作者： 毛文点;庹玲玲;齐文续;苏睿智;邓常清;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2021年41(03):350-354 ISSN：1674-070X

作者机构： [齐文续; 庹玲玲; 邹龙; 邓常清; 苏睿智; 毛文点] 湖南中医药大学

关键词： 高效液相色谱法;黄芪;当归;黄酮类成分;阿魏酸;洋川芎内酯I;含量测定

摘要： 目的观察黄芪-当归不同配比对毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、阿魏酸及洋川芎内酯I含量的影响。方法采用水提法制备黄芪、当归及黄芪-当归不同配比（5∶1、1∶1、1∶5）的药液,通过高效液相色谱法对6种主要成分分别进行线性关系、精密度、重复性及回收率检测。结果 6种对照样品线性关系良好,仪器的精密度、样品的重复性及回收率均满足标准。黄芪-当归5∶1配伍时,6种成分的溶出量均未达90%;当配伍为1∶1和1∶5时,6种成分的溶出大多高于或接近100%。结论黄芪-当归以1∶1和1∶5配伍时可促进两者主要成分的溶出,且1∶1配伍时溶出效果最好,说明在1∶1配伍时当归对有效成分的溶出有促进作用。

语种： 中文

作者： 刘彩霞;邓常清

期刊： 湖南中医药大学学报,2021年41(01):151-158 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学医学院,湖南长沙410208;[邓常清; 刘彩霞] 湖南中医药大学

关键词： 血管内皮细胞;氧化应激;心血管疾病;中医药

摘要： 动脉粥样硬化、冠心病等心血管疾病的病理生理基础是病理性血管重构,而血管内皮细胞（vascular endothelial cell,VEC）功能障碍是病理性血管重构的始动环节。VEC是锚定在基底层、与血液成分和细胞直接接触的单层细胞,是氧化应激、活性氧及其相关信号通路的作用靶点。近年来,中药在治疗心血管疾病方面卓有成效,许多中药复方、中药提取物可通过抗氧化作用保护VEC,调节心血管疾病的发生发展。本文对近年来中药及复方改善VEC氧化应激损伤的作用及其相关机制的研究进行总结,为推动其抗氧化研究及应用提供参考。

语种： 中文

作者： 刘惠娜;李艳玲;曹旺;邓常清

期刊： 湖南中医药大学学报,2021年41(01):27-33 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学血管生物学实验室,湖南长沙410208;[李艳玲; 曹旺; 邓常清; 刘惠娜] 湖南中医药大学

关键词： 药根碱;内源性凝血途径;凝血因子Ⅻ;分子对接

摘要： 目的以凝血因子Ⅻ（coagulation factorⅫ, FⅫ）为靶点探讨药根碱抗血栓作用的机制。方法通过Ledock软件将药根碱分子与内源性凝血途径接触激活阶段关键靶蛋白FⅫ、活化凝血因子FⅫ（actived coagulation factorⅫ, FⅫa）、凝血因子Ⅺ（coagulation factorⅪ, FⅪ）和活化凝血因子Ⅺ（actived coagulation factorⅪ, FⅪa）进行分子对接,以结合能低于-5 kcal/mol作为阈值判断药根碱与接触激活因子的结合活性;采用体外凝血实验法检测血浆活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）、血浆凝血酶原时间（plasma prothrombin time, PT）、凝血酶时间（plasma prothrombin time, TT）;乏因子血浆纠正试验检测FⅫ、FⅪ、凝血因子Ⅸ（coagulation factorⅨ, FⅨ）、凝血因子Ⅷ（coagulation factorⅧ, FⅧ）、凝血因子Ⅹ（coagulation factorⅩ, FⅩ）和凝血因子Ⅶ（coagulation factorⅦ, FⅦ）的活性的抑制作用;Western blot法检测药根碱对FⅫ蛋白激活的抑制作用。结果 （1）分子对接实验表明,药根碱与FⅫa、FⅪa结合能均低于-5 kcal/mol,结合活性良好。（2）体外实验中,0.2～0.8 mg/mL药根碱均可显著延长APTT（P＜0.01）,但不延长PT和TT （P＞0.05）。（3）药根碱各剂量均显著降低FⅫ活性（P＜0.01）,药根碱高剂量（0.8 mg/mL）可降低FⅪ活性（P＜0.05）,但对FⅨ、FⅧ、FⅩ及FⅦ活性无显著影响（P＞0.05）。（4）药根碱各剂量均显著抑制FⅫ蛋白的激活（P＜0.01）。结论药根碱与FⅫa对接较好,显著延长APTT,抑制FⅫ蛋白激活,降低血浆FⅫ活性,提示其抗栓作用可能通过抑制FⅫ的活性而发挥。

语种： 中文

作者： 欧阳波;杨筱倩;丁煌;刘晓丹;黄小平;...

