学会免疫学分会第二次学术交流会暨中华中医药学会免疫学分会青年委员会成立大会
会议时间:
2016-08-27
会议地点:
深圳
会议论文集名称:
中华中医药学会免疫学分会第二次学术交流会暨中华中医药学会免疫学分会青年委员会成立大会论文集
关键词:
graphene oxide;methicillin-resistant Staphylococcus aureus;mecA gene;signal amplification;biosensor
摘要:
To develop new technology for detecting methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA), a novel fluorescent biosensor based on Klenow fragment (KF)-assisted target recycling amplification and synchronous fluorescence analysis was created. Carboxy-fluorescein (FAM)-labeled single-stranded DNA (ssDNA) containing a capture probe and a signal probe was adsorbed onto the surface of graphene oxide (GO) via π-stacking interactions, resulting in the fluorescence quenching of the dye. When target and primer were introduced, the fluorescence was restored due to P0 being completely released from the surface of the GO. Meanwhile, by using the KF and exploiting the synergistic effect of FAM and the double-stranded DNA (dsDNA)-SYBR Green I duplex structure, the fluorescence in this detection system was considerably amplified and the sensitivity was improved. The proposed strategy for mecA gene analysis showed a good linear range from 1 to 40 nmol/L, with a lower limit of detection of 0.5 nmol/L. In addition, a bacterial sample harboring the mecA gene was also detected, and its lower detection limit was up to 300 colony-forming units (CFU)/mL. Accordingly, this biosensor exhibits high sensitivity and selectivity and has great potential for early clinical diagnosis and treatment. © 2016 Society for Laboratory Automation and Screening.
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英文
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抗纤灵Ⅰ方对小鼠血吸虫病肝纤维化的干预及机制探讨
作者:
刘西霞;黄政德;卢芳国
( 卢芳国 ) ;高强
( 高强 ) ;赖娟;...
期刊:
湖南中医药大学学报 ,2016年36(10):11-17 ISSN:1674-070X
作者机构:
中南大学湘雅医学院医学微生物学教研室;[高强; 杨胜辉; 卢芳国; 向琴; 赖娟; 芦俊; 黄政德] 湖南中医药大学;长沙医学院医学微生物学与免疫学教研室;[刘水平; 刘西霞] 中南大学湘雅医学院
关键词:
抗纤灵Ⅰ方;血吸虫病;肝纤维化;胶原蛋白Ⅰ;胶原蛋白Ⅲ;MMP-1蛋白酶;TIMP蛋白;丹参
摘要:
目的:观察抗纤灵Ⅰ方对小鼠血吸虫病肝纤维化的干预效果,探讨抗纤灵Ⅰ方干预血吸虫肝纤维化的可能分子机制,为抗纤灵Ⅰ方的临床应用提供实验依据。方法采用日本血吸虫尾蚴经皮肤贴片感染昆明小鼠,建立血吸虫病早期肝纤维化动物模型,将建模成功的小鼠用吡喹酮药物连续杀虫治疗后分为抗纤灵Ⅰ方低、中、高剂量组,抗纤灵Ⅰ方的丹参加味方低、中、高剂量组,秋水仙素治疗对照组,蒸馏水灌胃对照组和未做任何处理的模型对照9组。以未感染血吸虫的正常小鼠为肝纤维化阴性对照组。各实验组连续灌胃治疗8周,收集各组小鼠肝脏,HE染色观察肝纤维化病理改变,测量肝组织虫卵肉芽肿平均面积;免疫组化染色方法检测肝组织内胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、MMP-1蛋白酶以及TIMP-1蛋白的表达,比较各组间的蛋白表达差异。结果 HE染色显示,与模型组和正常对照组相比抗纤灵Ⅰ方及其丹参加味方高剂量组可显著减少肝组织虫卵肉芽肿面积(P<0.05);免疫组化染色结果显示,与模型组比较,抗纤灵Ⅰ方及其丹参加味方中、高剂量组干预后小鼠肝组织内的胶原Ⅰ、Ⅲ蛋白以及TIMP-1蛋白表达显著减少(P<0.05)、MMP-1蛋白酶表达显著增加(P<0.05),但抗纤灵Ⅰ方与丹参加味方之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论抗纤灵Ⅰ方及其丹参加味方对小鼠血吸虫病肝纤维化具有较好的干预效果,但两者在疗效上差异无统计学意义,丹参未能增强抗纤灵Ⅰ方的干预肝纤维化效果;抗纤灵Ⅰ方的干预机制可能是通过抑制肝组织内胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ和TIMP-1蛋白的表达,增加MMP-1蛋白酶的表达来发挥作用。
语种:
中文
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免疫学基础与病原生物学课程多元化教学模式探索
期刊:
教育现代化 ,2016年(21):33-34+37 ISSN:2095-8420
作者机构:
湖南中医药大学医学院;[魏科; 宁毅; 高强; 卢芳国] 湖南中医药大学
关键词:
免疫学基础与病原生物学;多元化;教学模式
摘要:
为了调动医学生对基础医学类课程学习的积极性与主动性,我们针对《免疫学基础与病原生物学》课程内容庞杂,知识点繁多的特点,在该课程不同章节内容教学中分别探索用传统教学法、PBL教学法、CBL教学法、TBL教学法教学,并融合多媒体教学的优势,初步构建多元化教学模式,为下一步最优教学模式的选择运用打下基础。研究发现多元化教学模式的推进提高了学生学习基础类课程的积极性和主动性,促进了学生对基础知识的学习、理解和掌握。
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中文
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中医院校《流行病学》课程教学的几点思考
期刊:
课程教育研究 ,2015年(16):257-258 ISSN:2095-3089
作者机构:
湖南中医药大学 湖南 长沙 410208;[宁毅; 高强; 杨胜辉; 卢芳国; 赖娟] 湖南中医药大学
关键词:
中医院校;流行病学;教学思考
摘要:
作者结合中医院校《流行病学》课程的教学实践,阐述了中医院校《流行病学》课程教学中存在的问题与不足,提出应从优化课程设置、重视加强实践教学环节、采取多元化的教学方法和完善考核机制等方面进行改革,以期提高本课程的教学质量。
语种:
中文
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依托课外知识大讲赛活动培养大学生创新性学习能力
期刊:
求知导刊 ,2015年(11):21-22 ISSN:2095-624X
作者机构:
湖南中医药大学医学院;[高强; 杨胜辉; 陈伶利; 卢芳国] 湖南中医药大学
关键词:
课外知识大讲赛;免疫学基础与病原生物学;创新性学习
摘要:
为了培养大学生创新性学习能力,湖南中医药大学(以下简称"我校")病原生物学重点学科基于"免疫学基础与病原生物学"课程举行了课外知识大讲赛活动。本文从这场活动的组织方式、比赛形式、结果判定以及对大学生创新性学习能力的培养等方面对本次活动进行了总结分析,指出本活动的举行对于深化教学改革,激发学习主动性,变学生被动学习为创新性学习起到了很好的促进作用。
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