期刊： 中国药理学通报,2020年36(10):1470-1476 ISSN：1001-1978

作者机构： [欧阳波; 丁煌; 黄小平; 杨筱倩; 邓常清; 刘晓丹] Key Lab of Hunan Province for Prevention and Treatment of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine on Cardio-cerebral Diseases, Hunan University of Chinese Medicine, Molecular Pathology Iab, Changsha, 410208, China

关键词： 冰片;黄芪甲苷;三七总皂苷;脑缺血/再灌注;神经血管单元;胶质纤维酸性蛋白;神经元特异性核蛋白;层黏连蛋白;基质金属蛋白酶9;水通道蛋白4

摘要： 目的观察冰片配伍黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)和三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)对大鼠脑缺血/再灌注后神经血管单元(NVU)的保护作用。方法脑缺血/再灌注大鼠灌胃给药,测定神经功能缺损、脑梗死体积和海马CA1区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性核蛋白(NeuN)、层黏连蛋白(LN)、水通道蛋白-4(AQP-4)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达。结果冰片配伍AST Ⅳ和PNS能显著改善大鼠神经功能评分(P <0.05),降低脑梗死体积(P <0.05)和脑组织GFAP表达(P <0.01),增加NeuN、LN表达(P <0.01),抑制脑组织AQP-4、MMP-9蛋白表达(P <0.05)。结论冰片配伍AST Ⅳ和PNS对脑缺血/再灌注后具有脑保护作用,其机制可能是减轻了神经元和微血管基底膜损伤、抑制星形胶质细胞过度活化、抑制水通道开放和保护血脑屏障而减轻脑水肿,从而对NVU发挥保护作用。

语种： 中文

作者： 唐标;李峰;邓常清

期刊： 科教文汇(下旬刊),2020年(33):73-74 ISSN：1672-7894

作者机构： 湖南中医药大学生理教研室 湖南·长沙 410208;[李峰; 邓常清; 唐标] 湖南中医药大学

关键词： 新型冠状病毒肺炎疫情;生理学实验;线上教学

摘要： 在新冠肺炎疫情防控期间,高校构建基于虚拟仿真实验平台的生理学实验线上教学模式.课前教师发布任务促进学生自主学习;课中教师讲解实验关键环节和原理,指导学生进行实验虚拟仿真项目的学习和操作;课后进行线上讨论,加深学生对实验环节和原理的理解,并采用线上学习评价与测试结合的方式综合评价学生学习效果.生理学实验线上教学不仅实现了实验教学的"停课不停教、停课不停学",最大限度地提升了学生实验学习的效果,同时也推动了对线上线下结合的混合式实验教学的应用和探索.

语种： 中文

作者： 唐标;李峰;邓常清

期刊： 传播力研究,2020年(20):148-149 ISSN：2096-3866

作者机构： 湖南中医药大学生理教研室

关键词： 生理学;线上教学;自主学习能力

摘要： 湖南中医药大学生理学课程通过转变教学理念,重整教学内容和教学模式,构建以学生为中心,注重学生自主学习能力培养的《生理学》线上混合式教学模式。通过开展线上教学,保障了教学的正常有效实施,培养了学生自主学习能力,确保"停课不停教、停课不停学",同时也推动线上教学相结合的混合式教学在《生理学》教学中应用和探索。

语种： 中文

作者： 李霞;曹旺;唐标;邓常清

期刊： 中草药,2020年51(15):3987-3995 ISSN：0253-2670

通讯作者： Deng, C.-Q.

作者机构： [李霞; 曹旺] College of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410028, China;[唐标] Medical School, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410028, China;[邓常清] College of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha, 410028, China, Medical School, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410028, China

通讯机构： [Deng, C.-Q.] C;College of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, China

关键词： 黄芪;当归;血管内膜增生;网络药理学;作用靶标

摘要： 目的采用网络药理学方法探讨黄芪-当归配伍改善血管内膜增生的药效物质和可能的作用靶点。方法利用TCMSP数据库,获取黄芪-当归的有效成分,利用Pharmmaper数据库搜集活性成分所对应的靶标。通过Genecards、DigSeE和OMIM数据库,收集血管内膜增生相关的靶标,并与药物作用靶标相比较,筛选出共同部分,作为药物成分作用的预测靶标。利用STRING获取预测靶蛋白之间的相互关系,根据相互关系大小筛选出核心靶标。利用Cytoscape 3.6.1软件,绘制"药物-成分-疾病-靶标"网络图、核心靶标相互作用网络图。用R语言进行核心靶标的KEGG通路富集分析和GO生物过程分析。结果收集到黄芪-当归药对的20个活性成分,共得到193个潜在药物作用靶点、487个潜在疾病靶点,主要作用于EGFR、ESR1、ALB、MAPK8、PGR等多个靶标,涉及PI3K-Akt、MAPK、Ras等多条信号通路以发挥抗血管内膜增生的作用。结论基于网络药理学方法,初步探讨了黄芪-当归配伍改善血管内膜增生可能的靶标和信号通路,可为黄芪-当归配伍作用机制的研究提供参考。

语种： 中文

作者： Liu, Cai-xia;Gao, Ge;Qin, Xiao-qun;Deng, Chang-qing;Shen, Xiong-jie

期刊： Orthopaedic Surgery,2020年12(1):286-294 ISSN：1757-7853

通讯作者： Shen, XJ

作者机构： [Liu, Cai-xia; Deng, Chang-qing] Hunan Univ Tradit Chinese Med, Sch Integrated Chinese & Western Med, Changsha, Hunan, Peoples R China.;[Gao, Ge] Cent South Univ, Xiangya Hosp 3, Fac Lab Med, Changsha, Hunan, Peoples R China.;[Qin, Xiao-qun] Cent South Univ, Xiangya Sch Med, Dept Physiol, Changsha, Hunan, Peoples R China.;[Shen, Xiong-jie] Hunan Prov Peoples Hosp, Dept Spine Surg, Changsha 410005, Hunan, Peoples R China.

通讯机构： [Shen, XJ ] H;Hunan Prov Peoples Hosp, Dept Spine Surg, Changsha 410005, Hunan, Peoples R China.

关键词： calcium sulfate;carboxy terminal telopeptide;collagen type 2;interleukin 1beta;sodium chloride;biological marker;C-terminal cross-linking telopeptide of type II collagen, human;collagen type 2;IL1B protein, human;interleukin 1beta;peptide fragment;adult;age;american college of rheumatology criteria;animal experiment;animal model;animal tissue;Article;assessment of humans;body mass;clinical article;controlled study;correlation analysis;diagnostic value;early diagnosis;enzyme linked immunosorbent assay;experimental osteoarthritis;female;human;human tissue;kellgren lawrence score;knee osteoarthritis;male;middle aged;New Zealand White (rabbit);nonhuman;protein urine level;rabbit model;scoring system;tissue section;aged;animal;blood;knee osteoarthritis;Leporidae;metabolism;urine;Aged;Animals;Biomarkers;Collagen Type II;Female;Humans;Interleukin-1beta;Male;Middle Aged;Osteoarthritis, Knee;Peptide Fragments;Rabbits

摘要： Objective: To analyze the correlation between the Kellgren–Lawrence (K-L) score of knee osteoarthritis (KOA) patients with different degrees and their urine concentration of C-terminal telopeptide of collagen type II (CTX-II) and interleukin-1β (IL-1β), and to further evaluate the diagnostic value of CTX-II and IL-1β during the pathological process by producing an experimental osteoarthritis (OA) model in rabbits. Methods: From 1 January 2017 to 31 December 2018, a total of 34 subjects (7 mild, 9 moderate, 9 severe arthritis patients, and 9 healthy individuals) comprising 16 men and 18 women were included in this study. Patients were diagnosed according to the American College of Rheumatology (ACR) criteria. The urine of all subjects was collected to detect the concentration of CTX-II and IL-1β. The rabbits in the KOA group were subjected to protease (control group with saline) injection into the articular cavity of their right knees and immobilization with gypsum. We used radiological and histological examination to identify the KOA model. ELISA was applied to investigate the concentrations of CTX-II and IL-1β in urine and serum, and Spearman's rank correlation analysis was used to analyze the correlation. Results: There was no significant difference in the mean ages and body mass index (BMI) between groups. The mean ages of mild, moderate, and severe arthritis patients and healthy individuals were 54.29 ± 5.76, 58.44 ± 6.44, 59.89 ± 6.75, and 56.67 ± 4.18 years, respectively. The mean BMI of mild, moderate, and severe arthritis patients and healthy individuals were 23.59 ± 1.56, 23.57 ± 2.06, 24.46 ± 1.64, and 23.42 ± 1.35 kg/m2, respectively. The Kellgren–Lawrence (K-L) score was higher with the aggravation of KOA. The K-L scores of mild, moderate, and severe KOA patients were 1.14 ± 0.38, 2.56 ± 0.53, and 3.63 ± 0.52, respectively. The KOA symptoms of patients became more severe, with not only increased K-L scores but also elevated concentrations of CTX-II and IL-1β. Moreover, there was a positive correlation between CTX-II and IL-1β of all subjects (r = 0.974, P &lt; 0.001), between K-L score and urine concentration of CTX-II (r = 0.900, P &lt; 0.001), and between K-L score and IL-1β (r = 0.813, P &lt; 0.001) of all subjects. Both were significantly increased in KOA group rabbits at all time points after surgery. The serum concentration of CTX-II and IL-1β was elevated as early as in the 2nd week (3.69 and 4.25 times) and reached a peak (5.41 and 7.23 times) in the 4th week after surgery. Then, until 12 weeks after surgery, the CTX-II and IL-1β concentrations in the KOA group were slightly reduced and remained around 4.5 and 6.3 times that in the control group. Moreover, there was a positive correlation between the serum concentration of IL-1β and CTX-II (r = 0.967, P &lt; 0.001). Conclusion: CTX-II and IL-1β, which were significantly increased during the process of KOA, can be used as biomolecular markers to provide guidelines for early diagnosis and treatment of KOA. © 2019 The Authors. Orthopaedic Surgery published by Chinese Orthopaedic Association and John Wiley & Sons Australia, Ltd.

语种： 英文

作者： 唐标;唐文静;戴姿薇;佘旭;邓常清

期刊： 中国病理生理杂志,2020年36(7):1178-1184 ISSN：1000-4718

作者机构： 湖南中医药大学医学院,长沙湖南410028;[佘旭; 戴姿薇; 唐文静; 邓常清; 唐标] 湖南中医药大学

关键词： 三七总皂苷;缺氧缺糖/复氧复糖;SH-SY5Y细胞;细胞焦亡

摘要： 目的:探讨三七总皂苷(PNS)对缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R)诱导的SH-SY5Y细胞焦亡的调控作用。方法:以OGD/R诱导构建体外缺血再灌注SH-SY5Y细胞模型,观察PNS对SH-SY5Y细胞活力(CCK-8法)及细胞膜通透性[表示为乳酸脱氢酶(LDH)漏出率和碘化丙啶(PI)染色阳性细胞比例]的影响,分析PNS对细胞中gasdermin D(GSDMD)、GSDMD N端片段(GSDMD-N)、caspase-1和caspase-4蛋白水平变化以及白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18释放的影响。结果:OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞活力显著降低(P<0.01),LDH漏出率和PI染色阳性细胞比例显著升高(P<0.01),即细胞通透性增加;细胞内GSDMD、GSDMD-N、caspase-1及caspase-4蛋白水平显著升高,IL-1β和IL-18释放显著增加(P<0.01)。PNS干预可增强OGD/R抑制的SH-SY5Y细胞活力(P<0.01),降低LDH漏出率和PI染色阳性细胞比例(P<0.05或P<0.01),即降低细胞膜通透性;并降低细胞GSDMD、GSDMD-N、caspase-1及caspase-4蛋白水平(P<0.05或P<0.01),抑制IL-1β和IL-18释放(P<0.05或P<0.01)。结论:PNS可减轻OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞损伤,其机制可能与抑制OGD/R诱导的细胞焦亡有关。

语种： 中文

作者： 谭媖子;刘彩霞;朱秋燕;邓常清

期刊： 中西医结合心脑血管病杂志,2020年18(24):4141-4148 ISSN：1672-1349

作者机构： [朱秋燕; 邓常清; 刘彩霞; 谭媖子] 湖南中医药大学

关键词： 黄芪;当归;黄芪甲苷;黄芪皂苷-Ⅰ;毛蕊异黄酮;毛蕊异黄酮苷;阿魏酸;芒柄花素;血管内皮细胞;氧化损伤;实验研究

摘要： 目的 观察黄芪当归主要活性成分黄芪甲苷、黄芪皂苷-Ⅰ、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸和芒柄花素配伍对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用.方法 以ox-LDL构建HUVECs氧化损伤模型,采用均匀设计实验探讨6种活性成分配伍对氧化损伤HUVECs活性的影响,寻找6种活性成分抗HUVECs氧化损伤的最佳配伍浓度.在此基础上采用药物"敲出/敲入"中药辨识模式,分为正常组、模型组、各药物单用组、各药物敲出组及6种成分配伍组,分别检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、一氧化氮(NO)总含量及一氧化氮合酶(NOS)活性,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,分析各主要成分及其配伍对HUVECs氧化损伤的影响.结果 黄芪、当归6种主要活性成分及配伍均可降低LDH漏出率,减少细胞损伤,且黄芪甲苷和毛蕊异黄酮敲出的LDH漏出率升高,提示6种成分均可抑制内皮细胞损伤,其中以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮作用较强.黄芪、当归6种主要活性成分及其配伍均能增强NOS活性,且黄芪皂苷-Ⅰ单用可增加NO含量,提示6种成分可增加NOS活性,且黄芪皂苷-Ⅰ可增加NO合成,6种成分配伍作用增强.黄芪甲苷和芒柄花素均可促进细胞增殖,而黄芪皂苷-Ⅰ、阿魏酸可抑制细胞增殖,提示黄芪甲苷和芒柄花素可能是促进细胞增殖的有效物质,而黄芪皂苷-Ⅰ、阿魏酸可能对细胞增殖具有负向调控作用.黄芪皂苷-Ⅰ、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸、芒柄花素可降低细胞凋亡率,6种活性成分配伍可增强抗细胞凋亡作用.结论 6种活性成分对血管内皮细胞氧化损伤具有保护作用,这些活性成分配伍可增强抗血管内皮细胞氧化损伤,促进血管内皮细胞功能的修复.

语种： 中文

作者： 刘惠娜;曹旺;邹芳;邓常清

期刊： 中药药理与临床,2020年36(02):126-132 ISSN：1001-859X

作者机构： 湖南中医药大学血管生物学实验室,长沙410208;[曹旺; 邹芳; 邓常清; 刘惠娜] 湖南中医药大学

关键词： 药根碱;动脉血栓;静脉血栓;内源性凝血途径;抗凝系统;纤维蛋白溶解系统

摘要： 目的:探讨药根碱对大鼠动、静脉血栓形成的作用,并分析其是否会导致出血倾向。方法:采用体外凝血实验,检测药根碱对家兔血浆凝血四项活化部分凝血酶原时间( APTT) 、凝血酶原时间( PT) 、凝血酶时间( TT)的影响;采用大鼠FeCl_3诱导的颈总动脉血栓模型和下腔静脉结扎静脉血栓模型,检测血栓形成阻塞时间( OT) 、血栓重量、凝血、抗凝及纤溶等相关指标,分析药根碱对血栓形成的影响;小鼠尾静脉给药后,测定出血时间,初步分析药根碱是否存在导致出血的风险。结果: ①体外实验表明,药根碱在浓度0.4 mg /ml ~ 1.2 mg /ml呈浓度依赖地延长APTT(P < 0.01), 但不延长PT和TT(P > 0.05) 。②在大鼠颈总动脉、下腔静脉血栓模型,药根碱2、3 mg /kg静脉注射可显著延长OT(P < 0.05或0.01), 降低血栓重量(P < 0.01);同时药根碱4 mg /kg可显著延长APTT(P < 0.05) 。但药根碱对PT、TT和血浆血小板、抗凝系统、纤溶系统均无显著影响(P > 0.05) 。③小鼠尾出血实验表明,药根碱2、4 mg /kg对出血时间均无显著影响(P > 0.05) 。结论:药根碱具有确切的抗动、静脉血栓的作用,其抗栓作用与血小板、抗凝系统、纤溶系统无显著相关,可能主要通过作用于内源性凝血途径而发挥抗血栓作用。该药不显著延长出血时间,提示其出血副作用较轻。

语种： 中文

作者： 丁煌;唐三;杨筱倩;刘晓丹;黄小平;...

期刊： 中国药理学通报,2019年35(11):1516-1523 ISSN：1001-1978

作者机构： [丁煌; 唐三; 杨筱倩; 邓常清; 黄小平; 刘晓丹] Molecular Pathology Lab, Key Lab of Hunan Province for Prevention and Treatment of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine on Cardio-cerebral Diseases, Key Lab of Hunan Universities for Cell Biology and Molecular Techniques, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410208, China

关键词： 冰片;黄芪甲苷;三七总皂苷;脑缺血/再灌注;血脑屏障;紧密连接蛋白

摘要： 目的探讨冰片、黄芪甲苷(AST Ⅳ)和三七总皂苷(PNS)配伍对脑缺血/再灌注后血脑屏障(BBB)的影响。方法脑缺血/再灌注大鼠灌胃给药,观察神经功能缺损症状,测定脑组织含水量和BBB通透性、闭锁小带蛋白1(ZO-1)、 ZO-2、咬合蛋白(Occludin)及闭合蛋白5(Claudin-5)表达。结果脑缺血/再灌注后,大鼠出现神经功能缺损症状,神经功能评分和脑含水量增加,BBB破坏。各药物能不同程度减轻上述病理改变,冰片+ AST Ⅳ+ PNS效应最强,优于药物单用及AST Ⅳ+ PNS。脑缺血/再灌注后,ZO-1、ZO-2、Occludin、Claudin-5表达减少。各药物使ZO-1增加,除AST Ⅳ外,上调Occludin表达;冰片+ AST Ⅳ+ PNS还明显上调ZO-2,且上调ZO-1、ZO-2、Occludin的效应优于药物单用及AST Ⅳ+ PNS。结论冰片、AST Ⅳ和PNS能不同程度降低脑缺血/再灌注后BBB通透性的增加,减轻脑水肿,对抗脑组织损伤,三药合用有增强效应,机制可能与协同抑制缺血后ZO-1、ZO-2、Occludin表达下调,保护BBB有关。

语种： 中文

作者： 佘颜;胡雨琴;张荆;蒿玉兴;蔡媛;...

期刊： 中国病理生理杂志,2019年35(8):1379-1386 ISSN：1000-4718

作者机构： 湖南中医药大学血管生物学实验室;[刘新春] 湖南中医药高等专科学校附属第一医院;[蒿玉兴; 张荆; 邓常清; 王睿智; 佘颜; 张蝈蝈; 蔡媛; 胡雨琴] 湖南中医药大学

关键词： 脑缺血再灌注损伤;细胞焦亡;NLRP3炎症小体

摘要： 目的:探讨细胞焦亡在脑缺血再灌注后不同时点海马和皮质区的变化,从NLRP3炎症小体介导的经典焦亡途径探讨其机制,分析细胞焦亡在脑内不同部位损伤中的作用。方法: SD大鼠随机分成假手术组( sham组)与模型组( MCAO/R组),模型组又分为脑缺血再灌注6 h组( MCAO/R 6 h组) 、12 h组( MCAO/R 12 h组)和24 h组( MCAO/R 24 h组) 。右侧改良线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血-再灌注模型。采用神经功能评分、 2,3,5-氯化三苯基四氮唑( TTC)染色法和形态学观察评价神经细胞损伤程度; TUNEL和caspase-1免疫荧光双染检测细胞焦亡; Western blot法检测NLRP3、cleaved caspase-1、pro-caspase-1和白细胞介素1β( IL-1β)蛋白的表达。结果:脑缺血再灌注后不同时间均出现神经功能损伤,TTC染色显示随着再灌注时间的延长,脑梗死体积逐渐增大( P < 0.05) 。海马CA1区及皮质区出现组织结构疏松,间质水肿,神经细胞排列紊乱,胞核染色加深,细胞核碎裂,细胞数量减少等细胞死亡的典型形态学特征。免疫荧光双染检测表明,脑缺血再灌注后不同时点均出现细胞焦亡现象,海马CA1区和皮质区在再灌注12 h和24 h时最明显( P < 0.05) 。Western blot检测结果表明,NLRP3介导细胞经典焦亡通路中的NLRP3、cleaved caspase-1和pro-caspase-1、IL-1β蛋白表达在脑缺血再灌注后均不同程度上调,NLRP3蛋白在海马区再灌注12 h和24 h表达明显增高( P < 0.05),皮质区再灌注6 h表达明显增高( P < 0.05); pro-caspase-1蛋白在海马区再灌注各个时点表达均明显增高( P < 0.05),皮质区再灌注24 h表达明显增高( P < 0.05); cleaved caspase-1蛋白在海马区再灌注12 h表达明显增高( P < 0.05),皮质区再灌注24 h表达明显增高( P < 0.05); IL-1β蛋白表达在海马区再灌注24 h明显增高( P < 0.05),皮质区再灌注6 h表达增高( P < 0.05) 。结论:细胞焦亡参与了脑缺血再灌注后神经细胞损伤,经典焦亡途径在海马和皮质区均发挥重要调控作用,以海马区尤为明显,提示海马区是脑缺血再灌注后细胞焦亡和炎症反应诱发的继发性神经损伤的主要部位。

语种： 中文

作者： 杨筱倩;陈仙蕾;杨仁义;唐标;刘晓丹;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2019年39(04):441-447 ISSN：1674-070X

作者机构： 湖南中医药大学分子病理实验室,中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室,细胞生物学与分子技术湖南省高校重点实验室,湖南 长沙 410208;[黄小平; 杨仁义; 陈仙蕾; 邓常清; 杨筱倩; 刘晓丹; 唐标] 湖南中医药大学

关键词： 冰片;黄芪甲苷;三七总皂苷;脑缺血再灌注;配伍剂量

摘要： 目的探讨冰片配伍黄芪甲苷（astragalosidesⅣ, ASTⅣ）和三七总皂苷（panax notoginseng saponins, PNS）抗脑缺血再灌注损伤的有效剂量。方法采用U6*（64）均匀设计实验,设立6个不同剂量的冰片、ASTⅣ和PNS配伍,予大脑中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）再灌注大鼠灌胃干预,以神经功能评分、脑梗死率、脑含水量、脑组织病理形态、血脑屏障（bloodbrain barrier, BBB）通透性评价药物的作用,对效应指标进行多重线性回归分析,确立3种组（成）分的有效配伍剂量,并在此基础上进行验证。结果均匀设计实验表明,大鼠脑缺血再灌注后,出现明显的神经功能障碍,脑梗死率、脑含水量、神经细胞损伤率和BBB通透性均显著增加。冰片、ASTⅣ、PNS不同剂量配伍对上述指标均有一定的改善作用;多重线性回归分析表明,冰片7.5 mg/kg、ASTⅣ10 mg/kg、PNS25 mg/kg配伍为其抗脑缺血再灌注损伤的有效配伍剂量。验证实验显示,3种药物高、低剂量配伍能显著降低脑缺血再灌注大鼠神经功能评分和脑梗死率,3种药物配伍的效应显著优于各药物单用或ASTⅣ+PNS配伍（P<0.05或P<0.01）。结论冰片、ASTⅣ、PNS配伍可增强抗脑缺血再灌注损伤的效应,3种药物的有效配伍剂量为冰片7.5 mg/kg+ASTⅣ10 mg/kg+PNS 25 mg/kg。

语种： 中文

作者： Zhang, Wei;Zhu, Jia-huan;Xu, Hao;Huang, Xiao-Ping;Liu, Xiao-Dan;...

期刊： Frontiers in Pharmacology,2019年10(JULY):463476 ISSN：1663-9812

通讯作者： Deng, CQ

作者机构： [Xu, Hao; Zhu, Jia-huan; Zhang, Wei; Liu, Xiao-Dan] Hunan Univ Chinese Med, Key Lab Hunan Prov Integrated Tradit Chinese & We, Changsha, Hunan, Peoples R China.;[Deng, Chang-Qing; Huang, Xiao-Ping] Hunan Univ Chinese Med, Key Lab Coll & Univ Hunan Prov Cytobiol & Mol Bio, Changsha, Hunan, Peoples R China.

通讯机构： [Deng, CQ ] H;Hunan Univ Chinese Med, Key Lab Coll & Univ Hunan Prov Cytobiol & Mol Bio, Changsha, Hunan, Peoples R China.

关键词： Astragali radix (AR);Angelicae Sinensis Radix;hemopoiesis;Hematopoietic stem sell;cyclin

摘要： <jats:p>Although the compatibility of Astragali Radix (AR) and Angelicae Sinensis Radix (ASR) has favorable effect on promoting hematopoiesis in traditional Chinese medicine (TCM), the main active components and pharmacological mechanism are unknown. We investigated the five active components and its mechanisms <jats:italic>in vitro</jats:italic> and <jats:italic>in vivo</jats:italic>. Five active components of Astragalus glycosides (AST), Formononetin (FRM), Ferulic acid (FRA), Calycosin (CAL), and Calycosin-7-glucoside (CLG), which could be absorbed in intestinal tract, were detected in this study. The peripheral blood, hematopoietic growth factors (HGFs), and hematopoietic progenitor cells (HPCs) colony were observed to evaluate the effect of these five active components promoting hematopoiesis. Furthermore, hematopoietic stem cell (HSC) proliferation, aging, cycle, and related proteins were detected to explore the mechanism of these five components promoting HSC proliferation. <jats:bold>i)</jats:bold> The <jats:italic>in vivo</jats:italic> experiments showed that the combination of the five active components could remarkably increase the number of RBCs, WBCs, PLTs, and content of Hb in peripheral blood and the area of bone marrow hematopoietic tissue, as well as thrombopoietin (TPO), erythropoietin (EPO), granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF), and colony of CFU-GM, CFU-MK, CFU-E, and BFU-E in serum. Each of these five components promoted the recovery of RBCs and Hb, and increased TPO, CFU-MK, and CFU-E. All components except for AST increased the CFU-GM. FRA increased the number of WBCs, the area of bone marrow hematopoietic tissue, and BFU-E. FRA and AST promoted PLT recovery. FRA and CAL improved the content of GM-CSF. FRA, CAL, and CLG improved the content of EPO. <jats:bold>ii)</jats:bold> The <jats:italic>in vitro</jats:italic> experiments showed that FRA, FRM, and AST significantly promoted cell proliferation, reduced the positive rate and G0/G1 cells, and increased G2/M + S cells and the expression of cyclin D1 and CDK4 proteins in aging HSCs. Furthermore, the combination of five components had the best effect. Taken together, the five active components of AST, FRM, FRA, CAL, and CLG were the main pharmacodynamic substances of the AR-ASR compatibility, which promoted hematopoiesis. The combination of them had a synergistic effect. The mechanism of promoting hematopoiesis may be relevant to regulating cyclin-related proteins, promoting cell cycle transformation, and promoting HSC proliferation.</jats:p>

语种： 英文

发明/设计人： 邓常清;刘惠娜;曹旺

申请/专利权人： 湖南中医药大学

申请/专利号： CN201910381375.X

申请时间： 2019-05-08

公开号： CN109939110A

公开时间： 2019-06-28

主申请人地址： 410208 湖南省长沙市岳麓区象嘴路湖南中医药大学含浦校区

摘要： 本发明涉及医药技术领域，公开了药根碱在制备抗血栓药物中的应用。其作用于内源性凝血途径的接触激活阶段,在发挥抗血栓作用的同时,不延长出血时间,出血副作用轻。本发明还公开了一种以药根碱为活性成分的药物，可制成片剂、胶囊剂或者针剂等多种剂型，可用于防止血栓的形成。

作者： 唐标;唐文静;邓常清

期刊： 中国中医药信息杂志,2019年26(7):109-113 ISSN：1005-5304

作者机构： 湖南中医药大学医学院,湖南长沙,410208;[唐文静; 邓常清; 唐标] 湖南中医药大学

关键词： 黄芪;三七;脑缺血;网络药理学;靶点;信号通路

摘要： 目的采用网络药理学方法探讨黄芪和三七主要有效成分配伍抗缺血性脑损伤作用机制,为成分筛选提供参考。方法文献检索结合前期研究确定黄芪和三七抗缺血性脑损伤主要有效成分,通过DRAR-CPI数据库预测有效成分作用靶点,多数据库联合检索脑缺血相关疾病靶点。采用Cytoscape3.2.1软件构建有效成分-靶点网络、作用靶点蛋白相互作用(PPI)网络及疾病靶点PPI网络,交叉融合并筛选核心靶点。利用DAVID数据库对核心靶点进行生物过程和信号通路富集分析。结果筛选出的194个核心靶点主要关联脑缺血凋亡、自噬、神经营养因子的保护作用、血管新生及炎症反应等多个过程。此外,靶点参与了脑缺血中PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、神经营养因子信号通路、血管新生途径及多种炎症反应途径。结论上述生物过程和通路介导了黄芪和三七主要有效成分抗缺血性脑损伤的潜在机制,可为成分筛选提供参考。

语种： 中文

作者： 徐昊;黄小平;张伟;邓常清

期刊： 中国药理学通报,2019年35(5):707-713 ISSN：1001-1978

作者机构： [Wei Z.; 徐昊; 邓常清; 黄小平] Molecular Pathology Lab, Key Lab of Hunan Prov. for Prev. and Treatm. of Intgd. Traditional Chinese and W. Med. on Cardio-Cerebr. Dis., Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, 410208, China

关键词： 黄芪;当归;阿魏酸;黄芪甲苷;芒柄花素;毛蕊异黄酮;毛蕊异黄酮苷;造血

摘要： 目的 探讨黄芪和当归的主要活性成分配伍对骨髓抑制小鼠模型的促造血作用.方法 对芪归1:1配伍提取物测定5种主要活性成分阿魏酸、芒柄花素、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷含量,以确定配伍剂量.小鼠随机分为空白对照组、模型组和各给药组.空白对照组给予溶剂灌胃7 d;模型组同上灌胃,于d 3腹腔注射环磷酰胺,连续3 d;各药物组灌胃给药,同上造模.检测外周血象、血清造血生长因子(HGF)含量、造血祖细胞集落数.结果 芪归配伍提取物和活性成分配伍均可明显增加外周血白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板数(Pt)、血红蛋白(HGB)含量和骨髓造血组织面积,明显增加血清粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、促血小板生成素(TPO)、促红细胞生成素(EPO)含量和骨髓粒-单核细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)、红系集落形成单位(CFU-E)和爆式红系集落形成单位(BFU-E)数,两者作用相近.各成分中,阿魏酸可促进WBC和骨髓造血组织面积的恢复;5种成分均可促进RBC和HGB的恢复;阿魏酸和黄芪甲苷可促进Pt的恢复.5个成分均可升高TPO含量;阿魏酸和毛蕊异黄酮可升高GM-CSF含量;阿魏酸、毛蕊异黄酮和毛蕊异黄酮苷可升高EPO含量.除黄芪甲苷外,其它4种成分均可使CFU-GM增加;5种活性成分均可增加CFU-MK、CFU-E;仅阿魏酸可增加BFU-E.结论 黄芪当归配伍发挥补血作用的主要药效物质是以上5种活性成分,这些活性成分配伍对促进造血可发挥增效作用.

语种： 中文

作者： 邓怒骄;陈凌波;谭瑛子;兰斌;邓常清;...

期刊： 湖南中医药大学学报,2019年39(04):465-469 ISSN：1674-070X

作者机构： [邓怒骄; 张文兴; 邓常清; 兰斌; 谭瑛子; 陈凌波] 湖南中医药大学

关键词： 栀子苷;酵母多糖;肠黏膜屏障;炎症反应

摘要： 目的探讨栀子苷对酵母多糖（zymosan, Zym）致大鼠肠黏膜屏障损害的作用。方法通过腹腔注射Zym-石蜡混悬液建立大鼠肠黏膜屏障损害模型,将模型大鼠随机分为模型组、栀子苷组、乌司他丁组,腹腔注射Zym后即刻干预,12 h后重复干预1次。另设正常对照组。造模24 h后测定大鼠血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β, IL-1β）、白介素-6（interleukin-6, IL-6）、白介素-10（interleukin-10, IL-10）、D-乳酸（D-lactate, D-LA）、二胺氧化酶（diamine oxidase,DAO）、内毒素（endotoxin, ET）水平,并取小肠进行病理组织学检查。结果模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、D-LA、DAO、ET水平较正常对照组显著增高（P<0.01）;病理组织学检查可见黏膜上皮水肿,黏膜上皮细胞排列紊乱,黏膜上皮炎症细胞增多,固有层松散、充血;与模型组比较,栀子苷可降低肠黏膜屏障损害大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、D-LA、DAO及ET水平,增加IL-10水平（P<0.05, P<0.01）,减轻肠组织病理性损伤。结论栀子苷可以减轻Zym导致的大鼠炎症反应,对Zym引起的肠黏膜屏障损害具有保护作用。

语种： 中文

作者： 彭熙炜;阎卉芳;黄娟;朱嘉欢;徐昊;...

期刊： 中华中医药杂志,2019年34(2):580-584 ISSN：1673-1727

作者机构： 湖南中医药大学,中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室,长沙410208;湖南中医药大学附属常德医院,常德415000;[黄小平; 邓常清; 阎卉芳; 朱嘉欢; 彭熙炜; 徐昊; 黄娟] 湖南中医药大学

关键词： 黄芪;当归;血管内膜增生;配伍;炎性反应

摘要： 目的:研究黄芪-当归配伍对大鼠血管内膜增生炎性反应的影响。方法:将SD大鼠分为芪归1∶1组、芪归5∶1组、单用黄芪组、单用当归组、阿托伐他汀组、模型组和假手术组,采用球囊导管损伤大鼠血管内皮造成胸腹主动脉血管内膜增生模型,同时灌胃药物,连续给药14d后行腹主动脉穿刺采血分离血浆,ELISA法检测血浆炎性反应因子白细胞介素-1β(IL -1β)、肿瘤坏死因子-α(TN F -α)、单核细胞趋化因子-1 (MCP-1)含量;取胸腹主动脉,免疫组化法检测血管局部细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1 (VCAM-1)的表达。结果:内膜损伤14d后,血管局部和血浆中炎性反应因子含量均显著增加。与模型组比较,单用当归组、芪归1∶1组、芪归5∶1组、阿托伐他汀组血管局部ICAM-1、VCAM-1、IL-1β表达显著低于模型组(P<0.05),单用黄芪组血管局部IL-1β表达显著降低(P﹤0.05)。与模型组比较,阿托伐他汀组血浆中IL-1β、 TNF-α、MCP-1含量显著降低(P﹤0.01)。结论:黄芪-当归配伍能抑制血管内膜增生时血管局部的炎性反应,其中当归是主要效应药物,黄芪-当归配伍可增强其抗血管局部炎性反应的作用。但黄芪、当归及其配伍对全身炎性反应无显著抑制作用。

语种： 中文